β-烟酰胺腺嘌呤二核苷二钠 (NADH) — 还原型辅酶I，线粒体能量代谢核心辅因子与生化检测关键试剂

一、产品基本信息

二、产品简介与核心优势

NADH（β-烟酰胺腺嘌呤二核苷二钠，还原型辅酶I）是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD⁺）的还原形式，是生物体内最重要的辅酶之一，俗称还原型辅酶I。NADH与NAD⁺构成一对核心的氧化还原对，在细胞能量代谢中发挥着不可替代的关键枢纽作用。

NADH的主要功能是作为电子和质子的高能载体，将分解代谢过程中脱下的氢（2个电子和1个质子）传递给呼吸链，通过氧化磷酸化合成ATP，为细胞提供能量。具体而言，1分子NADH经线粒体呼吸链氧化可生成约2.5-3分子ATP，是细胞能量的重要来源。

NADH在340 nm处具有特征吸收峰（摩尔吸光系数ε340 ≈ 6.3×10³ L·mol⁻¹·cm⁻¹），而其氧化形式NAD⁺在此波长几乎无吸收。这一独特的光谱特性使其成为临床生化诊断试剂盒的核心原料，广泛应用于乳酸脱氢酶（LDH）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）等项目的340 nm酶法检测体系。

NADH还参与细胞信号事件，作为聚（ADP-核糖）聚合酶（PARPs）的底物。同时，NAD⁺/NADH依赖性去乙酰化酶在能量代谢应激反应中发挥关键作用，与癌症生物学、糖尿病和神经退行性疾病密切相关。

核心优势：

• 线粒体能量代谢核心：作为电子和质子的高能载体，通过呼吸链驱动ATP合成，是细胞能量代谢的关键枢纽
  
• 340 nm酶法检测基石：利用NADH在340 nm的特征吸收，构成LDH、ALT、AST等临床生化检测的物理学基础
  
• NAD⁺/NADH氧化还原对：与NAD⁺构成重要氧化还原对，是研究细胞代谢状态和氧化还原平衡的核心工具
  
• 多领域应用：涵盖IVD诊断原料、酶活性测定、生物催化、细胞活力分析、神经退行性疾病研究等
  
• 高纯度品质：湖南汇百益提供纯度≥98%的高品质产品，批次稳定性好
  

三、NADH的生物学功能

3.1 线粒体能量代谢

NADH是线粒体呼吸链的关键电子供体，在糖酵解、β-氧化和三羧酸循环（TCA循环）等分解代谢过程中不断产生。

能量转化机制：

1分子NADH经呼吸链氧化可生成约2.5-3分子ATP。NADH分子是线粒体中能量产生链的关键控制标志物，NADH水平的上升指示代谢失衡的出现。

3.2 抗氧化防御

NADH通过以下途径发挥抗氧化作用：

• 抑制自由基生成：通过电子传递链将电子传递给氧，同时抑制自由基生成
  
• 增加谷胱甘肽含量：通过维持还原型谷胱甘肽（GSH）水平，保护细胞免受氧化损伤
  
• 抑制细胞色素C释放：抑制线粒体细胞色素C释放，抗细胞凋亡
  

3.3 特征光谱特性

NADH与NAD⁺在紫外吸收光谱上的显著差异是酶法检测的技术基础：

这一特性使得通过检测340 nm处吸光度的变化，可以实时监测依赖NADH/NAD⁺的酶促反应进程，这是临床自动生化分析仪检测多项指标的技术基础。

3.4 NADH与NAD⁺的互变

NADH和NAD⁺之间的转化是细胞代谢的核心环节：

氧化方向：NADH + H⁺ → NAD⁺ + 2e⁻ + 2H⁺（电子传递链）

还原方向：NAD⁺ + 2e⁻ + H⁺ → NADH（脱氢酶催化）

催化互变的酶包括乳酸脱氢酶（LDH）、苹果酸脱氢酶（MDH）、谷氨酸脱氢酶（GDH/GLDH）等。

四、主要应用领域

4.1 临床生化诊断（IVD）试剂原料（核心应用Ⅰ）

NADH是340 nm酶法检测体系的核心原料，利用其与NAD⁺在340 nm吸光值的差异，可定量测定多种临床指标。湖南汇百益作为专业的诊断试剂原料供应商，提供高纯度NADH产品。

肝功能检测：

心肌酶谱与肾功能检测：

4.2 NADH依赖性酶活性测定（核心应用Ⅱ）

NADH作为多种脱氢酶的底物或产物，是酶活性测定中的关键试剂。

典型检测酶类：

4.3 细胞活力与能量代谢研究（核心应用Ⅲ）

NADH的氧化还原状态是表征活体内线粒体功能的最佳参数。紫外光可以在线粒体中激发NADH产生荧光，用来监测线粒体功能。

应用场景：

• 线粒体功能评估
  
• 细胞能量代谢分析
  
• 药物线粒体毒性筛选
  
• 氧化应激机制研究
  

研究方法：通过监测细胞内NADH荧光强度（激发/发射约340/460 nm），评估线粒体代谢状态。

4.4 生物催化与酶法合成

NADH作为多种氧化还原酶的辅因子，在生物催化领域具有重要应用。

应用示例：

• 手性醇、手性胺的酶催化合成（需NADH作为还原当量）
  
• 精细化学品的绿色合成
  
• 辅酶再生系统的开发
  

前沿研究：中国科学院李灿院士团队实现了太阳能光电催化仿生NAD(P)H辅酶的高效再生，其中1,4-NADH选择性达到99%、转化率接近100%，再生得到的NADH可用于酶催化的氢化还原反应。

