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盐酸胍— 高效蛋白变性剂,分子生物学与生物制药核心试剂

2026-05-25 16:45:43

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一、产品基本信息项目内容产品名称盐酸胍英文名称Guanidine Hydrochloride中文别名胍盐酸盐、氨基甲脒盐酸盐、氨基甲烷脒盐CAS号50-01-1

一、产品基本信息

项目内容
产品名称盐酸胍
英文名称Guanidine Hydrochloride
中文别名胍盐酸盐、氨基甲脒盐酸盐、氨基甲烷脒盐
CAS号50-01-1
分子式CH₅N₃·HCl / CH₆ClN₃
分子量95.53 g/mol 
MDL号MFCD00013026
EINECS号200-002-3
外观白色结晶或结晶性粉末
纯度≥99%(湖南汇百益),分子生物学级≥99.5%
熔点178-185°C 
溶解性易溶于水(~6 M)和乙醇,水溶液呈中性 
储存条件室温密封干燥保存
用途蛋白变性剂、RNA/DNA提取、包涵体溶解、蛋白质复性研究

二、产品简介与核心优势

盐酸胍(Guanidine Hydrochloride)是一种高效蛋白质变性剂(离液剂),是分子生物学和生物化学实验中应用最广泛的试剂之一。它能够通过破坏蛋白质的氢键结构和疏水相互作用,使蛋白质分子去折叠、丧失天然构象和生物活性。

盐酸胍与异硫氰酸胍同属胍盐家族,两者在核酸和蛋白质研究中具有互补的应用场景。盐酸胍的主要优势在于其温和的变性-复性可逆性:它既能有效变性蛋白质,又能在去除后使蛋白质重新折叠恢复活性,这使得盐酸胍成为包涵体蛋白溶解和蛋白质复性研究的首选工具。

此外,盐酸胍还被广泛用于RNA分离,通过解离核蛋白复合物并抑制RNase活性,保护RNA不被降解。 在生物制药领域,盐酸胍是包涵体蛋白纯化工艺中的核心原料

核心优势

  • 高效蛋白质变性:作为强离液剂,可溶解不溶性或变性的蛋白质(如包涵体)
  • 可逆变性:与异硫氰酸胍不同,盐酸胍变性后可通过透析或稀释去除,使蛋白质复性恢复活性,是蛋白质复性研究的关键试剂
  • RNA提取必需:解离核蛋白并抑制RNase,是RNA分离的核心组分
  • 溶解能力更强:对某些难溶性包涵体蛋白的溶解能力优于尿素
  • 无氨基甲酰化风险:与尿素不同,盐酸胍不会引起蛋白质的氨基甲酰化修饰
  • 分子生物学级品质:湖南汇百益提供≥99%高纯度产品,严格控制核酸酶残留

三、作用机制

3.1 蛋白质变性原理

盐酸胍作为离液剂(Chaotropic Agent),通过以下机制使蛋白质变性:

Step 1:破坏水合层

  • 胍离子干扰蛋白质分子周围的水合层
  • 降低水分子与蛋白质之间的氢键相互作用

Step 2:氢键破坏

  • 胍离子与蛋白质的羰基氧和酰胺氮形成氢键
  • 竞争性破坏蛋白质内部的氢键网络

Step 3:疏水相互作用破坏

  • 胍离子的正电荷与带负电的氨基酸残基相互作用
  • 破坏维持蛋白质三级结构的疏水相互作用

Step 4:蛋白质去折叠

  • 蛋白质的二级结构(α-螺旋、β-折叠)被破坏
  • 蛋白质分子伸展为无规则卷曲状态

3.2 溶解能力比较:盐酸胍 vs. 尿素

对比项盐酸胍尿素
变性强度更强中等
溶解能力能溶解尿素不能溶解的包涵体对某些包涵体溶解不完全
化学修饰风险可能引起氨基甲酰化
变性可逆性良好良好
溶液稳定性稳定尿素易分解
主要应用强变性需求、包涵体溶解常规变性需求

选择建议:对于难溶性包涵体蛋白,盐酸胍是优于尿素的选择

3.3 RNase抑制作用

盐酸胍通过以下方式保护RNA:

  • 解离核蛋白复合物,释放RNA
  • 使RNase蛋白质结构去折叠,丧失酶活性
  • 在RNA提取缓冲液中常与β-巯基乙醇等还原剂联用

四、主要应用领域

4.1 包涵体蛋白溶解与纯化(核心应用Ⅰ)

