碘代乙酰胺 (Iodoacetamide) — 巯基烷基化试剂，蛋白质组学与酶抑制研究核心工具

一、产品基本信息

二、产品简介与核心优势

碘代乙酰胺（Iodoacetamide, IAM）是一种经典的巯基烷基化试剂，在蛋白质化学和蛋白质组学研究中应用极为广泛。该化合物能够与蛋白质中的半胱氨酸残基巯基（-SH）发生不可逆的烷基化反应，生成稳定的硫醚衍生物，从而有效防止二硫键的（重新）形成。

在蛋白质组学实验中，碘代乙酰胺是样品制备的关键试剂：在蛋白质酶解前加入IAM，可对还原后的半胱氨酸巯基进行烷基化封闭，防止其重新氧化形成二硫键，从而确保蛋白质能够被蛋白酶（如胰蛋白酶）充分酶解，获得高质量的质谱数据。

除了蛋白质组学应用，碘代乙酰胺还可作为以巯基为活性中心的酶的不可逆抑制剂，如甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）、琥珀酸脱氢酶等，用于糖酵解研究、细胞能量代谢分析和酶抑制机制研究。

核心优势：

• 巯基高特异性：在生理pH条件下对半胱氨酸巯基具有高度选择性烷基化能力
  
• 反应不可逆：形成的硫醚键稳定，不可逆，确保后续实验的一致性和可重复性
  
• 水溶性优异：易溶于水和常用缓冲液，实验操作简便
  
• 蛋白质组学标准试剂：在蛋白质组学样品制备中应用广泛，是肽段测序和质谱分析的必需试剂
  
• 实验验证充分：可用于2D电泳减少拖尾、提高分辨率，也是去泛素化酶（DUB）抑制剂
  

三、作用机制

3.1 巯基烷基化反应

碘代乙酰胺的作用机制基于其碘乙酰胺基团与蛋白质半胱氨酸残基巯基之间的亲核取代反应：

Step 1：亲核攻击

• 半胱氨酸的巯基（-SH）作为亲核基团
  
• 攻击碘代乙酰胺分子中的亚甲基碳
  

Step 2：碘离子离去

• 碘离子（I⁻）作为离去基团脱离
  
• 形成稳定的硫醚键（C-S）
  

Step 3：不可逆修饰

• 半胱氨酸残基被不可逆烷基化
  
• 生成稳定的S-羧酰胺甲基半胱氨酸衍生物
  
• 防止二硫键形成，确保蛋白质被充分酶解
  

反应式：
R-SH + ICH₂CONH₂ → R-S-CH₂CONH₂ + HI

3.2 与组氨酸的缓慢反应

碘代乙酰胺与组氨酸残基的反应速度较慢，但这种活性是核糖核酸酶（RNase）抑制的原因。这一特性使其在研究含组氨酸活性中心的蛋白酶（如半胱氨酸蛋白酶）时成为有用工具。

