焦碳酸二乙酯 (DEPC) — RNA酶抑制剂，分子生物学无RNase环境构建核心试剂

一、产品基本信息

二、产品简介与核心优势

DEPC（焦碳酸二乙酯）是一种强效、广谱、不可逆的核糖核酸酶（RNase）抑制剂，是分子生物学实验室中构建无RNase环境的基础工具试剂。它通过与RNase活性中心的组氨酸咪唑环发生乙氧甲酰化反应，共价修饰酶活性位点，使其永久失活。与其它RNase抑制剂不同，DEPC以化学方式彻底灭活RNase，而非可逆结合，能够从根本上消除RNase污染的风险。

在RNA提取、RT-PCR、Northern blot等对RNA完整性要求极高的实验中，DEPC的预处理步骤是确保实验结果准确可靠的关键前提。DEPC以0.1%（v/v）浓度处理去离子水、缓冲液及实验器皿，可彻底灭活环境中潜在的RNase。随后通过高温处理（高压灭菌或煮沸），DEPC可完全分解为无毒的乙醇和二氧化碳，易于从体系中去除，不影响后续实验。

此外，DEPC还是蛋白质组学研究中组氨酸和酪氨酸残基的特异性化学修饰探针，以及DNA二级结构研究中的重要工具。

核心优势：

• RNase强效灭活：与RNase活性中心组氨酸共价结合，作用不可逆，灭活彻底
  
• 分子生物学必备：RNA相关实验（RT-PCR、Northern blot、qPCR）的试剂和耗材预处理关键试剂
  
• 操作简便标准化：0.1%浓度处理，高压灭菌后残留完全分解，体系无残留
  
• 多领域应用：蛋白质组学研究（His/Tyr残基修饰）、DNA结构分析、钙通道功能研究等
  
• 高性能品质：湖南汇百益提供纯度≥99%的高品质产品，批次稳定性好
  

三、作用机制

3.1 RNase抑制原理

DEPC是一种高效的烷化剂，通过以下机制灭活RNase：

Step 1：靶向识别

• RNase活性中心的组氨酸残基含有咪唑环结构
  
• DEPC分子中的活性酯基团识别并接近咪唑环
  

Step 2：共价修饰

• DEPC与咪唑环发生乙氧甲酰化反应
  
• 组氨酸残基被共价修饰，结构发生改变
  

Step 3：酶失活

• 修饰后的RNase活性中心构象被破坏
  
• RNase丧失催化活性，且为不可逆失活
  

3.2 水解与去除机理

DEPC在水溶液中不稳定，可通过以下方式完全去除：

水解反应：DEPC + H₂O → 乙醇 + CO₂

去除方法：

• 高压灭菌（常用） ：121°C处理15-20分钟，DEPC完全分解
  
• 高温煮沸：煮沸15分钟可消除残留DEPC
  
• 长时间静置：室温下缓慢分解
  

3.3 与胺类化合物的反应

DEPC对胺类化合物敏感，可与Tris、HEPES等含胺基的缓冲液迅速反应失效。因此，含胺缓冲液不可用DEPC直接处理——这是DEPC使用中的关键注意事项。

⚠️ 安全警告：DEPC与氨水溶液混合会产生潜在致癌物氨基甲酸乙酯（urethane），使用时需严格避免与氨接触。

四、主要应用领域

4.1 RNA相关试剂与耗材预处理（核心应用Ⅰ）

DEPC是分子生物学实验室构建无RNase环境的标准试剂，用于处理RNA实验中使用的各类试剂和耗材。

标准处理流程：

应用场景：

• RNA提取实验的试剂和水预处理
  
• RT-PCR/qPCR反应的试剂配制
  
• Northern blot和斑点杂交实验
  
• 体外转录反应体系准备
  

4.2 蛋白质组学与结构研究（核心应用Ⅱ）

DEPC是组氨酸和酪氨酸残基特异性化学修饰探针，用于研究蛋白质活性位点、功能域及构象变化。

应用场景：

• 酶活性中心研究：鉴定组氨酸在酶催化中的作用
  
• 蛋白质结构与功能关系：研究特定残基修饰对蛋白质活性的影响
  
• 蛋白质-配体相互作用：分析结合位点关键残基
  

4.3 核酸结构分析

DEPC可作为DNA结构探针，与双链DNA中完全或部分未堆叠的碱基反应。

应用场景：

• DNA二级结构研究：检测DNA单链区或变性区
  
• DNA损伤分析：研究DNA损伤导致的构象变化
  