盐酸胍是包涵体蛋白纯化工艺中溶解步骤的核心试剂。在重组蛋白表达中,目的蛋白常以不溶性的包涵体形式存在,需要用强变性剂溶解后才能进行后续的纯化和复性。

标准操作流程

步骤操作条件
1. 菌体破碎高压均质或超声破碎4°C
2. 包涵体收集离心(12,000×g,30分钟)4°C
3. 洗涤洗涤缓冲液洗涤2-3次去除杂质
4. 溶解6-8 M盐酸胍溶解室温,1-2小时
5. 澄清离心(12,000×g,30分钟)取上清

浓度选择

  • 6 M盐酸胍:常规包涵体溶解 
  • 8 M盐酸胍:高度不溶性包涵体
  • 推荐加热至35°C溶解30分钟 

4.2 蛋白质复性研究(核心应用Ⅱ)

盐酸胍变性具有可逆性,是研究蛋白质折叠和复性的理想工具。

复性方法

  • 稀释复性:将变性蛋白缓慢稀释到复性缓冲液中
  • 透析复性:逐步去除盐酸胍,使蛋白质缓慢重新折叠
  • 层析柱上复性:在亲和层析柱上进行梯度洗脱复性

典型研究流程

  1. 高浓度盐酸胍(6-8 M)变性蛋白质
  2. 稀释或透析降低盐酸胍浓度
  3. 蛋白质自发重新折叠为天然构象
  4. 检测复性蛋白质的生物活性

4.3 RNA提取与纯化(核心应用Ⅲ)

盐酸胍在RNA分离中具有重要应用,用于解离核蛋白并抑制RNase。

提取缓冲液典型配方

组分终浓度作用
盐酸胍4-6 M蛋白变性、RNase抑制
Tris-HCl(pH 7.5)50 mM缓冲体系
EDTA10 mM螯合金属离子
β-巯基乙醇0.1 M还原剂,抑制RNase

适用样本类型

  • 动物组织、培养细胞
  • 血液样本
  • 植物组织
  • 细菌、酵母

4.4 蛋白质纯化中的其他应用

在蛋白质纯化过程中,盐酸胍有多种应用:

溶解不溶性蛋白

  • 溶解包涵体蛋白 
  • 溶解聚集的蛋白质沉淀

亲和纯化缓冲液

  • 用于Ni-琼脂糖蛋白结合的孵育缓冲液
  • 用于减少非特异性结合 

蛋白质提取

  • 用于从组织中提取水溶性蛋白 
  • 用于均质分解脑组织 

4.5 医药与有机合成中间体

盐酸胍在制药工业中作为合成中间体:

  • 磺胺类药物合成:磺胺嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶等
  • 叶酸合成的重要原料
  • 2-氨基嘧啶等化合物的合成 

4.6 分析化学应用

在分析化学中,盐酸胍可用于:

  • 检定金、铱、锇、铂和钌等金属 
  • 作为染料中间体 

五、实验方案

5.1 储存液配制

6 M盐酸胍溶液(常用工作浓度):

配制体积盐酸胍称取量溶剂
100 mL57.3 g去离子水
500 mL286.5 g去离子水
1 L573 g去离子水

配制步骤

  1. 称取适量盐酸胍粉末
  2. 加入去离子水至约80%终体积
  3. 加热至35-40°C搅拌溶解(盐酸胍溶解过程吸热)
  4. 冷却后定容至终体积
  5. 调节pH至所需范围(如需要)
  6. 0.22 μm滤膜过滤除菌(如需)

重要提示

  • 室温下盐酸胍在水中的溶解度约为6 M 
  • 配制8 M溶液需加热至35°C并保温约30分钟 
  • 盐酸胍溶液对金属有轻微腐蚀性,避免使用金属容器

5.2 包涵体溶解标准流程

溶解缓冲液配方(50 mL)

组分终浓度用量
盐酸胍6 M28.65 g
Tris-HCl(pH 8.0)50 mM2.5 mL(1 M)
EDTA1 mM0.1 mL(0.5 M)
DTT(可选)10 mM
去离子水补至50 mL

