如何在电镀介质上传播IPTG？异丙基-β-D-硫代半乳糖苷知识分享

如何在电镀介质上传播IPTG？这是很多生物化工从业人员想要学习并了解的一项专业知识，湖南汇百益技术部最近也收到了很多关于IPTG此类问题的咨询，我们结合工厂研发经验及技术员的建议，给大家做了整理，以供参考！

IPTG又称异丙基-β-D-硫代半乳糖苷，CAS号 367-93-1，它通过与阻遏蛋白结合并抑制阻遏蛋白，充当半乳糖苷酶活性的诱导剂。

那么，如何在电镀介质上传播IPTG呢？具体可以分为三步：

1、使用前将化学品涂在盘子顶部。将 IPTG 和X-GAL放在预制琼脂平板上，使用曲棍球棒撒布器将 40 μL 的 IPTG 和 40 μL 的 X-GAL 铺在板的顶部。然后，在使用前让盘子干燥。如果盘子是干燥的（例如，一两天前），这应该需要 30 分钟左右，但对于新制作的盘子则需要长达几个小时。

2、将含有 IPTG 和 X-GAL 的板倒入其中。在倒入之前将 IPTG 和 X-GAL 合并到板中，对培养基进行高压灭菌并冷却至 65 o C 或更低后，添加 IPTG 至最终浓度为 0.1 mM IPTG（每毫升培养基 1 µL IPTG 库存溶液）和 X-GAL 至最终浓度为 40 µg/mL（2每毫升培养基的 X-GAL 库存溶液 µL）。还要确保此时添加选择药物：通常是氨苄青霉素，终浓度为 100 µg/mL。

3、将化学物质掺入顶层琼脂中。该方法通常用于噬菌体，但也适用于细菌菌落。使用 3 mL 0.7% 琼脂（如果您想要可以用限制性酶切割的 DNA，则使用琼脂糖），保存在 50°C，添加 10 µL IPTG 库存和 40 µl X-GAL 库存，然后添加细菌和噬菌体混合物，通过在手掌之间滚动管子来快速混合，并将其倒在板上。

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