4.5 神经退行性疾病研究

NADH已被应用于治疗多种疾病的研究，包括：

• 帕金森病：线粒体功能障碍研究
  
• 阿尔茨海默病：能量代谢与认知功能关联研究
  
• 慢性疲劳综合征：细胞能量代谢评估
  

研究意义：2015年《美国科学院院报》研究表明，人体下丘脑中NAD⁺/NADH含量随年龄增长显著下降，造成脑细胞能量供给不足，与衰老相关疾病密切相关。

4.6 酶循环测定（Enzyme Cycling Assay）

NADH可用于酶循环测定，以放大对低浓度生物相关酶或代谢物活性的检测。

技术原理：利用酶偶联反应循环放大信号，检测灵敏度比传统方法提高100-1000倍。

五、实验方案

5.1 NADH溶液配制

NADH易溶于水，推荐使用去离子水或适当缓冲液配制。

100 mM NADH储存液配制（10 mL）：

NADH浓度换算参考：

• 1 mM ≈ 0.709 mg/mL
  
• 10 mM ≈ 7.09 mg/mL
  
• 100 mM ≈ 70.9 mg/mL
  

重要提示：NADH溶液在碱性条件下（如pH 9的NaHCO₃缓冲液）更稳定。研究表明，10 mg/mL NADH在NaHCO₃缓冲液（pH 9）中，4°C保存4周后仍含有至少95%的NADH。

5.2 LDH活性检测方案

NADH在LDH检测中作为反应底物，通过监测340 nm吸光度的下降速率计算LDH活性：

反应原理：
丙酮酸 + NADH + H⁺ —LDH→ 乳酸 + NAD⁺

检测条件：

• 波长：340 nm（监测NADH消耗速率）
  
• 温度：37°C
  
• 反应时间：连续监测60-120秒
  
• 计算：ΔA/min，换算为酶活性单位
  

5.3 ALT活性检测方案

ALT检测采用IFCC推荐方法，通过偶联反应消耗NADH：

反应原理：
L-丙氨酸 + α-酮戊二酸 —ALT→ 丙酮酸 + L-谷氨酸
丙酮酸 + NADH + H⁺ —LDH→ 乳酸 + NAD⁺

检测方法：340 nm连续监测NADH消耗速率

5.4 NADH/NAD⁺比值测定

实验方法：

1. 裂解细胞或组织样本
   
2. 酶标循环法或高效液相色谱（HPLC）检测
   
3. 分别测定NADH和NAD⁺含量
   
4. 计算NADH/NAD⁺比值
   

5.5 工作浓度参考

六、技术要点与注意事项

6.1 关键实验注意事项

溶液稳定性：

• NADH水溶液在碱性条件下（pH 8.5-10）最稳定
  
• 酸性条件下（pH <5）NADH迅速降解
  
• 推荐使用NaHCO₃缓冲液（pH 9）配制储存液
  

避光操作：

• NADH对光敏感，暴露于光线下迅速氧化降解
  
• 储存和工作液均应避光（使用棕色容器或铝箔包裹）
  
• 实验操作应在弱光环境下进行
  

温度控制：

• 粉末：-20°C冷冻密封保存，可稳定保存2-3年
  
• 溶液：分装后-20°C避光保存，避免反复冻融
  
• 溶液在2-8°C避光可短期保存（约1周）
  

吸湿性：

• NADH具有吸湿性，粉末开封后应密封干燥保存
  
• 称量时快速操作，使用后立即盖紧瓶盖
  

6.2 储存条件

6.3 安全信息

6.4 兼容性信息

七、NADH vs. NAD⁺：对比分析

选择建议：

• 乳酸脱氢酶（LDH）、ALT、AST检测：首选NADH，作为反应底物被消耗
  
• LDH生成型检测（乳酸→丙酮酸）：选择NAD⁺
  
• 能量代谢研究（NADH/NAD⁺比值）：两者均需
  
• 线粒体功能荧光监测：选择NADH
  

八、产品质量标准

湖南汇百益新材料有限公司提供的NADH产品严格执行以下质量标准：

湖南汇百益通过优化工艺与精制技术，将产物纯度稳定控制在≥98%，严格管控水分和紫外吸光度比值等指标。产品经IVD应用验证，确保作为酶法检测底物的性能可靠。

包装规格：

• 实验室规格：200mg、500mg、1g、5g
  
• 工业规格：25g、100g、500g、1kg
  
• 可按客户需求定制包装
  

九、供应商介绍：湖南汇百益新材料有限公司

湖南汇百益新材料有限公司成立于2014年，位于湖南省怀化市洪江区工业园，拥有50,000平方米生产基地。公司是一家专注于生物基础试剂研发、生产与销售的“国家高新技术企业”、“湖南省专精特新企业”，拥有独立研发试验中心和生产基地，并已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证。

