IPTG活性诱导剂溶液配制,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷知识分享

IPTG（也称为异丙基-β-D-硫代半乳糖苷）是一种用于克隆实验的分子生物学试剂。它常与X-Gal或Bluo-Gal结合使用，用于重组细菌菌落的蓝白筛选，与异乳糖不同，IPTG 硫 (S) 原子会形成细胞不可水解的化学键，从而防止细胞“吃掉”或降解电感物，因此IPTG浓度保持恒定。

IPTG库存溶液有什么要求？

我们推荐 0.1 M 溶液，分子式重量为 238.3 g/mol，因此在 10 ml 水中为 0.238 g，通过过滤灭菌，然后存放在冰箱中。

IPTG 诱导通常在什么浓度下进行？

用于诱导的 IPTG 浓度约为 0.5-1 mM。

如何在 50 mL 中配制 IPTG 0.1 M 浓度溶液？

将 0.595 g IPTG (MW = 238.3 g/mol) 溶解在水中，用无菌水将最终体积调整至 25 mL，制成 1 mL 或 5 mL 等分试样并通过 0.22 µm 过滤灭菌并储存在 20°C 下。

如何制备IPTG/X-gal 平板？

首先准备一个 Luria 肉汤-氨苄青霉素板，并将板在 4°C 冰箱中保存三天。

将 Luria 肉汤-氨苄青霉素平板置于层流中，将 100 µL IPTG 铺在平板上，并倒置于 37°C 培养箱中 30 分钟使其吸附。

将 20 µL X-Gal 涂在板上，然后在 37°C 下再次吸附。

湖南汇百益帮您解答：如果忘记将 X-Gal/IPTG 添加到介质中，该怎么办？

如果转化体已经在平板上并且已长出可见的菌落，请勿在 X-gal/IPTG 溶液周围旋转，因为它会弄脏您的菌落。

建议的解决方案是复制您的菌落：您可以挑选您的菌落并将它们划线到含有所需 X-gal/IPTG/抗生素的平板上。或者，您可以通过平板复制您的菌落（前提是菌落密度较低且各个菌落间隔良好）。您可以通过将板压在 3M Whatman 纸上来复制菌落，取下旧板，然后压到新的 X-GAL/IPTG/抗生素板上。

湖南汇百益专注异丙基-β-D-硫代半乳糖苷IPTG研发生产十余年，获多项发明专利，产品远销海内外，纯度高、质量好，深受广大用户好评，如有相关需求，欢迎点击网站上电话垂询！