异硫氰酸胍 — 强效蛋白质变性剂，RNA/DNA提取核心试剂

一、产品基本信息

二、产品简介与核心优势

异硫氰酸胍（Guanidine Thiocyanate）是一种强效的蛋白质变性剂和离液剂（Chaotropic Agent），是分子生物学中RNA和DNA提取的核心试剂。它能够迅速溶解蛋白质，使蛋白质二级结构消失，细胞结构降解，核蛋白与核酸迅速分离，同时有效抑制和灭活内源性和外源性核酸酶（RNase和DNase），保护释放出的核酸不被降解。

异硫氰酸胍是经典RNA提取方法（Chomczynski-Sacchi法，即TRIzol法）的关键组分。在酸性条件下（pH 4.0），异硫氰酸胍与酚联合使用可实现RNA与DNA的有效分离——RNA保留在上清液中，DNA和蛋白质被萃取到有机相。这一方法自1987年发表以来，已成为全球分子生物学实验室RNA提取的“金标准”，被数十万篇SCI论文引用。

核心优势：

• 强效蛋白质变性：作为离液剂，能够迅速溶解蛋白质，破坏细胞结构，使核蛋白与核酸解离
  
• RNase灭活能力：有效抑制内源性和外源性RNase活性，保护RNA不被降解，是RNA提取的关键保障
  
• 双功能应用：既可提取RNA，也可提取DNA，适用范围广泛
  
• 灭活病毒特性：高浓度胍盐可快速灭活病毒（如新冠病毒），使样品失去感染性，是病毒保存液（灭活型）的核心成分
  
• 分子生物学级品质：湖南汇百益提供高纯度产品，无RNase/DNase污染，确保实验结果的可靠性
  
• 源头工厂直供：湖南汇百益自产自销，具备价格优势和供应稳定性
  

三、作用机制

3.1 蛋白质变性原理

异硫氰酸胍作为离液剂，通过以下机制使蛋白质变性：

Step 1：破坏水合层

• 胍离子和硫氰酸根离子干扰蛋白质分子的水合层
  
• 降低水分子与蛋白质之间的氢键相互作用
  

Step 2：去折叠

• 蛋白质的二级结构（α-螺旋、β-折叠）被破坏
  
• 蛋白质去折叠，三维构象崩塌
  

Step 3：细胞结构降解

• 细胞膜和细胞器膜结构被破坏
  
• 核蛋白与核酸解离
  

Step 4：核酸释放

• 细胞内容物释放，核酸被释放到溶液中
  
• RNase/DNase同时被变性失活
  

3.2 RNase抑制作用

异硫氰酸胍对RNase的抑制机制包括：

• 不可逆变性：使RNase蛋白质结构去折叠，丧失酶活性
  
• 金属离子螯合：硫氰酸根离子可螯合RNase活性位点所需的金属离子
  

这一双重作用确保了在RNA提取过程中RNA的完整性。

3.3 病毒灭活原理

在病毒保存液中，高浓度（4-6 M）异硫氰酸胍通过以下方式灭活病毒：

• 破坏病毒包膜结构（脂质双层溶解）
  
• 使病毒表面蛋白变性
  
• 使病毒基因组RNA释放并被降解/保护
  

应用价值：灭活型病毒保存液使样品失去感染性，可在常规实验室安全操作，无需高等级生物安全设施。

四、主要应用领域

4.1 RNA提取与纯化（核心应用Ⅰ）

异硫氰酸胍是RNA提取试剂盒和TRIzol试剂的必备核心组分，被公认为RNA提取的“金标准”。

经典单步法原理（Chomczynski-Sacchi法）：

常见配方（异硫氰酸胍消化液）：

适用样本类型：

• 动物组织（肝脏、脑、肌肉等）
  
• 培养细胞（贴壁细胞、悬浮细胞）
  
• 血液及血清样本
  
• 植物组织（需特殊处理去除多糖多酚）
  
• 细菌、酵母
  

4.2 DNA提取与纯化（核心应用Ⅱ）

异硫氰酸胍同样可用于基因组DNA的提取，其原理与RNA提取类似，但通常在裂解后采用不同的纯化策略。

应用场景：

• 血液白细胞DNA提取
  
• 组织样本DNA提取
  
• 粪便样本DNA提取（异硫氰酸胍可有效去除PCR抑制剂）
  
• 法医学微量DNA提取
  

4.3 病毒灭活保存液（核心应用Ⅲ）

异硫氰酸胍是灭活型病毒保存液的关键成分，在COVID-19疫情期间广泛应用于核酸检测样本的采集和运输。

灭活型病毒保存液典型配方：

优势：

