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4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐 (AEBSF) — 高效低毒丝氨酸蛋白酶抑制剂,PMSF安全替代品

2026-05-22 14:40:37

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一、产品基本信息项目内容产品名称4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐英文名称4-(2-Aminoethyl)benzenesulfonyl fluoride hyd

一、产品基本信息

项目内容
产品名称4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐
英文名称4-(2-Aminoethyl)benzenesulfonyl fluoride hydrochloride
中文别名AEBSF、AEBSF盐酸盐、4-(2-氨基乙基)苯磺酰氟盐酸盐
CAS号30827-99-7
分子式C₈H₁₁ClFNO₂S
分子量239.69 g/mol
外观白色结晶粉末
纯度≥98%(HPLC)
熔点175-177°C
溶解性溶于水(50 mg/mL),溶于DMSO
储存条件2-8°C冷藏保存,避光防潮
用途丝氨酸蛋白酶抑制剂,用于蛋白提取、细胞培养、蛋白纯化

二、产品简介与核心优势

AEBSF(4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐)是一种高效、不可逆的广谱丝氨酸蛋白酶抑制剂,其抑制常数与经典的PMSF(苯甲基磺酰氟)和DFP(二异丙基氟磷酸酯)相当,但安全性和水溶性显著优于传统抑制剂

AEBSF能够有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、纤溶酶、激肽释放酶、凝血酶等多种丝氨酸蛋白酶。其分子结构中引入的氨乙基磺酰氟基团不仅增强了水溶性,还显著提高了在水相环境中的稳定性,使其更适用于生理缓冲体系中的细胞实验和蛋白纯化过程。

与PMSF相比,AEBSF的主要优势在于:

  • 毒性更低:对实验人员和细胞样本的影响更小
  • 水溶性更好:可直接用水配制,无需有机溶剂
  • 稳定性更优:水溶液中半衰期更长,适合长时间实验
  • 细胞水平适用:推荐使用浓度0.25 mM,无明显细胞毒性

AEBSF已被公认为PMSF和DFP的理想替代品,在生物化学、细胞生物学及药物研发等领域具有广泛的应用前景。

三、作用机制与酶学特性

3.1 抑制原理

AEBSF的抑制作用基于其分子结构中的磺酰氟基团(-SO₂F):

Step 1:识别与结合

  • AEBSF的磺酰氟基团识别丝氨酸蛋白酶活性中心的丝氨酸残基
  • 该丝氨酸残基在催化过程中起亲核攻击作用

Step 2:共价修饰

  • AEBSF与丝氨酸残基的羟基发生亲核取代反应
  • 形成共价键,丝氨酸残基被磺酰化修饰

Step 3:不可逆失活

  • 被修饰的丝氨酸残基失去催化活性
  • 蛋白酶被不可逆地抑制,无法恢复活性

3.2 抑制谱

蛋白酶类型抑制效果说明
丝氨酸蛋白酶强抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、纤溶酶、激肽释放酶、凝血酶
金属蛋白酶不抑制需配合EDTA使用
天冬氨酸蛋白酶不抑制需使用胃蛋白酶抑制剂
半胱氨酸蛋白酶不抑制需使用E-64等

3.3 理化特性

参数数值
分子量239.69 g/mol
熔点175-177°C
水溶性50 mg/mL
pH稳定性酸性条件下稳定,pH>7时稳定性降低
溶液储存pH<7,2-8°C可稳定6个月

3.4 AEBSF vs. PMSF:对比分析

对比项AEBSF(本品)PMSF
水溶性(50 mg/mL)差(需有机溶剂)
水溶液稳定性稳定(pH<7,6个月)不稳定(半衰期~1小时)
毒性较低剧毒
细胞水平应用适合(0.25 mM无毒)不适合
工作浓度0.1-1.0 mM0.1-1.0 mM
安全性推荐替代品需严格防护

四、主要应用领域

4.1 蛋白提取与纯化(核心应用Ⅰ)

AEBSF是蛋白提取实验中PMSF的理想替代品,尤其适合对毒性敏感或需长时间处理的样品。

应用场景

  • 组织匀浆:动物组织、植物组织的蛋白提取
  • 细胞裂解:贴壁细胞、悬浮细胞的蛋白提取
  • 细胞器分离:核蛋白提取、线粒体蛋白提取
  • 长时间纯化:亲和层析、离子交换层析

操作流程

  1. 配制裂解缓冲液(如RIPA、NP-40裂解液)
  2. 加入AEBSF至终浓度0.1-1.0 mM(推荐0.25-0.5 mM)
  3. 冰上操作,裂解细胞或组织
  4. 离心收集蛋白上清

关键优势:AEBSF在水溶液中稳定性好,长时间处理(数小时至数天)仍保持抑制活性,无需中途补加。

4.2 细胞培养中的应用(核心应用Ⅱ)

AEBSF因其低毒性水溶性,被广泛应用于细胞培养系统。

研究案例

  • 在过敏性鼻炎小鼠模型中,鼻内给予AEBSF(10 μg)可显著减少过敏症状、降低血清特异性IgE水平和鼻黏膜嗜酸性粒细胞浸润
  • 预防性(致敏前)和治疗性(激发后)给药均显示效果,并可诱导调节性T细胞(Treg)

