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烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(还原型)(NADPH) — 还原型辅酶Ⅱ,合成代谢核心辅因子与抗氧化防御关键试剂

2026-06-01 11:23:23

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一、产品基本信息项目内容产品名称烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(还原型)英文名称β-Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phospha

一、产品基本信息

项目内容
产品名称烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(还原型)
英文名称β-Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate, Reduced Form (NADPH)
中文别名还原型辅酶Ⅱ四钠盐、还原型三磷酸吡啶核苷酸四钠盐、二氢烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸四钠盐、TPNH₂Na₄
CAS号2646-71-1
分子式C₂₁H₂₆N₇Na₄O₁₇P₃
分子量833.35 g/mol(四钠盐)
EINECS号220-163-3
MDL号MFCD00036263
外观白色至淡黄色结晶粉末
纯度≥99%(HPLC),湖南汇百益
溶解性溶于水(~50 mg/mL),溶液呈淡黄色澄清
储存条件-20°C冷冻保存,避光防潮
用途合成代谢核心辅因子、谷胱甘肽还原酶(GR)检测、抗氧化研究、IVD诊断试剂原料、生物催化辅因子再生、细胞氧化还原状态监测

二、产品简介与核心优势

NADPH(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸,还原型辅酶Ⅱ)是NADP⁺的还原形式,是生物体内最重要的还原型辅酶之一,俗称还原型辅酶Ⅱ。NADPH与NADP⁺构成一对核心的氧化还原对,在细胞合成代谢和抗氧化防御中发挥着不可替代的关键作用。

NADPH的核心生物学功能是作为还原剂和氢负供体(氢负离子供体),参与多种还原性生物合成反应和抗氧化防御系统。具体而言:

合成代谢还原力来源:NADPH是脂肪酸、胆固醇和核苷酸等生物大分子合成的还原力来源,在脂类和胆固醇生物合成以及脂肪酰链延伸中帮助电子传递。

抗氧化防御核心:NADPH是谷胱甘肽还原酶(GR)的必需辅酶,用于再生还原型谷胱甘肽(GSH),保护细胞免受活性氧簇(ROS)积累的氧化损伤。

NADPH在340 nm处具有特征吸收峰(摩尔吸光系数ε340 ≈ 6.3×10³ L·mol⁻¹·cm⁻¹),而其氧化形式NADP⁺在此波长几乎无吸收。这一独特的光谱特性使其成为临床生化诊断试剂盒的关键原料,广泛应用于谷胱甘肽还原酶(GR)和谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-Px)等项目的340 nm酶法检测体系。

NADPH在体内主要通过磷酸戊糖途径(PPP)产生。随着年龄增长,NADPH水平会因前体NAD⁺的年龄依赖性损失而下降,NADP⁺/NADPH是抵抗衰老诱导的细胞氧化的最重要氧化还原对。

核心优势

  • 合成代谢核心还原力:作为氢负供体,是脂肪酸、胆固醇和核苷酸生物合成的关键辅因子
  • 抗氧化防御中枢:作为谷胱甘肽还原酶的辅酶,是细胞内抗氧化系统的核心组分
  • 340 nm酶法检测基石:利用NADPH在340 nm的特征吸收,构成GR、GSH-Px等临床生化检测的物理学基础
  • NADP⁺/NADPH氧化还原对:与NADP⁺构成重要氧化还原对,是研究细胞代谢状态和氧化还原平衡的核心工具
  • IVD诊断试剂核心原料:广泛应用于谷胱甘肽还原酶(GR)测定试剂盒、谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-Px)试剂盒等
  • 生物催化与辅因子再生:作为多种NADPH依赖性氧化还原酶的辅因子,在生物催化中具有重要应用
  • 高纯度品质:湖南汇百益提供纯度≥99%的高品质产品,批次稳定性好

三、NADPH的生物学功能

3.1 合成代谢的核心还原力

NADPH作为NADP⁺的还原形式,是多种合成代谢途径的还原力来源:

脂肪酸合成:脂肪酸合成酶系需要NADPH作为还原剂,每合成一分子棕榈酸需要14分子NADPH。

胆固醇合成:HMG-CoA还原酶及后续还原反应均依赖NADPH。

核苷酸合成:核糖核苷酸还原为脱氧核糖核苷酸的过程需要NADPH提供电子。

脂肪酸链延伸:在组织特异性脂肪酸延伸过程中,NADPH作为还原剂。

3.2 抗氧化防御系统

NADPH是谷胱甘肽还原酶的必需辅酶,对于维持细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)水平至关重要。