四、主要应用领域

4.1 蛋白质组学样品制备（核心应用Ⅰ）

碘代乙酰胺是蛋白质组学实验样品制备中不可或缺的关键试剂，在蛋白质被胰蛋白酶酶解前使用。

典型流程：

1. 蛋白质变性：使用尿素或SDS将蛋白质变性
   
2. 二硫键还原：使用DTT或TCEP将二硫键（-S-S-）还原为游离巯基（-SH）
   
3. 烷基化封闭：加入碘代乙酰胺（终浓度约10-50 mM），与还原后的巯基反应
   
4. 酶解：加入胰蛋白酶等蛋白酶进行消化
   

应用价值：

• 防止还原后的巯基重新氧化形成二硫键
  
• 确保蛋白质被胰蛋白酶充分酶解
  
• 提高质谱分析中肽段鉴定的覆盖率和准确性
  
• 用于肽质谱法从头测序中的样品制备
  

4.2 酶活性抑制研究（核心应用Ⅱ）

碘代乙酰胺通过不可逆地修饰酶活性中心的半胱氨酸巯基，可有效抑制多种以巯基为活性中心的酶类。

抑制谱：

研究应用：

• 在细胞生物学研究中，碘代乙酰胺通过不可逆抑制GAPDH，可有效阻断糖酵解过程中的ATP生产
  
• 可用于研究细胞能量代谢和糖酵解通路的调控机制
  

4.3 蛋白质2D电泳（2D-PAGE）中的应用

在双向电泳中，碘代乙酰胺可用于减少蛋白质拖尾并提高分辨率。

作用原理：

• 烷基化后防止二硫键形成
  
• 减少蛋白质在电泳过程中的非特异性聚集
  
• 提高等电聚焦和SDS-PAGE的分辨率
  

4.4 多肽测序与蛋白结构分析

碘代乙酰胺用于肽测序中半胱氨酸残基的烷基化，将半胱氨酸转化为稳定的衍生物。

应用场景：

• Edman降解测序前的样品处理
  
• 质谱法从头测序
  
• 蛋白二硫键定位分析
  
• 蛋白质高级结构研究
  

4.5 细胞生物学研究

在细胞水平，碘代乙酰胺可用于：

• 研究巯基依赖性酶在细胞功能中的作用
  
• 通过抑制GAPDH研究糖酵解与细胞代谢的关系
  
• 作为阳性对照用于酶抑制机制研究
  

4.6 有机合成中间体

碘代乙酰胺在有机合成中可用于引入酰胺甲基基团，作为多种有机化合物的合成中间体。

五、实验方案

5.1 储存液配制

1 M碘代乙酰胺储存液（推荐浓度）：

配制步骤：

1. 称取适量碘代乙酰胺粉末
   
2. 加入去离子水或50-100 mM Tris-HCl（pH 7.5-8.5）缓冲液
   
3. 轻轻涡旋或颠倒混匀至完全溶解
   
4. 分装后-20°C避光保存（避免反复冻融）
   

重要注意事项：

• 溶液应在使用前新鲜配制或分装冻存，避免反复冻融导致降解
  
• 碘代乙酰胺在溶液中随时间和温度升高会逐渐降解
  
• 避光保存是关键，光照会加速降解
  

5.2 蛋白质组学样品制备标准流程

试剂准备：

• 变性缓冲液：8 M尿素（或6 M盐酸胍），50 mM Tris-HCl，pH 8.0
  
• 还原剂：200 mM DTT（二硫苏糖醇）水溶液
  
• 烷基化试剂：1 M碘代乙酰胺水溶液（新鲜配制）
  

操作流程：

5.3 常用工作浓度

5.4 注意事项

避光操作：

• 碘代乙酰胺对光敏感，光照下易分解
  
• 实验操作应在弱光或避光条件下进行
  
• 使用棕色离心管或铝箔包裹容器避光
  

pH控制：

• 烷基化反应的最佳pH范围为pH 7.5-8.5
  
• 在碱性条件下（pH > 8.5）反应更快，但蛋白质稳定性可能受影响
  
• 酸性条件下反应速率显著降低
  

温度控制：

• 推荐在室温（20-25°C） 下进行烷基化反应
  
• 较高温度（>37°C）可能加速降解，较低温度（4°C）反应速率降低
  

淬灭与去除：

• 反应完成后，可通过加入过量DTT（2-5倍摩尔浓度）淬灭未反应的碘代乙酰胺
  
• 也可通过脱盐柱或透析去除
  

安全提示：

• 碘代乙酰胺具有毒性，操作时需佩戴手套和护目镜
  
• 避免吸入粉末，应在通风橱中称量
  

六、产品质量标准

湖南汇百益新材料有限公司提供的碘代乙酰胺产品严格执行以下质量标准：

湖南汇百益通过优化合成工艺与精制技术，将产物纯度稳定控制在≥99%，确保烷基化反应的高效性和实验可重复性。产品经严格的蛋白质组学应用验证，适合质谱分析等高灵敏度检测。

包装规格：

• 实验室规格：1g、5g、25g、100g
  
• 工业规格：可定制
  

七、供应商介绍：湖南汇百益新材料有限公司

湖南汇百益新材料有限公司成立于2014年，位于怀化市洪江工业园，拥有50,000平方米生产基地。公司是一家专注于生物基础试剂研发、生产与销售的“国家高新技术企业”、“湖南省专精特新企业”，拥有独立研发试验中心和生产基地，并已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证。

