抑肽酶 (Aprotinin) — 广谱丝氨酸蛋白酶抑制剂，蛋白纯化与细胞保护核心工具

一、产品基本信息

二、产品简介与核心优势

抑肽酶（Aprotinin）是一种广谱丝氨酸蛋白酶抑制剂，属于Kunitz型蛋白酶抑制剂家族。该多肽由58个氨基酸残基组成，通过三对二硫键形成紧密的三级结构，这种紧凑构象赋予其极高的热稳定性和酸碱稳定性。

抑肽酶通过抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、纤溶酶、激肽释放酶等多种丝氨酸蛋白酶，在蛋白提取、细胞裂解、组织匀浆等实验中保护目标蛋白不被降解。其与胰蛋白酶的平衡解离常数（Kd）低至0.06 pM，是目前已知最强的蛋白酶抑制剂之一。

在分子生物学和生物化学研究中，抑肽酶常与PMSF、EDTA等联合使用，构成全面蛋白酶抑制剂鸡尾酒，是蛋白纯化和样品制备的核心工具。

核心优势：

• 超高亲和力：对胰蛋白酶的Kd值仅0.06 pM，抑制作用极强
  
• 广谱抑制活性：有效抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、纤溶酶、激肽释放酶等
  
• 极端稳定性：耐高温、耐酸碱、耐有机溶剂，仅嗜热菌蛋白酶在加热条件下可降解
  
• 可逆结合：在pH >10或<3条件下可解离，便于后续去除
  
• 细胞水平应用安全：可加入细胞培养基保护分泌蛋白，不损伤细胞
  
• 经济高效：工作浓度低（0.1-2 μg/mL），性价比高
  

三、作用机制与酶学特性

3.1 抑制原理

抑肽酶属于Kunitz型蛋白酶抑制剂，通过经典的“锁钥”机制与蛋白酶活性中心结合：

Step 1：识别与结合

• 抑肽酶的Lys15或Arg15残基插入蛋白酶活性中心
  
• 与丝氨酸残基形成稳定的非共价复合物
  

Step 2：活性阻断

• 结合后阻断蛋白酶与底物的相互作用
  
• 酶活性被有效抑制
  

Step 3：可逆解离

• 在极端pH条件（pH >10或<3）下
  
• 抑制剂-蛋白酶复合物可解离，酶活性恢复
  

3.2 抑制谱与亲和常数

3.3 理化特性

KIU单位定义：1 KIU（激肽释放酶灭活单位）指在最佳条件下，能抑制2个激肽释放酶单位50%活性所需的抑制剂数量。

四、主要应用领域

4.1 蛋白提取与纯化（核心应用Ⅰ）

抑肽酶是蛋白提取实验中保护目标蛋白不被降解的核心试剂，尤其适合从富含蛋白酶的样品（如胰腺、脾脏、肿瘤组织）中提取蛋白。

应用场景：

• 组织匀浆：动物组织、植物组织的蛋白提取
  
• 细胞裂解：贴壁细胞、悬浮细胞的蛋白提取
  
• 细胞器分离：核蛋白、线粒体蛋白提取
  
• 长时间纯化：亲和层析、离子交换层析
  

推荐浓度：0.1-2 μg/mL（equimolar with protease）

操作流程：

1. 配制裂解缓冲液（如RIPA、NP-40裂解液）
   
2. 加入抑肽酶至终浓度0.1-2 μg/mL（常用1 μg/mL）
   
3. 冰上操作，裂解细胞或组织
   
4. 离心收集蛋白上清
   

4.2 细胞培养与分泌蛋白保护（核心应用Ⅱ）

在细胞培养体系中，抑肽酶可保护分泌蛋白不被胞外蛋白酶降解，尤其适合研究分泌型蛋白或细胞上清中的生物标志物。

应用场景：

• 分泌蛋白收集：保护细胞上清中的目标蛋白
  
• 原代细胞培养：抑制组织解离时释放的蛋白酶
  
• 血清样本保存：抑制胰蛋白酶样活性
  

应用案例：

• 在抽血试管中加入少量抑肽酶，可保护胰高血糖素等快速降解的蛋白，便于实验室准确测量
  

4.3 蛋白酶抑制剂鸡尾酒配方

为获得全面蛋白酶抑制效果，建议将抑肽酶与其他抑制剂联合使用：

4.4 体外诊断与临床研究

抑肽酶在临床研究中具有重要价值，尤其在心肺转流手术中用于减少术后出血。

作用机制：

• 抑制纤溶酶（fibrinolytic plasmin），减少纤维蛋白溶解
  
• 抑制激肽释放酶（kallikrein），减轻炎症反应
  
• 保护血小板糖蛋白受体（GpIb和GpIIb/IIIa）
  

4.5 肌肉分化研究

研究表明，抑肽酶可刺激骨骼肌成肌细胞分化，促进肌管形成和肌生成素（myogenin）表达积累。

作用机制：通过抑制TGF-β潜伏形式的蛋白水解激活，减少活性TGF-β水平。

4.6 荧光组织化学

抑肽酶可用FITC标记，其偶联物保留抗蛋白水解和碳水化合物结合特性，可作为荧光组织化学试剂，用于染色富含糖醛酸或唾液酸的糖缀合物。

五、实验方案

5.1 储存液配制

10 mg/mL抑肽酶储存液（水溶液）：

配制步骤：

1. 称取适量抑肽酶粉末
   
2. 加入去离子水或缓冲液
   
3. 轻轻涡旋溶解（避免剧烈震荡）
   
4. 分装至无菌EP管（50-100 μL/管）
   
5. 储存条件：-20°C冷冻，分装保存，有效期1年
   

稳定特性：