• 蛋白质-DNA相互作用：分析结合位点的DNA构象
  

4.4 细胞生理学研究

DEPC在特定模型中用于研究兰尼碱受体/Ca²⁺通道功能及肌质网囊泡的Ca²⁺通透性。

研究价值：

• 以剂量和时间依赖性方式抑制兰尼碱与受体的结合
  
• 可作为Ca²⁺信号通路研究的工具试剂
  

五、实验方案

5.1 0.1% DEPC水溶液配制

配方（100 mL）：

配制步骤：

1. 在通风橱中量取DEPC液体（DEPC对呼吸道有刺激性）
   
2. 加入到去离子水中
   
3. 剧烈振荡使DEPC分散溶解
   
4. 37°C孵育过夜或室温放置2小时以上
   
5. 高压灭菌（121°C，15-20分钟）分解残留DEPC
   

⚠️ 重要提示：DEPC缓慢溶于水并水解，配制后需充分混合并放置足够时间以完成RNase灭活反应；灭菌步骤至关重要，残留DEPC会抑制后续酶促反应（如逆转录、PCR）。

5.2 DEPC处理水标准流程

用于配制RNA实验试剂的DEPC处理水，是分子生物学实验室的标准试剂。

操作流程：

1. 配制0.1% DEPC水溶液（方法同上）
   
2. 37°C孵育过夜（12-16小时）
   
3. 高压灭菌（121°C，20分钟）
   
4. 冷却后分装保存（-20°C或4°C短期）
   

质量验证：取处理后水样进行空白RT-PCR，确认无RNase残留和DEPC抑制效应。

5.3 离心管和枪头DEPC处理

适用于非一次性可高压耗材。

操作流程：

1. 配制0.1% DEPC水溶液
   
2. 将离心管、枪头等浸泡于DEPC水中
   
3. 室温放置过夜（12-16小时）
   
4. 倒出DEPC溶液（按有害废物处理）
   
5. 高压灭菌彻底去除残留DEPC
   
6. 烘干备用
   

5.4 DEPC与含胺缓冲液的处理限制

重要原则：Tris、HEPES、MOPS等含胺缓冲液不可用DEPC直接处理。DEPC会与胺基迅速反应，耗尽活性。

解决方案：

• 使用无RNase水配制含胺缓冲液（DEPC处理水，非DEPC直接处理）
  
• 或使用专门的无RNase商品化缓冲液
  

5.5 工作浓度参考

六、安全信息与注意事项

6.1 安全警告

6.2 安全操作规范

6.3 关键注意事项

⚠️ 避免接触氨
DEPC与氨反应生成致癌性氨基甲酸乙酯（urethane）。严禁将DEPC与含氨溶液混合。

⚠️ 含胺缓冲液不能DEPC处理
Tris、HEPES、MOPS等缓冲液中的胺基会与DEPC反应使其失活。需用DEPC处理水配制。

⚠️ 灭菌去除残留
DEPC会抑制逆转录酶和聚合酶活性，处理后的试剂和耗材必须高温灭菌彻底去除残留。

⚠️ 稳定性和储存
室温下缓慢分解，应2-8°C冷藏避光保存。开瓶后易吸潮降解，建议密封保存并尽快使用。

6.4 应急处理

七、DEPC vs. 其他RNase抑制剂：对比分析

选择建议：

• 构建无RNase环境（水、耗材） ：首选DEPC，唯一彻底灭活方法
  
• RT-PCR反应体系中保护RNA：选择重组RNase抑制剂
  
• 联合应用：DEPC预处理试剂+反应体系中加入RNase抑制剂
  

八、产品质量标准

湖南汇百益新材料有限公司提供的DEPC产品严格执行以下质量标准：

湖南汇百益通过严格的质量控制体系，确保产品纯度≥99%，水分和乙醇含量严格管控，批次稳定性好，符合分子生物学级应用要求。

包装规格：

• 实验室规格：5 mL、10 mL、25 mL、100 mL
  
• 工业规格：可按需定制
  

九、供应商介绍：湖南汇百益新材料有限公司

湖南汇百益新材料有限公司成立于2014年，位于湖南省怀化市洪江区工业园8号，拥有50,000平方米生产基地。公司是一家专注于生物基础试剂研发、生产与销售的“国家高新技术企业”、“湖南省专精特新企业”，拥有独立研发试验中心和生产基地，并已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证。