公司先后获得“怀化市工程技术研究中心”“湖南师范大学化学生物学功能材料产学研基地”“创新创业大赛湖南省优秀企业”“湖南新材料企业”等一系列荣誉称号。产品远销东南亚、欧美等多个国家和地区，得到全球客户认可和信赖。

依托强大的生产平台与技术实力，公司可灵活提供OEM代工服务与个性化定制方案，如提纯、精制加工等，以满足客户多元化需求。旗下品牌“汇百试剂”，通过提供性能稳定可靠、品质媲美进口、成本更具优势的国产试剂，为生物医药、体外诊断、生物工程及科研机构等领域的客户提供基础材料解决方案，以实现关键生物基础试剂国产化替代与关键试剂本土化供应，切实解决中国生物试剂的供应瓶颈问题，并持续助力科研突破与产业创新升级。

公司研发、生产、销售各种高纯生化试剂，包括：

• 糖苷系列：IPTG、ONPG、PNPG、DTT、x-gal、x-gluc等
  
• 生物缓冲剂：Tricine、HEPES、MOPS、CAPS、TAPS、MES、BES等
  
• 表面活性剂与去污剂：SDS、SURFACTIN、EMPIGEN BB、CHAPS、CHAPSO、SB-8至SB-18系列等
  
• 检测试剂：泛影酸钠、G-418硫酸盐、DTE、TCEP-HCl、PMSF、PNPP、ABTS、TMB、TMB-PS、鲁米诺、异鲁米诺、ABEI、D-荧光素钾盐、NADH、NAD⁺、NADP⁺等
  
• 高纯生化试剂：DEPC、异硫氰酸胍、盐酸胍、PMSF、MTT、BSA、WST-8等
  

湖南汇百益提供的NADH产品具有以下突出优势：

• 高纯度：纯度≥98%，批次稳定性好，符合IVD原料标准
  
• 高活性：酶活性验证合格，确保作为检测底物的效率
  
• 低杂质：严格控制水分和紫外吸光度比值
  
• 现货供应：常备库存，支持快速发货，满足紧急生产需求
  
• 规格灵活：提供200mg至1kg多种规格，可按需定制包装
  
• 专业包装：采用密封、防潮、避光包装，-20°C冷冻运输保存
  
• 技术支持：专业技术团队提供IVD试剂配方优化、酶活性测定方法开发等全程技术指导
  
• 源头工厂：自产自销，具备价格优势和供应稳定性
  

十、采购与使用建议

在采购NADH（CAS 606-68-8）时，建议重点关注以下几点：

• 纯度要求：对于IVD诊断试剂盒生产和酶活性测定等敏感应用，应选择纯度≥98%的高品质产品，确保检测结果的准确性。

• 应用方向选择：
• IVD试剂盒开发（ALT/AST/LDH/BUN检测）：NADH是340 nm酶法检测体系的核心原料，是该类试剂盒的必需组分。
• NADH依赖性酶活性测定：作为多种脱氢酶（LDH、MDH、GLDH等）的底物或产物。
• 线粒体能量代谢与细胞活力研究：利用NADH的荧光特性监测线粒体功能。
• 生物催化：作为氧化还原酶的辅因子。

• 与NAD⁺的选择区别：
• 需要电子供体（还原剂）：选择NADH
• 需要电子受体（氧化剂）：选择NAD⁺
• 需要检测NAD⁺/NADH总量：两者均需

• 储存条件：
• 粉末形态应于-20°C下冷冻密封保存，注意避光防潮。
• 溶液应在-20°C避光分装保存，避免反复冻融。
• NADH对光和热敏感，开封后请立即密封瓶口，使用铝箔包裹容器。

• 溶液配制：
• 使用去离子水或NaHCO₃缓冲液（pH 9）配制。
• 避免在酸性条件（pH<5）下配制或储存。
• 配制后建议分装保存，避免反复冻融。

• 安全操作规范：
• NADH对皮肤和眼睛具有刺激性，操作时务必佩戴实验服、护目镜及手套。
• 建议在通风良好的环境中称量，防止吸入粉尘。
• 本产品仅限科研和IVD试剂生产使用，不用于临床诊断或治疗。

• 兼容性提示：
• NADH在340 nm处有特征吸收峰，是酶法检测的基础。
• NADH在碱性条件下较稳定（pH 8.5-10），建议在碱性缓冲液中配制储存液。
• 避免与强氧化剂接触。

十一、联系我们

如需获取NADH（CAS 606-68-8）的产品报价、样品或技术支持，请联系湖南汇百益新材料有限公司：

• 产品咨询：13319523173
  
• 订购邮箱：ivy@hnhbsj.com
  
• 官方网站：https://www.hbsjxcl.com/
  
• 公司地址：湖南省怀化市洪江区工业园8号
  

声明：本产品仅供科研使用，不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书，并遵守实验室安全操作规范。