细胞培养应用

  • 抑制细胞培养上清中的蛋白酶活性
  • 保护分泌蛋白不被降解
  • 研究蛋白酶在细胞信号转导中的作用

推荐浓度:细胞培养中可达0.25 mM,无明显细胞毒性

4.3 蛋白酶活性抑制研究

AEBSF可用于研究特定丝氨酸蛋白酶在生物过程中的作用。

研究案例

  • 弓形虫感染:AEBSF(76.8 mg/kg,每日腹腔注射)可延长致命性弓形虫感染小鼠的存活时间
  • 胃腺癌细胞:AEBSF可抑制TNF-α诱导的SNU-16人胃腺癌细胞凋亡特征
  • β-分泌酶抑制:AEBSF通过直接抑制β-分泌酶,抑制神经和非神经细胞系中Aβ的组成型产生

4.4 蛋白质组学研究

AEBSF常用于蛋白质样品制备中防止蛋白降解:

  • 质谱分析样品制备:在蛋白裂解液中加入AEBSF,防止内源蛋白酶降解目标蛋白
  • 核糖核蛋白复合物分析:抑制RNA相关蛋白的降解

4.5 Western Blotting样品制备

在进行Western Blotting实验时,AEBSF可加入蛋白样品制备缓冲液中:

  • 在RIPA裂解液中加入AEBSF(0.1-1.0 mM)
  • 与其它蛋白酶抑制剂(如亮抑酶肽、抑肽酶)联合使用效果更佳

4.6 炎症与免疫研究

研究表明,AEBSF具有抗炎作用

  • 在哮喘动物模型中减少气道炎症反应和气道高反应性
  • 通过诱导调节性T细胞发挥抗过敏作用

五、实验方案

5.1 储存液配制

100 mM AEBSF水溶液储存液(推荐浓度):

储存液体积AEBSF称取量溶剂
1 mL23.97 mg去离子水
5 mL119.85 mg去离子水
10 mL239.7 mg去离子水

配制步骤

  1. 称取适量AEBSF粉末
  2. 加入去离子水(或相应缓冲液)
  3. 轻轻涡旋溶解
  4. 分装至无菌EP管(避免反复冻融)
  5. 储存条件:2-8°C冷藏,可稳定保存6个月

配制要点

  • 使用去离子水低pH缓冲液(pH<7)配制
  • 如需pH>7的工作液,应在使用前进行pH调节
  • AEBSF易吸潮,配制后尽快分装

5.2 工作浓度参考

应用场景推荐浓度对应质量浓度
常规蛋白提取0.5-1.0 mM120-240 μg/mL
细胞培养0.25 mM60 μg/mL
蛋白纯化0.1-0.5 mM24-120 μg/mL
酶活性抑制研究0.1-1.0 mM24-240 μg/mL
文献常见范围0.1-1.0 mM24-240 μg/mL

5.3 常用裂解缓冲液配方

RIPA裂解液(50 mL,含AEBSF)

组分终浓度用量
Tris-HCl(pH 7.4)50 mM2.5 mL(1 M)
NaCl150 mM1.5 mL(5 M)
NP-401%0.5 mL
脱氧胆酸钠0.5%0.25 g
SDS0.1%0.05 g
AEBSF(临用前加)0.5-1.0 mM0.25-0.5 mL(100 mM)

5.4 抑制剂组合建议

对于全面蛋白酶抑制,建议将AEBSF与其他抑制剂联合使用:

目标蛋白酶推荐抑制剂工作浓度
丝氨酸蛋白酶AEBSF0.1-1.0 mM
半胱氨酸蛋白酶E-641-10 μM
天冬氨酸蛋白酶胃蛋白酶抑制剂1 μM
金属蛋白酶EDTA0.5-1 mM

5.5 使用注意事项

pH敏感性

  • AEBSF在pH>7时稳定性降低,半衰期显著缩短
  • 使用前应根据实验条件评估稳定性

温度敏感性

  • AEBSF在较高温度下稳定性下降
  • 建议在冰上或4°C条件下操作和储存

避光保存

  • AEBSF对光敏感,储存和工作液均应避光

六、安全信息与防护

6.1 危险分类

项目分类
GHS分类GHS05(氧化性固体)
信号词危险(Danger)
危险术语R22(有害)、R36/38(刺激眼睛和皮肤)、R43(可能过敏)、R51/53(对水生生物有毒)

6.2 安全操作规范

操作环节防护要求
个人防护实验服、护目镜、手套、口罩
称量操作在通风橱中进行,避免粉末飘散
溶液配制在通风橱中操作
废弃物处理按危险化学品规定处置

6.3 应急处理

暴露途径应急措施
眼睛接触立即用大量清水冲洗15分钟,就医
皮肤接触脱去污染衣物,用大量流动清水彻底冲洗
吸入迅速脱离现场至新鲜空气处,必要时就医
食入禁止催吐,漱口并立即就医