• 快速灭活病毒，使样品失去感染性（室温5-10分钟）
  
• 保护病毒RNA不被降解，核酸检测稳定可靠
  
• 可在常规实验室安全操作
  

4.4 蛋白质变性研究

异硫氰酸胍可用于蛋白质去折叠研究：

• 研究蛋白质折叠/去折叠机制
  
• 溶解包涵体蛋白（在蛋白纯化中用于溶解不溶性蛋白聚集体）
  
• 蛋白质二级结构分析前的样品处理
  

4.5 PCR抑制剂

异硫氰酸胍是PCR反应的有效抑制剂。在某些样品制备方法中：

• 裂解后的样品中残余的异硫氰酸胍可抑制PCR反应
  
• 需要通过洗涤步骤（如离心柱法）去除异硫氰酸胍
  
• 这一特性也可用于研究PCR抑制机制
  

4.6 油脂工业与日用化工

异硫氰酸胍还应用于：

• 油脂工业脱脂
  
• 日用化工中的强脂降解剂
  
• 生物制药中的细胞膜破裂剂
  

五、实验方案

5.1 储存液配制

4 M异硫氰酸胍溶液（常用工作浓度）：

配制步骤：

1. 称取适量异硫氰酸胍粉末
   
2. 加入DEPC处理水（或无RNase水）至约80%终体积
   
3. 加热至60-65°C搅拌溶解（异硫氰酸胍溶解过程吸热）
   
4. 冷却后定容至终体积
   
5. 调节pH至所需范围（RNA提取通常pH 4.0-7.0）
   
6. 0.45 μm滤膜过滤除菌（如需）
   
7. 储存条件：2-8°C可短期保存，室温也可保存
   

注意事项：

• 配制RNA提取用溶液时，需使用DEPC处理水和无RNase容器
  
• 异硫氰酸胍溶液在4°C保存不宜超过1个月，长期保存可分装-20°C
  
• 避免使用金属工具接触溶液（异硫氰酸胍对金属有腐蚀性）
  

5.2 RNA提取经典流程（异硫氰酸胍-酚-氯仿法）

试剂准备：

• 裂解液：4 M异硫氰酸胍、25 mM柠檬酸钠、0.5% Sarkosyl、0.1 M β-巯基乙醇
  
• 2 M乙酸钠（pH 4.0）
  
• 水饱和酚（pH 4.0）
  
• 氯仿
  
• 异丙醇
  
• 75%乙醇（DEPC水配制）
  

操作流程：

5.3 离心柱法RNA提取（试剂盒法）

现代RNA提取试剂盒普遍采用异硫氰酸胍裂解结合离心柱技术：

1. 裂解：异硫氰酸胍裂解液裂解细胞/组织
   
2. 结合：加入乙醇后，RNA选择性结合到硅胶膜上
   
3. 洗涤：洗涤缓冲液去除杂质
   
4. 洗脱：无RNase水洗脱纯化RNA
   

优势：操作简便，无需酚-氯仿抽提，避免有机溶剂接触。

5.4 工作浓度参考

5.5 注意事项

pH控制（RNA提取关键）：

• RNA提取时需严格控制pH 4.0-5.0
  
• 酸性条件下，RNA带正电，保留在水相
  
• DNA和蛋白质被萃取到有机相
  

温度控制：

• 异硫氰酸胍溶解过程吸热，配制时需加热（60-65°C）助溶
  
• 裂解操作建议在冰上进行，保护RNA
  

RNase污染预防：

• 使用DEPC处理水和无RNase耗材
  
• 配制溶液的工具和容器需经去RNase处理
  
• 佩戴手套和口罩，避免RNase污染
  

溶液稳定性：

• 异硫氰酸胍溶液在4°C可保存约1个月
  
• 含β-巯基乙醇的裂解液稳定性降低，建议现配现用或分装-20°C保存
  

安全操作：

• 异硫氰酸胍具有一定刺激性，操作时佩戴手套
  
• 与酸接触会产生有毒气体（HSCN），避免与强酸混合
  

六、异硫氰酸胍 vs. 盐酸胍：对比分析

选择建议：

• RNA提取、病毒灭活保存液：首选异硫氰酸胍，RNase灭活能力更强
  
• DNA提取、蛋白质溶解：两者均可，盐酸胍更经济
  

七、产品质量标准

湖南汇百益新材料有限公司提供的异硫氰酸胍产品严格执行以下质量标准：

湖南汇百益通过优化合成工艺与精制技术，将产物纯度稳定控制在≥99%（高纯级≥99.5%），严格管控水分、重金属、铵盐等杂质指标。产品经分子生物学应用验证，确保无RNase/DNase污染，适合RNA/DNA提取等高灵敏度应用。