公司先后获得“怀化市工程技术研究中心”“湖南师范大学化学生物学功能材料产学研基地”“创新创业大赛湖南省优秀企业”“湖南新材料企业”等一系列荣誉称号。

依托强大的生产平台与技术实力，公司可灵活提供OEM代工服务与个性化定制方案，如提纯、精制加工等，以满足客户多元化需求。旗下品牌“汇百试剂”，通过提供性能稳定可靠、品质媲美进口、成本更具优势的国产试剂，为生物医药、体外诊断、生物工程及科研机构等领域的客户提供基础材料解决方案，以实现关键生物基础试剂国产化替代与关键试剂本土化供应，切实解决中国生物试剂的供应瓶颈问题，并持续助力科研突破与产业创新升级。

公司研发、生产、销售各种高纯生化试剂，包括：

• 糖苷系列：IPTG、ONPG、PNPG、DTT、x-gal、x-gluc等
  
• 生物缓冲剂：Tricine、HEPES、MOPS、CAPS、TAPS、MES、BES等
  
• 表面活性剂与去污剂：SDS、SURFACTIN、EMPIGEN BB、CHAPS、SB-8至SB-18系列等
  
• 检测试剂：泛影酸钠、PCA钙、G-418硫酸盐、DTE、TCEP-HCl、PMSF、PNPP、ABTS、TMB、TMB-PS、鲁米诺、异鲁米诺、ABEI、MU-Gal、D-荧光素钾盐等
  
• 高纯生化试剂：DEPC、异硫氰酸胍、盐酸胍、PMSF、MTT、BSA、WST-8等
  

湖南汇百益提供的DEPC产品具有以下突出优势：

• 高纯度：纯度≥99%，水分和杂质严格管控，RNase灭活效果可靠
  
• 分子生物学级品质：产品经RNase灭活验证，适合RNA研究等高灵敏度实验
  
• 现货供应：常备库存，支持快速发货，满足紧急实验需求
  
• 规格灵活：提供从5mL到100mL的实验室规格，可按需定制包装
  
• 专业包装：采用避光、密封、防潮包装，2-8°C冷链运输保存
  
• 技术支持：专业技术团队提供全程使用指导与问题解答
  
• 源头工厂：自产自销，具备价格优势和供应稳定性
  

十、采购与使用建议

在采购DEPC（CAS 1609-47-8）时，建议重点关注以下几点：

1. 纯度要求：对于RNA研究等敏感应用，建议选择纯度≥99%的产品，确保RNase灭活效果。
   
2. 水分指标：优质DEPC的水分含量应≤0.1%，水分过高表明产品已部分水解，影响性能。
   
3. 储存条件：2-8°C冷藏避光保存，室温下缓慢分解。开封后密封保存，避免吸潮。
   
4. 有效期：2-8°C避光保存条件下可稳定保存3年。
   
5. 配制要点：
   
6. 安全操作：DEPC为可疑致癌剂，必须在通风橱中操作，佩戴双层手套、护目镜和实验服。
   
7. 废弃物处理：含DEPC的废液应按有害化学废物处理，严禁与含氨物质混合。
   

十一、联系我们

如需获取DEPC（CAS 1609-47-8）的产品报价、样品或技术支持，请联系湖南汇百益新材料有限公司：

• 产品咨询：13319523173
  
• 订购邮箱：ivy@hnhbsj.com
  
• 官方网站：https://www.hbsjxcl.com/
  
• 公司地址：湖南省怀化市洪江区工业园8号
  

声明：本产品仅供科研使用，不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书，并遵守实验室安全操作规范。DEPC为可疑致癌剂，请务必在通风橱中操作并做好个人防护。