操作流程

  1. 包涵体沉淀以1:10-1:20(w/v)比例加入溶解缓冲液
  2. 室温搅拌或摇动1-2小时
  3. 12,000×g离心30分钟去除不溶物
  4. 上清即为溶解的变性蛋白

5.3 蛋白质复性参考方案

稀释复性法

  1. 将变性蛋白溶液缓慢滴入复性缓冲液(不含盐酸胍)
  2. 复性液中蛋白终浓度控制在0.01-0.1 mg/mL
  3. 4°C缓慢搅拌过夜
  4. 浓缩复性蛋白

透析复性法

  1. 变性蛋白装入透析袋
  2. 对含递减浓度盐酸胍的缓冲液梯度透析
  3. 终步透析至不含盐酸胍的缓冲液

5.4 工作浓度参考

应用场景推荐浓度备注
包涵体溶解6-8 M常规6 M,难溶者用8 M 
RNA提取裂解液4-6 M与Tris、EDTA等联用
蛋白质变性研究1-8 M根据蛋白质稳定性选择
蛋白质提取缓冲液4-6 M组织/细胞蛋白提取 
亲和纯化孵育缓冲液1-4 M减少非特异性结合 

5.5 注意事项

储存稳定性

  • 盐酸胍在储存过程中可能结块,但产品质量不受影响 
  • 从结块和粉末状产品制备的溶液效果相同

吸湿性

  • 盐酸胍具有吸湿性,应密封保存于干燥环境 
  • 使用后立即盖紧瓶盖

溶解要点

  • 配制高浓度溶液(>6 M)时需加热(35°C)助溶 
  • 溶解过程吸热,溶液会变冷

安全信息

  • 有毒,半数致死量(小鼠,腹腔)500mg/kg 
  • 危险声明:H302(吞咽有害)、H315(皮肤刺激)、H319(严重眼刺激)
  • 操作时佩戴手套和护目镜

废水处理

  • 避免直接排放,建议按当地环保法规处理

六、盐酸胍 vs. 异硫氰酸胍:对比分析

湖南汇百益提供完整的胍盐产品线,两者应用场景互补:

对比项盐酸胍(本品)异硫氰酸胍
CAS号50-01-1593-84-0
分子式CH₆ClN₃C₂H₆N₄S
分子量95.53118.16
变性强度更强
RNase抑制强效
可逆性(易于复性)
病毒灭活一般强效
主要应用包涵体溶解、蛋白质复性RNA提取、病毒保存液
是否用于复性(首选)
氨基甲酰化风险

选择建议

  • 包涵体蛋白溶解与复性首选盐酸胍,可逆性好,复性成功率高
  • RNA提取:两者均可,异硫氰酸胍RNase抑制更强
  • 需要后续复性的实验:选择盐酸胍
  • 病毒灭活保存液:选择异硫氰酸胍

七、产品质量标准

湖南汇百益新材料有限公司提供的盐酸胍产品严格执行以下质量标准:

检测项目质量指标分子生物学级
外观白色结晶或结晶性粉末白色结晶
含量(滴定法)≥99.0%≥99.5%
熔点178-185°C180-185°C
pH(25°C,6 M)4.6-6.04.6-6.0
溶解性6 M溶于水,无色澄清6 M溶于水,无色澄清
水分≤0.5%≤0.3%
灼烧残渣≤0.1%≤0.05%
重金属(Pb)≤0.0005%≤0.0002%
吸光度(260nm,6M)≤0.03
吸光度(280nm,6M)≤0.04
DNase/RNase未检出

湖南汇百益通过优化合成工艺与精制技术,将产物纯度稳定控制在≥99%,分子生物学级产品纯度≥99.5%,严格管控水分、重金属及紫外吸光度指标,确保无核酸酶残留,适合分子生物学级应用。

包装规格

  • 实验室规格:100g、500g、1kg
  • 工业规格:5kg、25kg 
  • 可按客户需求定制包装

八、供应商介绍:湖南汇百益新材料有限公司

湖南汇百益新材料有限公司成立于2014年,位于湖南省怀化市洪江区工业园8号,拥有50,000平方米生产基地。公司是一家专注于生物基础试剂研发、生产与销售的“国家高新技术企业”“湖南省专精特新企业”,拥有独立研发试验中心和生产基地,并已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证。