• 溶液在2-8°C可稳定保存7天
  
• 冷冻保存（-20°C）可保持活性1年以上，避免反复冻融
  
• 对高温、酸、碱和有机溶剂相对稳定
  

5.2 工作浓度参考

5.3 常用裂解缓冲液配方

RIPA裂解液（50 mL，含抑肽酶）：

5.4 使用注意事项

温度稳定性：

• 抑肽酶对热相对稳定，但高温长时间处理可能导致活性下降
  
• 一般实验操作在冰上或4°C即可
  

pH范围：

• 稳定pH范围：5.0-9.0
  
• pH >10或<3时，抑制剂-蛋白酶复合物解离
  

还原剂敏感性：

• 三对二硫键（Cyc-Cys）易被β-巯基乙醇等还原剂破坏
  
• 避免与还原剂长时间共孵育
  

与PMSF的协同：

• 抑肽酶与PMSF作用机制不同，可联合使用获得更全面抑制
  

5.5 抑制活性验证

可通过以下方法验证抑肽酶活性：

• 胰蛋白酶抑制试验：检测残留胰蛋白酶活性
  
• 比色法：使用BAPNA等显色底物测定抑制率
  
• 每毫克抑肽酶可抑制约16000单位胰蛋白酶活性
  

六、产品质量标准

湖南汇百益新材料有限公司提供的抑肽酶产品严格执行以下质量标准：

湖南汇百益通过优化纯化工艺，提供高纯度、高比活性的抑肽酶产品，批次稳定性好，适合科研及生物制药应用。

七、供应商介绍：湖南汇百益新材料有限公司

湖南汇百益新材料有限公司成立于2014年，位于怀化市洪江工业园，拥有50,000平方米生产基地。公司是一家专注于生物基础试剂研发、生产与销售的“国家高新技术企业”、“湖南省专精特新企业”，拥有独立研发试验中心和生产基地，并已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证。

公司先后获得“怀化市工程技术研究中心”“湖南师范大学化学生物学功能材料产学研基地”“创新创业大赛湖南省优秀企业”“湖南新材料企业”等一系列荣誉称号。

依托强大的生产平台与技术实力，公司可灵活提供OEM代工服务与个性化定制方案，如提纯、精制加工等，以满足客户多元化需求。旗下品牌“汇百试剂”，通过提供性能稳定可靠、品质媲美进口、成本更具优势的国产试剂，为生物医药、体外诊断、生物工程及科研机构等领域的客户提供基础材料解决方案，以实现关键生物基础试剂国产化替代与关键试剂本土化供应，切实解决中国生物试剂的供应瓶颈问题，并持续助力科研突破与产业创新升级。

公司研发、生产、销售各种高纯生化试剂，包括：

• 糖苷系列：IPTG、ONPG、PNPG、DTT、x-gal、x-gluc等
  
• 生物缓冲剂：Tricine、HEPES、MOPS、CAPS、TAPS、MES、BES等
  
• 表面活性剂与去污剂：SDS、SURFACTIN、EMPIGEN BB、CHAPS、SB-8至SB-18系列等
  
• 检测试剂：泛影酸钠、PCA钙、G-418硫酸盐、DTE、TCEP-HCl、PMSF、PNPP、ABTS、TMB、TMB-PS、鲁米诺、异鲁米诺、ABEI、MU-Gal、D-荧光素钾盐等
  
• 高纯生化试剂：DEPC、异硫氰酸胍、PMSF、MTT、BSA、WST-8、抑肽酶等
  

湖南汇百益提供的抑肽酶产品具有以下突出优势：

• 高纯度：纯度≥98%，批次稳定性好，蛋白酶抑制活性可靠
  
• 高比活性：比活性≥4500 KIU/mg，抑制效率高
  
• 现货供应：常备库存，支持快速发货，满足紧急实验需求
  
• 规格灵活：提供多种规格（1mg、5mg、10mg、25mg、50mg、100mg、500mg、1g等）
  
• 专业包装：采用密封、防潮包装，2-8°C冷藏运输保存
  
• 技术支持：专业技术团队提供全程使用指导与问题解答
  
• 源头工厂：自产自销，具备价格优势和供应稳定性
  

八、采购与使用建议

在采购抑肽酶（CAS 9087-70-1）时，建议重点关注以下几点：

1. 纯度要求：对于蛋白纯化和细胞培养等敏感应用，建议选择纯度≥98%的产品，以确保抑制效果和实验可重复性。
   
2. 比活性验证：优质抑肽酶的比活性应在4500-6000 KIU/mg范围内。
   
3. 溶解方法：
   
4. 分装与储存：
   
5. 工作浓度：
   
6. 与其他抑制剂联用：为获得全面蛋白酶抑制效果，建议与PMSF/AEBSF、EDTA、胃蛋白酶抑制剂等联合使用。
   
7. 安全操作：抑肽酶为生物来源产品，操作时建议佩戴手套，避免吸入粉末。
   

九、联系我们

如需获取抑肽酶（CAS 9087-70-1）的产品报价、样品或技术支持，请联系湖南汇百益新材料有限公司：

• 产品咨询：13319523173
  
• 订购邮箱：ivy@hnhbsj.com
  
• 官方网站：https://www.hbsjxcl.com/
  

声明：本产品仅供科研使用，不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书，并遵守实验室安全操作规范。