作用机制
GSSG(氧化型谷胱甘肽)+ NADPH + H⁺ —谷胱甘肽还原酶→ 2GSH(还原型谷胱甘肽)+ NADP⁺

GSH的作用

  • 清除细胞内活性氧(ROS)和自由基
  • 维持蛋白质巯基的还原状态
  • 参与解毒反应

NADPH保护细胞免受氧化应激,从而延缓组织和机体衰老,果蝇、酵母、线虫和哺乳动物等多种生物的研究表明,NADPH水平影响寿命。

3.3 特征光谱特性

NADPH与NADP⁺在紫外吸收光谱上的显著差异是酶法检测的技术基础:

化合物最大吸收波长摩尔吸光系数特征
NADPH(还原型)260 nm、340 nmε340 ≈ 6.3×10³ L·mol⁻¹·cm⁻¹有340 nm吸收
NADP⁺(氧化型)260 nmε260 ≈ 1.78×10⁴ L·mol⁻¹·cm⁻¹340 nm几乎无吸收

这一特性使得通过检测340 nm处吸光度的变化,可以实时监测依赖NADPH/NADP⁺的酶促反应进程。

3.4 NADPH与NADH的主要区别

对比项NADPH(本品)NADH
CAS号2646-71-1606-68-8
中文名还原型辅酶Ⅱ四钠盐还原型辅酶Ⅰ二钠盐
结构特点NADH的2‘-磷酸化衍生物基础形式
主要功能合成代谢(还原性生物合成)分解代谢(能量产生)
关键作用脂肪酸、胆固醇合成;抗氧化防御糖酵解、TCA循环、ATP合成
抗氧化防御核心角色间接参与
340 nm检测有特征吸收有特征吸收

选择建议

  • 合成代谢研究、抗氧化实验、GR/GSH-Px检测首选NADPH
  • 分解代谢研究、能量代谢分析:选择NADH

四、主要应用领域

4.1 临床生化诊断(IVD)试剂原料(核心应用Ⅰ)

NADPH是340 nm酶法检测体系的核心原料,利用其与NADP⁺在340 nm吸光值的差异,可定量测定多种临床指标。湖南汇百益作为专业的诊断试剂原料供应商,提供高纯度NADPH产品。

谷胱甘肽还原酶(GR)测定试剂盒(紫外比色法)

参数内容
检测原理GSSG + NADPH + H⁺ —GR→ 2GSH + NADP⁺
检测方法340 nm连续监测NADPH消耗速率
NADPH作用作为反应底物,被消耗

谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-Px)试剂盒

参数内容
检测原理GSH-Px催化有机过氧化物氧化GSH → GSSG;GR催化NADPH还原GSSG → GSH,同时NADPH氧化为NADP⁺
检测方法340 nm检测NADPH吸光度减少速率
NADPH作用作为GR的辅酶,通过NADPH消耗量计算GSH-Px活性

4.2 抗氧化与氧化应激研究(核心应用Ⅱ)

NADPH是研究细胞氧化应激和抗氧化防御机制的核心工具

应用场景

  • 细胞氧化应激机制研究
  • 抗氧化剂活性评价
  • 谷胱甘肽还原酶(GR)系统功能研究
  • 衰老与抗氧化防御机制探索
  • NOX酶活性研究(NOX可被NADPH激活产生ROS)

研究意义:NADP⁺/NADPH是抵抗衰老诱导的细胞氧化的最重要氧化还原对。

4.3 NADPH依赖性酶活性测定(核心应用Ⅲ)

NADPH作为多种NADPH依赖性氧化还原酶的底物或产物,是酶活性测定中的关键试剂。

典型检测酶类

检测酶类检测原理检测方法NADPH作用
谷胱甘肽还原酶(GR)GSSG + NADPH → 2GSH + NADP⁺340 nm监测NADPH消耗底物
硫氧还蛋白还原酶(TrxR)依赖NADPH340 nm监测NADPH消耗底物
NADPH依赖性脱氢酶底物 + NADPH → 产物 + NADP⁺340 nm监测NADPH消耗底物
一氧化氮合成酶(NOS)依赖NADPH作为电子供体340 nm或荧光检测辅因子

