核糖核酸酶A — RNA去除与核酸纯化核心工具酶，分子生物学实验室必备

一、产品基本信息

二、产品简介与核心优势

核糖核酸酶A（RNase A）是一种内切核糖核酸酶，特异性切割单链RNA上嘧啶核苷酸（胞嘧啶C和尿嘧啶U）的3‘端磷酸二酯键。该酶来源于牛胰腺，是分子生物学实验室中最常用的RNA去除工具酶，已有数十年应用历史。

RNase A的核心价值在于其独特的底物特异性：它在嘧啶核苷酸（C和U）后切割RNA，生成3′-磷酸末端的产物。由于DNA不含2‘-羟基，RNase A不能切割DNA，这一特性使其成为从DNA样本中选择性去除RNA的理想工具。

RNase A是一种稳定的酶，含有4个二硫键，即使在高浓度尿素中也保持活性。作为分子生物学实验室的基础工具酶，RNase A在质粒纯化、蛋白纯化、RNA分析和细胞生物学研究中都有广泛应用。

核心优势：

• 高特异性：仅切割RNA，不切割DNA，是RNA选择性去除的理想工具
  
• 高活性：湖南汇百益提供酶活≥80 U/mg的高标准产品，确保高效消化
  
• 金属离子耐受性：可在EDTA存在下使用，与核酸提取缓冲液兼容
  
• 热稳定性：可加热失活（100°C 15-20分钟），便于后续实验控制
  
• 多重激活机制：钾盐（K⁺）和钠盐（Na⁺）可激活RNase A
  
• 易于抑制：RNase抑制剂（RNasin）、DEPC处理、金属离子等均可抑制其活性
  

三、RNase A vs. RNase T1：对比分析

在分子生物学实验中，RNase A和RNase T1常配合使用实现彻底RNA消化：

联合应用：RNase A（C/U特异性）和RNase T1（G特异性）联用可完全覆盖所有四种核苷酸切割位点（A除外，A切割效率低），实现RNA的彻底消化。

四、主要应用领域

4.1 质粒DNA制备中去除RNA（核心应用）

RNase A是质粒DNA提取试剂盒的核心组分。在碱裂解法提取质粒DNA后，样本中常含有大量RNA污染，必须通过RNase A处理去除。

操作流程：

1. 质粒粗提物中加入RNase A至终浓度10-100 μg/mL
   
2. 37°C孵育15-30分钟
   
3. 后续纯化（离心柱或酚-氯仿抽提）去除RNase A
   
4. 获得高纯度无RNA污染的质粒DNA
   

4.2 细胞周期分析（PI染色前处理）

在PI（碘化丙啶）流式细胞术分析细胞周期时，RNase A处理是必须步骤。PI同时结合DNA和RNA，不经RNase处理会导致RNA干扰，产生假性S期细胞群。

标准操作：

1. 70%乙醇固定细胞
   
2. 加入RNase A至终浓度50-100 μg/mL
   
3. 37°C孵育30分钟
   
4. 加入PI染色
   
5. 流式细胞仪分析
   

4.3 蛋白质样品中去除RNA

在进行蛋白质组学研究时，RNA可能与蛋白质共纯化，干扰质谱分析。RNase A可用于消化蛋白样品中的RNA杂质。

应用场景：

• 核糖核蛋白（RNP）复合物分析
  
• RNA结合蛋白纯化后RNA去除
  
• 蛋白结晶前核酸污染清除
  

4.4 核糖核酸酶保护实验（RPA）

在核糖核酸酶保护实验中，RNase A用于消化未与探针杂交的单链RNA，而杂交形成的双链RNA（RNA-RNA）受到保护不被降解，可用于定量特定RNA种类。

4.5 体外转录RNA制备中的质量控制

在体外转录合成RNA时，残留的RNase A污染会降解产物。通过加入RNase抑制剂或使用DEPC处理可有效控制。

4.6 细胞裂解液制备

在制备细胞裂解物用于蛋白分析时，RNase A可用于降解内源性RNA，降低样本粘度，便于后续操作。

五、实验方案

5.1 储存液配制

10 mg/mL RNase A储存液（推荐浓度）：

1. 称取10 mg RNase A粉末
   
2. 溶解于1 mL 10 mM Tris-HCl（pH 7.5）、15 mM NaCl缓冲液（提供稳定环境）
   
3. 轻轻混匀（避免剧烈震荡）
   
4. 分装至无菌EP管（50-100 μL/管）
   
5. 煮沸15-20分钟以灭活可能存在的DNase残留（RNase A耐受此温度）
   
6. 储存条件：-20°C长期保存（1年稳定）
   

配制要点：

• 为灭活可能共纯化的DNase，建议加热处理
  
• RNase A对反复冻融相对耐受，但仍建议分装保存
  
• 储存缓冲液中含NaCl有助于酶稳定性
  