公司先后获得“怀化市工程技术研究中心”、“湖南师范大学化学生物学功能材料产学研基地”、“创新创业大赛湖南省优秀企业”、“湖南新材料企业”等一系列荣誉称号。核心产品DTT荣获“湖南省首批次重点新材料产品”认定。

依托强大的生产平台与技术实力,公司可灵活提供OEM代工服务个性化定制方案,如提纯、精制加工等,以满足客户多元化需求。旗下品牌“汇百试剂”,通过提供性能稳定可靠、品质媲美进口、成本更具优势的国产试剂,为生物医药、体外诊断、生物工程及科研机构等领域的客户提供基础材料解决方案,以实现关键生物基础试剂国产化替代与关键试剂本土化供应,切实解决中国生物试剂的供应瓶颈问题,并持续助力科研突破与产业创新升级。

公司研发、生产、销售各种高纯生化试剂,包括:

  • 糖苷系列:IPTG、ONPG、PNPG、DTT、x-gal、x-gluc等
  • 生物缓冲剂:Tricine、HEPES、MOPS、CAPS、TAPS、MES、BES等
  • 表面活性剂与去污剂:SDS、SURFACTIN、EMPIGEN BB、CHAPS、SB-8至SB-18系列等
  • 检测试剂:泛影酸钠、PCA钙、G-418硫酸盐、DTE、TCEP-HCl、PMSF、PNPP、ABTS、TMB、TMB-PS、鲁米诺、异鲁米诺、ABEI、MU-Gal、D-荧光素钾盐等
  • 高纯生化试剂:DEPC、异硫氰酸胍、盐酸胍、PMSF、MTT、BSA、WST-8等 

湖南汇百益提供的盐酸胍产品具有以下突出优势:

  • 高纯度:纯度≥99%(分子生物学级≥99.5%),批次稳定性好
  • 分子生物学级品质:无DNase/RNase残留,适合RNA提取等高灵敏度应用
  • 现货供应:常备库存,支持快速发货,满足紧急实验需求
  • 规格灵活:提供从百克级到公斤级(100g、500g、1kg、5kg、25kg)的产品 
  • 专业包装:采用密封、防潮包装,常温运输保存
  • 技术支持:专业技术团队提供全程使用指导与问题解答
  • 源头工厂:自产自销,具备价格优势和供应稳定性

九、采购与使用建议

在采购盐酸胍(CAS 50-01-1)时,建议重点关注以下几点:

  1. 纯度要求:对于包涵体溶解和蛋白质纯化,常规纯度≥99%即可;对于RNA提取等敏感应用,建议选择分子生物学级(≥99.5%) 产品,确保无核酸酶残留。
  2. 溶解性验证:产品应完全溶于水,6 M浓度下溶液应无色澄清。配制高浓度溶液(如8 M)需加热至35°C并保温30分钟
  3. 紫外吸光度指标:分子生物学级产品6 M溶液在260 nm和280 nm处吸光度应≤0.03和≤0.04,这是评价产品核酸纯度的关键指标。
  4. 储存条件室温密封干燥保存,盐酸胍具吸湿性,使用后立即盖紧瓶盖。
  5. 结块不影响质量:储存过程中可能结块,产品的质量不受影响,溶解后效果与粉末状产品相同。
  6. 溶解要点:盐酸胍溶解过程吸热,溶液会变冷;配制时可将容器置于温水浴中促进溶解。
  7. 安全操作:盐酸胍具有一定毒性,操作时佩戴手套和护目镜。
  8. 与异硫氰酸胍的区别:如需蛋白质复性,选择盐酸胍;如需RNA提取病毒灭活,选择异硫氰酸胍。

十、联系我们

如需获取盐酸胍(CAS 50-01-1)的产品报价、样品或技术支持,请联系湖南汇百益新材料有限公司:

  • 产品咨询:13319523173
  • 订购邮箱:ivy@hnhbsj.com
  • 官方网站https://www.hbsjxcl.com/
  • 公司地址:湖南省怀化市洪江区工业园8号 

声明:本产品仅供科研使用,不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书,并遵守实验室安全操作规范。


作者: 汇百益-百博士
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盐酸胍— 高效蛋白变性剂,分子生物学与生物制药核心试剂
一、产品基本信息项目内容产品名称盐酸胍英文名称Guanidine Hydrochloride中文别名胍盐酸盐、氨基甲脒盐酸盐、氨基甲烷脒盐CAS号50-01-1
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