6.4 储存要求

  • 2-8°C冷藏保存
  • 避光、防潮、密封保存
  • 易吸潮,开封后尽快使用
  • 水溶液在pH<7、2-8°C可稳定保存6个月

七、产品质量标准

湖南汇百益新材料有限公司提供的AEBSF产品严格执行以下质量标准:

检测项目质量指标
外观白色结晶粉末
纯度(HPLC)≥98%
分子式C₈H₁₁ClFNO₂S
分子量239.69
熔点175-177°C
溶解性50 mg/mL溶于水,溶液澄清
干燥失重≤1.0%
蛋白酶抑制活性符合检测标准

湖南汇百益通过优化合成工艺与精制技术,将产物纯度稳定控制在≥98%,确保蛋白酶抑制活性的可靠性和批次稳定性。

八、供应商介绍:湖南汇百益新材料有限公司

湖南汇百益新材料有限公司成立于2014年,位于怀化市洪江循环高新产业园区,拥有50,000平方米生产基地。公司是一家专注于生物基础试剂研发、生产与销售的“国家高新技术企业”“湖南省专精特新企业”,拥有独立研发试验中心和生产基地,并已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证。

公司先后获得“怀化市工程技术研究中心”“湖南师范大学化学生物学功能材料产学研基地”“创新创业大赛湖南省优秀企业”“湖南新材料企业”等一系列荣誉称号。核心产品DTT荣获“湖南省首批次重点新材料产品”认定。产品远销东南亚、欧美等多个国家和地区,得到全球客户认可和信赖。

依托强大的生产平台与技术实力,公司可灵活提供OEM代工服务个性化定制方案,如提纯、精制加工等,以满足客户多元化需求。旗下品牌“汇百试剂”,通过提供性能稳定可靠、品质媲美进口、成本更具优势的国产试剂,为生物医药、体外诊断、生物工程及科研机构等领域的客户提供基础材料解决方案,以实现关键生物基础试剂国产化替代与关键试剂本土化供应,切实解决中国生物试剂的供应瓶颈问题,并持续助力科研突破与产业创新升级。

公司研发、生产、销售各种高纯生化试剂,包括:

  • 糖苷系列:IPTG、ONPG、PNPG、DTT、x-gal、x-gluc等
  • 生物缓冲剂:Tricine、HEPES、MOPS、CAPS、TAPS、MES、BES等
  • 表面活性剂与去污剂:SDS、SURFACTIN、EMPIGEN BB、CHAPS、SB-8至SB-18系列等
  • 检测试剂:泛影酸钠、PCA钙、G-418硫酸盐、DTE、TCEP-HCl、PMSF、PNPP、ABTS、TMB、TMB-PS、鲁米诺、异鲁米诺、ABEI、MU-Gal、D-荧光素钾盐等
  • 高纯生化试剂:DEPC、异硫氰酸胍、PMSF、MTT、BSA、WST-8等

湖南汇百益提供的AEBSF产品具有以下突出优势:

  • 高纯度:纯度≥98%,批次稳定性好,蛋白酶抑制活性可靠
  • 低毒性:PMSF的理想替代品,细胞水平应用安全
  • 高水溶性:溶解度达50 mg/mL,配制方便
  • 现货供应:常备库存,支持快速发货,满足紧急实验需求
  • 规格灵活:提供从毫克级到公斤级的产品
  • 专业包装:采用密封、防潮包装,2-8°C冷藏运输保存
  • 技术支持:专业技术团队提供全程使用指导与问题解答
  • 源头工厂:自产自销,具备价格优势和供应稳定性

九、采购与使用建议

在采购AEBSF(CAS 30827-99-7)时,建议重点关注以下几点:

  1. 纯度要求:对于蛋白提取和细胞培养等敏感应用,建议选择纯度≥98%的产品,以确保抑制效果和实验可重复性。
  2. 水溶性验证:AEBSF应完全溶于水,50 mg/mL浓度下溶液应澄清透明。
  3. pH控制:储存液应在pH<7条件下配制和保存,稳定性最佳。如需pH>7的工作液,使用前进行pH调节。
  4. 储存条件2-8°C冷藏保存,避光防潮。水溶液在2-8°C、pH<7条件下可稳定保存6个月
  5. 与PMSF的替代关系:AEBSF可在等摩尔浓度下替代PMSF,通常不需要额外优化浓度。
  6. 工作浓度:常规使用0.1-1.0 mM(24-240 μg/mL)。细胞培养推荐0.25 mM
  7. 安全操作:虽然毒性低于PMSF,但仍需在通风橱中操作,佩戴适当防护装备。
  8. 分装建议:粉末易吸潮,建议开封后尽快使用;水溶液建议分装保存,避免反复冻融。

十、联系我们

如需获取AEBSF(CAS 30827-99-7)的产品报价、样品或技术支持,请联系湖南汇百益新材料有限公司:


声明:本产品仅供科研使用,不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书,并遵守实验室安全操作规范。


作者: 汇百益-百博士
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4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐 (AEBSF) — 高效低毒丝氨酸蛋白酶抑制剂,PMSF安全替代品
一、产品基本信息项目内容产品名称4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐英文名称4-(2-Aminoethyl)benzenesulfonyl fluoride hyd
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