• 若用于细胞周期分析，无需加热灭活步骤
  

5.2 工作浓度参考

5.3 抑制剂与失活方法

重要提示：RNase A具有高热稳定性（4个二硫键），常规65°C加热不足以完全失活。需要100°C煮沸15-20分钟才能彻底灭活。

5.4 注意事项

避免RNase污染：

• 使用DEPC处理的水和缓冲液
  
• 使用无RNase的耗材（离心管、枪头）
  
• 在专门区域操作（与RNA提取区域隔离）
  
• 使用RNase抑制剂（RNasin）保护RNA样本
  

酶活检测：

• 湖南汇百益提供的RNase A酶活≥80 U/mg
  
• 1单位定义为37°C、pH 5.0下水解RNA每分钟产生1 μmol酸溶性核苷酸所需的酶量
  

溶液稳定性：

• 长期保存：-20°C分装冻存
  
• 短期使用：可2-8°C保存1-2周
  
• 避免反复冻融
  

安全操作：RNase A对呼吸道有刺激性，操作时建议佩戴口罩和手套。

六、产品质量标准

湖南汇百益新材料有限公司提供的RNase A产品严格执行以下质量标准：

湖南汇百益通过严格的质量控制体系，确保产品无DNase/蛋白酶残留，适合对核酸完整性要求严格的分子生物学应用。

包装规格：

• 实验室规格：1g、5g、20g、100g
  
• 工业规格：1kg、5kg、25kg
  
• 溶液形式：可按需提供定制浓度
  

七、供应商介绍：湖南汇百益新材料有限公司

湖南汇百益新材料有限公司成立于2014年，位于怀化市洪江循环高新产业园区，拥有50,000平方米生产基地。公司是一家专注于生物基础试剂研发、生产与销售的“国家高新技术企业”、“湖南省专精特新企业”，拥有独立研发试验中心和生产基地，并已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证。

公司先后获得“怀化市工程技术研究中心”“湖南师范大学化学生物学功能材料产学研基地”“创新创业大赛湖南省优秀企业”“湖南新材料企业”等一系列荣誉称号。产品远销东南亚、欧美等多个国家和地区，得到全球客户认可和信赖。

依托强大的生产平台与技术实力，公司可灵活提供OEM代工服务与个性化定制方案，如提纯、精制加工等，以满足客户多元化需求。旗下品牌“汇百试剂”，通过提供性能稳定可靠、品质媲美进口、成本更具优势的国产试剂，为生物医药、体外诊断、生物工程及科研机构等领域的客户提供基础材料解决方案，以实现关键生物基础试剂国产化替代与关键试剂本土化供应，切实解决中国生物试剂的供应瓶颈问题，并持续助力科研突破与产业创新升级。

公司研发、生产、销售各种高纯生化试剂，包括：

• 糖苷系列：IPTG、ONPG、PNPG、DTT、x-gal、x-gluc等
  
• 生物缓冲剂：Tricine、HEPES、MOPS、CAPS、TAPS、MES、BES等
  
• 表面活性剂与去污剂：SDS、SURFACTIN、EMPIGEN BB、CHAPS、SB-8至SB-18系列等
  
• 检测试剂：泛影酸钠、PCA钙、G-418硫酸盐、DTE、TCEP-HCl、PMSF、PNPP、ABTS、TMB、TMB-PS、鲁米诺、异鲁米诺、ABEI、MU-Gal、D-荧光素钾盐等
  
• 高纯生化试剂：DEPC、异硫氰酸胍、PMSF、MTT、BSA、WST-8、RNase A等
  

湖南汇百益提供的RNase A产品具有以下突出优势：

• 高纯度高品质：纯度≥99%，酶活≥80 U/mg，批次稳定性好
  
• 无DNase污染：经加热灭活处理，确保无DNase残留
  
• 现货供应：常备库存，支持快速发货，满足紧急实验需求
  
• 规格灵活：提供从克级到公斤级（1g、5g、20g、100g、1kg、5kg、25kg）的产品
  
• 专业包装：采用密封、防潮包装，-20°C冷冻运输保存
  
• 技术支持：专业技术团队提供全程使用指导与问题解答
  
• 源头工厂：自产自销，具备价格优势和供应稳定性
  

八、联系我们

如需获取RNase A（CAS 9001-99-4）的产品报价、样品或技术支持，请联系湖南汇百益新材料有限公司：

• 产品咨询：13319523173
  
• 订购邮箱：ivy@hnhbsj.com
  
• 官方网站：https://www.hbsjxcl.com/
  

声明：本产品仅供科研使用，不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书，并遵守实验室安全操作规范。