4.4 生物催化与辅因子再生(核心应用Ⅳ)

NADPH作为多种氧化还原酶的辅因子,在生物催化领域具有重要应用。

应用场景

  • 手性醇、手性胺的酶催化合成
  • 精细化学品的绿色合成
  • 天然产物的生物合成

辅因子再生策略:由于NADPH价格昂贵且不稳定,实施原位辅因子再生是经济可行的对策。主要再生方法包括:

  • 酶偶联系统:如硫氧还蛋白系统(TR/Trx1)用于NADPH再生
  • 脱氢酶系统:如BstFDH作为NADPH再生酶
  • NADPH再生效率:通过优化反应条件可大幅提升转化效率

4.5 细胞能量代谢与信号转导研究

NADPH参与细胞内多种代谢过程的调控:

  • 磷酸戊糖途径(PPP)研究:NADPH是PPP途径的主要产物
  • 细胞氧化还原信号转导
  • 免疫细胞功能研究:免疫细胞中NADPH还能参与自由基的生成,这些自由基能够破坏引起氧爆发的病原体

五、实验方案

5.1 NADPH溶液配制

NADPH易溶于水,推荐使用去离子水或碳酸氢钠缓冲液配制。

10 mg/mL NADPH储存液配制(10 mL)

步骤操作说明
1称取100 mg NADPH粉末使用分析天平准确称量
2加入8 mL NaHCO₃缓冲液(pH 9)碱性条件提高稳定性
3轻轻搅拌溶解避免剧烈搅拌
4定容至10 mL补加缓冲液至终体积
5储存分装后-20°C冷冻保存,避光

NADPH浓度换算参考(以NADPH-Na₄分子量833.35计):

  • 1 mg/mL ≈ 1.2 mM
  • 10 mg/mL ≈ 12 mM

重要提示

  • NADPH溶液在碱性条件下(pH 8.5-9.5)最稳定
  • 酸性条件下(pH<5)NADPH迅速降解
  • 研究表明,10 mg/mL NADPH在NaHCO₃缓冲液(pH 9)中,2-8°C保存4周后仍含有至少95%的NADPH

5.2 谷胱甘肽还原酶(GR)活性检测方案

NADPH在GR检测中作为反应底物,通过监测340 nm吸光度的下降速率计算GR活性:

反应原理
GSSG(氧化型谷胱甘肽)+ NADPH + H⁺ —GR→ 2GSH(还原型谷胱甘肽)+ NADP⁺

检测条件

  • 波长:340 nm(监测NADPH消耗速率)
  • 温度:37°C
  • 缓冲液:磷酸盐缓冲液(pH 7.4-7.6)
  • NADPH浓度:0.1-0.5 mM
  • 计算:ΔA340/min,换算为酶活性单位

5.3 谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-Px)检测方案

NADPH作为GR的辅因子,通过偶联反应消耗NADPH:

反应原理
GSH-Px催化有机过氧化物氧化GSH → GSSG
GSSG + NADPH + H⁺ —GR→ 2GSH + NADP⁺

检测方法:340 nm连续监测NADPH消耗速率,通过NADPH消耗量计算GSH-Px活性。

5.4 NADPH/NADP⁺比值测定

实验方法

  1. 裂解细胞或组织样本
  2. 酶标循环法或高效液相色谱(HPLC)检测
  3. 分别测定NADPH和NADP⁺含量
  4. 计算NADPH/NADP⁺比值(反映细胞还原状态)

5.5 工作浓度参考

应用场景推荐NADPH浓度备注
GR活性检测0.1-0.5 mM速率法,底物过量
GSH-Px活性检测0.1-0.5 mM通过偶联反应消耗
NADPH依赖性酶活性测定0.1-1.0 mM根据酶活性优化
细胞氧化应激研究0.1-0.5 mM细胞培养基添加
生物催化与辅因子再生0.5-5 mM需配合再生系统
IVD试剂盒按标准配方已标准化

六、技术要点与注意事项

6.1 关键实验注意事项

溶液稳定性

  • NADPH水溶液在碱性条件下(pH 8.5-9.5)最稳定
  • 酸性条件下(pH<5)NADPH迅速降解
  • 推荐使用NaHCO₃缓冲液(pH 9)配制储存液