公司先后获得“怀化市工程技术研究中心”“湖南师范大学化学生物学功能材料产学研基地”“创新创业大赛湖南省优秀企业”“湖南新材料企业”等一系列荣誉称号。

依托强大的生产平台与技术实力，公司可灵活提供OEM代工服务与个性化定制方案，如提纯、精制加工等，以满足客户多元化需求。旗下品牌“汇百试剂”，通过提供性能稳定可靠、品质媲美进口、成本更具优势的国产试剂，为生物医药、体外诊断、生物工程及科研机构等领域的客户提供基础材料解决方案，以实现关键生物基础试剂国产化替代与关键试剂本土化供应，切实解决中国生物试剂的供应瓶颈问题，并持续助力科研突破与产业创新升级。

公司研发、生产、销售各种高纯生化试剂，包括：

• 糖苷系列：IPTG、ONPG、PNPG、DTT、x-gal、x-gluc等
  
• 生物缓冲剂：Tricine、HEPES、MOPS、CAPS、TAPS、MES、BES等
  
• 表面活性剂与去污剂：SDS、SURFACTIN、EMPIGEN BB、CHAPS、SB-8至SB-18系列等
  
• 检测试剂：泛影酸钠、PCA钙、G-418硫酸盐、DTE、TCEP-HCl、PMSF、PNPP、ABTS、TMB、TMB-PS、鲁米诺、异鲁米诺、ABEI、MU-Gal、D-荧光素钾盐等
  
• 高纯生化试剂：DEPC、异硫氰酸胍、PMSF、MTT、BSA、WST-8、碘代乙酰胺等
  

湖南汇百益提供的碘代乙酰胺产品具有以下突出优势：

• 高纯度：纯度≥99%，批次稳定性好，烷基化效率高
  
• 蛋白质组学级品质：产品经质谱应用验证，肽段鉴定覆盖率高
  
• 现货供应：常备库存，支持快速发货，满足紧急实验需求
  
• 规格灵活：提供从克级到百克级的产品，满足从科研到工业级生产的不同需求
  
• 专业包装：采用避光、密封、防潮包装，2-8°C冷藏运输保存
  
• 技术支持：专业技术团队提供全程使用指导与问题解答
  
• 源头工厂：自产自销，具备价格优势和供应稳定性
  

八、采购与使用建议

在采购碘代乙酰胺（CAS 144-48-9）时，建议重点关注以下几点：

1. 纯度要求：对于蛋白质组学和质谱分析，建议选择纯度≥99%的BioReagent级别产品，以确保烷基化反应完全。
   
2. 溶解性验证：产品应完全溶于水，100 mg/mL浓度下溶液应澄清透明。
   
3. 避光保存：碘代乙酰胺对光敏感，粉末和溶液均需避光保存。建议使用棕色瓶或铝箔包裹。
   
4. 分装保存：建议按单次用量分装，-20°C避光保存，避免反复冻融导致降解。
   
5. 溶液现配现用：溶液在室温下稳定性差，建议使用前新鲜配制，或分装后-20°C避光短期保存。
   
6. 工作浓度：
   
7. 储存条件：2-8°C冷藏保存，避光防潮。粉末在2-8°C、避光条件下可稳定保存2年。
   
8. 安全操作：碘代乙酰胺具有毒性（危险代码T），操作时需佩戴手套、护目镜和实验服。应在通风橱中称量粉末，避免吸入。
   

九、联系我们

如需获取碘代乙酰胺（CAS 144-48-9）的产品报价、样品或技术支持，请联系湖南汇百益新材料有限公司：

• 产品咨询：13319523173
  
• 订购邮箱：ivy@hnhbsj.com
  
• 官方网站：https://www.hbsjxcl.com/
  
• 公司地址：湖南省怀化市洪江区工业园8号
  

声明：本产品仅供科研使用，不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书，并遵守实验室安全操作规范。