包装规格：

• 实验室规格：100g、250g、500g、1kg
  
• 工业规格：5kg、25kg
  
• 可按客户需求定制包装
  

八、供应商介绍：湖南汇百益新材料有限公司

湖南汇百益新材料有限公司成立于2014年，位于怀化市洪江区工业园8号，拥有50,000平方米生产基地。公司是一家专注于生物基础试剂研发、生产与销售的“国家高新技术企业”、“湖南省专精特新企业”，拥有独立研发试验中心和生产基地，并已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证。

公司先后获得“怀化市工程技术研究中心”“湖南师范大学化学生物学功能材料产学研基地”“创新创业大赛湖南省优秀企业”“湖南新材料企业”等一系列荣誉称号。核心产品DTT荣获“湖南省首批次重点新材料产品”认定。

依托强大的生产平台与技术实力，公司可灵活提供OEM代工服务与个性化定制方案，如提纯、精制加工等，以满足客户多元化需求。旗下品牌“汇百试剂”，通过提供性能稳定可靠、品质媲美进口、成本更具优势的国产试剂，为生物医药、体外诊断、生物工程及科研机构等领域的客户提供基础材料解决方案，以实现关键生物基础试剂国产化替代与关键试剂本土化供应，切实解决中国生物试剂的供应瓶颈问题，并持续助力科研突破与产业创新升级。

公司研发、生产、销售各种高纯生化试剂，包括：

• 糖苷系列：IPTG、ONPG、PNPG、DTT、x-gal、x-gluc等
  
• 生物缓冲剂：Tricine、HEPES、MOPS、CAPS、TAPS、MES、BES等
  
• 表面活性剂与去污剂：SDS、SURFACTIN、EMPIGEN BB、CHAPS、SB-8至SB-18系列等
  
• 检测试剂：泛影酸钠、PCA钙、G-418硫酸盐、DTE、TCEP-HCl、PMSF、PNPP、ABTS、TMB、TMB-PS、鲁米诺、异鲁米诺、ABEI、MU-Gal、D-荧光素钾盐等
  
• 高纯生化试剂：DEPC、异硫氰酸胍、PMSF、MTT、BSA、WST-8等
  

湖南汇百益提供的异硫氰酸胍产品具有以下突出优势：

• 高纯度：纯度≥99%（高纯级≥99.5%），批间稳定性好，无RNase/DNase污染
  
• 分子生物学级品质：产品经核酸提取应用验证，适合RNA/DNA提取等敏感实验
  
• 现货供应：常备库存，支持快速发货，满足紧急实验需求
  
• 规格灵活：提供从百克级到公斤级（100g、250g、500g、1kg、5kg、25kg）的产品
  
• 专业包装：采用避光、密封、防潮包装，常温运输保存
  
• 技术支持：专业技术团队提供全程使用指导与问题解答
  
• 源头工厂：自产自销，具备价格优势和供应稳定性
  

九、采购与使用建议

在采购异硫氰酸胍（CAS 593-84-0）时，建议重点关注以下几点：

1. 纯度要求：对于RNA提取等敏感应用，建议选择纯度≥99.5%的高纯级别产品，确保无RNase/DNase污染。
   
2. 吸光度指标：优质产品的35%溶液在280nm和300nm处吸光度应分别≤0.4和≤0.1，这是评价产品核酸纯度的关键指标。
   
3. 溶解性验证：产品应完全溶于水，35%溶液应无色澄清。
   
4. 储存条件：20-25°C常温密封保存，避光防潮。异硫氰酸胍对光敏感，不宜长期暴露于强光下。
   
5. 溶液稳定性：4 M溶液在4°C可保存约1个月，含β-巯基乙醇的溶液应现配现用或分装-20°C保存。
   
6. 安全操作：避免与强酸混合（会产生有毒气体），操作时佩戴手套和护目镜。
   
7. RNase预防：配制RNA提取用溶液时，必须使用DEPC处理水和无RNase容器。
   

十、联系我们

如需获取异硫氰酸胍（CAS 593-84-0）的产品报价、样品或技术支持，请联系湖南汇百益新材料有限公司：

• 产品咨询：13319523173
  
• 订购邮箱：ivy@hnhbsj.com
  
• 官方网站：https://www.hbsjxcl.com/
  
• 公司地址：湖南省怀化市洪江区工业园8号
  

声明：本产品仅供科研使用，不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书，并遵守实验室安全操作规范。