避光操作

  • NADPH对光敏感,暴露于光线下迅速氧化降解
  • 储存和工作液均应避光(使用棕色容器或铝箔包裹)
  • 实验操作应在弱光环境下进行

温度控制

  • 粉末:-20°C冷冻密封保存,可稳定保存2-3年
  • 溶液:分装后-20°C避光保存,避免反复冻融
  • 溶液在2-8°C避光可短期保存(约1周)

吸湿性

  • NADPH具有吸湿性,粉末开封后应密封干燥保存
  • 称量时快速操作,使用后立即盖紧瓶盖

6.2 储存条件

条件要求
粉末(长期)-20°C冷冻密封保存,避光防潮
溶液(短期)2-8°C避光保存,1周内稳定
溶液(长期)分装后-20°C冷冻保存,避免反复冻融
有效期粉末在-20°C干燥条件下可稳定保存2-3年

6.3 安全信息

分类信息
物理状态白色至淡黄色结晶粉末
刺激性可能对眼睛、呼吸系统有刺激性
个人防护实验服、护目镜、手套
操作在通风良好处操作,避免吸入粉尘
储存密封、干燥、-20°C冷冻保存

6.4 兼容性信息

实验技术兼容性说明
340 nm比色法✅ 标准方法NADPH特征吸收
BCA蛋白定量✅ 兼容工作浓度范围内无干扰
Bradford蛋白定量✅ 兼容兼容性好
SDS-PAGE✅ 兼容不与蛋白质结合
酶活性测定✅ 标准底物多种NADPH依赖性酶的必需辅因子
亲和层析✅ 兼容低分子量,不干扰层析

七、NADPH vs. NADP⁺:对比分析

对比项NADPH(本品)NADP⁺
CAS号2646-71-153-59-8
中文名还原型辅酶Ⅱ四钠盐氧化型辅酶Ⅱ
状态还原型氧化型
340 nm吸收(特征峰)
主要功能还原剂(电子供体)氧化剂(电子受体)
生物角色合成代谢、抗氧化接受电子
IVD应用GR、GSH-Px等消耗型检测

选择建议

  • 需要还原剂(氢供体)选择NADPH
  • 需要电子受体(氧化剂):选择NADP⁺
  • GR/GSH-Px检测试剂盒:选择NADPH
  • 合成代谢研究:选择NADPH

八、产品质量标准

湖南汇百益新材料有限公司提供的NADPH产品严格执行以下质量标准:

检测项目质量指标
外观白色至淡黄色结晶粉末
纯度(HPLC)≥99%
分子式C₂₁H₂₆N₇Na₄O₁₇P₃
分子量833.35
溶解性50 mg/mL溶于水,溶液淡黄色澄清
水分≤8.0%
储存条件-20°C冷冻保存,避光防潮

湖南汇百益通过优化工艺与精制技术,将产物纯度稳定控制在≥99%,产品经IVD应用验证,确保作为酶法检测底物的性能可靠。

包装规格

  • 实验室规格:100mg、500mg、1g、5g
  • 工业规格:10g、25g、100g
  • 可按客户需求定制包装

九、供应商介绍:湖南汇百益新材料有限公司

湖南汇百益新材料有限公司成立于2014年,位于湖南省怀化市洪江区工业园,拥有50,000平方米生产基地。公司是一家专注于生物基础试剂研发、生产与销售的“国家高新技术企业”“湖南省专精特新企业”,拥有独立研发试验中心和生产基地,并已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证。

公司先后获得“怀化市工程技术研究中心”“湖南师范大学化学生物学功能材料产学研基地”“创新创业大赛湖南省优秀企业”“湖南新材料企业”等一系列荣誉称号。

依托强大的生产平台与技术实力,公司可灵活提供OEM代工服务个性化定制方案,如提纯、精制加工等,以满足客户多元化需求。旗下品牌“汇百试剂”,通过提供性能稳定可靠、品质媲美进口、成本更具优势的国产试剂,为生物医药、体外诊断、生物工程及科研机构等领域的客户提供基础材料解决方案,以实现关键生物基础试剂国产化替代与关键试剂本土化供应,切实解决中国生物试剂的供应瓶颈问题,并持续助力科研突破与产业创新升级。

公司研发、生产、销售各种高纯生化试剂,包括:

  • 糖苷系列:IPTG、ONPG、PNPG、DTT、x-gal、x-gluc等
  • 生物缓冲剂:Tricine、HEPES、MOPS、CAPS、TAPS、MES、BES等
  • 表面活性剂与去污剂:SDS、SURFACTIN、EMPIGEN BB、CHAPS、CHAPSO、SB-8至SB-18系列等
  • 检测试剂:泛影酸钠、G-418硫酸盐、DTE、TCEP-HCl、PMSF、PNPP、ABTS、TMB、TMB-PS、鲁米诺、异鲁米诺、ABEI、D-荧光素钾盐、NADPH、NAD⁺、NADH、NADP⁺等
  • 高纯生化试剂:DEPC、异硫氰酸胍、盐酸胍、PMSF、MTT、BSA、WST-8等

湖南汇百益提供的NADPH产品具有以下突出优势:

  • 高纯度:纯度≥99%,批次稳定性好,符合IVD原料标准
  • 高活性:酶活性验证合格,确保作为检测底物的效率
  • 低杂质:严格控制水分和紫外吸光度
  • 现货供应:常备库存,支持快速发货,满足紧急生产需求
  • 规格灵活:提供100mg至100g多种规格,可按需定制包装
  • 专业包装:采用密封、防潮、避光包装,-20°C冷冻运输保存
  • 技术支持:专业技术团队提供IVD试剂配方优化、酶催化工艺开发等全程技术指导
  • 源头工厂:自产自销,具备价格优势和供应稳定性

十、采购与使用建议

在采购NADPH(CAS 2646-71-1)时,建议重点关注以下几点:

纯度要求:对于IVD诊断试剂盒生产和酶活性测定等敏感应用,应选择纯度≥99%的高品质产品,确保检测结果的准确性。

应用方向选择
IVD试剂盒开发(GR/GSH-Px检测):NADPH是340 nm酶法检测体系的核心原料,是该类试剂盒的必需组分。
NADPH依赖性酶活性测定:作为多种NADPH依赖性氧化还原酶(GR、TrxR等)的底物。
抗氧化与氧化应激研究:利用NADPH作为谷胱甘肽还原酶辅酶的特性。
生物催化与辅因子再生:作为氧化还原酶的辅因子,需配合再生系统使用。

与NADH的选择区别
需要还原力用于合成代谢/抗氧化防御选择NADPH
需要电子供体用于能量代谢(ATP合成):选择NADH
GR/GSH-Px检测:必须选择NADPH

储存条件
• 粉末形态应于-20°C下冷冻密封保存,注意避光防潮。
• 溶液应在-20°C避光分装保存,避免反复冻融。
• NADPH对光和热敏感,开封后请立即密封瓶口,使用铝箔包裹容器。
• 溶液在2-8°C避光可短期保存,但长期存放必须冷冻。

溶液配制
• 使用去离子水或NaHCO₃缓冲液(pH 9) 配制。
• 避免在酸性条件(pH<5)下配制或储存。
• 研究表明,10 mg/mL NADPH在NaHCO₃缓冲液(pH 9)中,2-8°C保存4周后仍含有至少95%的NADPH。
• 配制后建议分装保存,避免反复冻融。

安全操作规范
• NADPH对皮肤和眼睛具有刺激性,操作时务必佩戴实验服、护目镜及手套。
• 建议在通风良好的环境中称量,防止吸入粉尘。
• 本产品仅限科研和IVD试剂生产使用,不用于临床诊断或治疗。

兼容性提示
• NADPH在340 nm处有特征吸收峰,是酶法检测的基础。
• NADPH在碱性条件下较稳定(pH 8.5-10),建议在碱性缓冲液中配制储存液。
• 避免与强氧化剂接触。

十一、联系我们

如需获取NADPH(CAS 2646-71-1)的产品报价、样品或技术支持,请联系湖南汇百益新材料有限公司:

  • 产品咨询:13319523173
  • 订购邮箱:ivy@hnhbsj.com
  • 官方网站https://www.hbsjxcl.com/
  • 公司地址:湖南省怀化市洪江区工业园8号

声明:本产品仅供科研使用,不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书,并遵守实验室安全操作规范。


作者: 汇百益-百博士
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烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(还原型)(NADPH) — 还原型辅酶Ⅱ,合成代谢核心辅因子与抗氧化防御关键试剂
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