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乙二醇-双(2-氨基乙醚)-N,N,N′,N′-四乙酸 (EGTA) — 高选择性钙离子螯合剂,离子缓冲与生理研究核心工具

2026-05-21 15:32:06

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一、产品基本信息项目内容产品名称乙二醇-双(2-氨基乙醚)-N,N,N′,N′-四乙酸英文名称Ethylene glycol-bis(2-aminoethyle

一、产品基本信息

项目内容
产品名称乙二醇-双(2-氨基乙醚)-N,N,N′,N′-四乙酸
英文名称Ethylene glycol-bis(2-aminoethylether)-N,N,N′,N′-tetraacetic acid
中文别名EGTA、依他酸、乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸、GEDTA
CAS号67-42-5
分子式C₁₄H₂₄N₂O₁₀
分子量380.35 g/mol
外观白色结晶粉末
纯度≥99%
溶解性微溶于水,溶于碱性溶液(如NaOH、KOH)
pKa四价酸结合Ca²⁺的pKa为11.00(表观pKa在pH7时约6.91)
储存条件室温密封干燥保存,有效期5年
用途Ca²⁺选择性螯合剂,用于钙缓冲液配制、钙离子浓度调控、重金属污染修复、MMPs抑制剂等

二、产品简介与核心优势

EGTA(乙二醇-双(2-氨基乙醚)-N,N,N′,N′-四乙酸)是一种氨基多羧酸类钙离子选择性螯合剂,在生物化学和生理学研究中应用极为广泛。与EDTA(乙二胺四乙酸)相比,EGTA对钙离子(Ca²⁺)具有极高的选择性——它与钙离子形成的复合物比与镁离子(Mg²⁺)形成的复合物稳定约100,000倍。

EGTA的这一独特性质使其成为钙离子研究领域不可或缺的工具试剂:在镁离子存在下,EGTA能够精确测定和调控钙离子浓度,广泛应用于钙离子缓冲液配制、细胞内钙信号研究、离子通道功能分析、细胞生理学实验等场景。

核心优势

  • 超高钙选择性:Ca²⁺/Mg²⁺选择性比高达100,000:1,是区分钙镁离子的理想工具
  • 经典钙缓冲体系:EGTA-Ca²⁺缓冲液是校准钙离子选择性电极和荧光探针的“金标准”体系
  • 细胞膜渗透衍生物:EGTA-AM形式可穿透细胞膜,用于活细胞内钙离子浓度调控
  • 多领域应用:涵盖分子生物学、生理学、神经科学、环境科学等多个领域
  • 高品质保证:湖南汇百益提供≥99%高纯度产品,分子生物学级别,严格质控

三、EGTA vs. EDTA:对比分析

对比项EGTA(本品)EDTA
CAS号67-42-560-00-4
对Ca²⁺的结合常数(log K)11.010.96
对Mg²⁺的结合常数(log K)5.28.79
Ca²⁺/Mg²⁺选择性比~100,000:1~100:1
主要优势钙离子高选择性螯合广谱金属离子螯合
主要应用钙信号研究、钙缓冲液金属离子掩蔽、抗凝

选择建议

  • 需要在Mg²⁺存在下测定Ca²⁺必须使用EGTA,EDTA无法区分
  • 钙离子缓冲液配制(钙电极/荧光探针校准)选择EGTA,经典方法
  • 重金属螯合/去除(Pb²⁺、Cd²⁺、Co²⁺等):EDTA或EGTA均可
  • 广谱金属离子螯合:选择EDTA

四、核心应用领域

4.1 钙离子缓冲液配制(核心应用Ⅰ)

EGTA是钙离子缓冲液的首选试剂,广泛应用于细胞内游离钙离子浓度的测定和调控。

应用场景

  • 钙选择性电极校准:用EGTA-Ca²⁺缓冲液校准电极,测定细胞内Ca²⁺浓度
  • 荧光探针(Fura-2、Indo-1)校准:EGTA缓冲液用于建立Ca²⁺浓度-荧光强度标准曲线
  • 钙离子“钳制”实验:在模拟生理条件的缓冲液中精确控制游离Ca²⁺浓度
  • 膜片钳实验:电极内液和外液的钙离子浓度调控

技术要点

  • 制备准确的EGTA钙缓冲液需考虑三大因素:EGTA纯度、钙污染、表观结合常数(Kapp)
  • 可通过Bers方法(1982)同时测定纯度、污染和Kapp值
  • 研究表明,EGTA与Ca²⁺的结合常数为~1.4×10⁶ M⁻¹(与文献值8.12×10⁶ M⁻¹同数量级)

4.2 钙离子相关生理过程研究(核心应用Ⅱ)

EGTA通过螯合细胞外钙离子,是研究钙依赖性生理过程的关键工具

典型应用

  • 神经保护研究:EGTA能够保护神经细胞免受一氧化氮诱导的钙外流引起的死亡
  • 细胞凋亡研究:EGTA可诱导PC12细胞发生凋亡,用于细胞死亡机制研究
  • 酶活性调控:EGTA能激活大鼠肝脏质膜中钙离子刺激的ATPase活性
  • 基质金属蛋白酶(MMPs)抑制:EGTA通过螯合MMPs活性位点所需的锌离子,抑制其生理活性

4.3 细胞膜渗透衍生物—EGTA-AM

EGTA本身带有负电荷,不能穿透细胞膜。EGTA-AM(EGTA乙酰氧甲酯) 是其酯化衍生物,可自由穿透细胞膜,进入细胞后被酯酶水解为EGTA,实现细胞内钙离子螯合

应用流程(以EGTA-AM为例):

  1. 储存液配制:将EGTA-AM溶于无水DMSO(2-5 mM)
  2. 工作液配制:用HHBS缓冲液稀释至5-10 μM,加入0.02-0.04% Pluronic® F-127增强分散性
  3. 细胞装载:37°C孵育细胞20-120分钟
  4. 洗涤:用含丙磺舒的缓冲液替换染料工作液
  5. 实验:进行钙离子相关功能检测

注意事项:使用EGTA-AM时,丙磺舒(Probenecid,1-2.5 mM)可抑制染料从细胞中外排

4.4 重金属污染土壤修复

EGTA作为可生物降解的螯合剂,在环境修复领域具有重要应用价值。

研究数据

  • Cd污染修复:2.0 mmol/kg EGTA作用下,青葙对Cd的生物富集系数是对照的1.55倍,转运系数是对照的1.61倍
  • Pb污染修复:3.0 mmol/kg EGTA处理,青葙地上部Pb富集系数是对照的1.63倍,转移系数是对照的1.47倍
  • Co胁迫缓解:1.0 mmol/L EGTA处理可显著恢复Co胁迫下紫花苜蓿种子的发芽率和幼苗长度

核心价值:适当剂量的EGTA作为诱导活化剂,可强化超积累植物对重金属的吸收富集,为植物修复技术提供支撑

4.5 ELISA与碱性磷酸酶抑制

EGTA还能用于ELISA反应中以抑制碱性磷酸酶(AP)活性,在免疫检测方法开发中具有应用价值。其机制是通过螯合碱性磷酸酶活性位点所需的金属离子(如Zn²⁺、Mg²⁺),可逆地抑制酶活性。

4.6 分子生物学应用

  • RNA逆转录酶中RNA的脱氧测序缓冲液组分
  • 容量分析及光度分析中测量微量金属的络合剂、掩蔽剂
  • 滴定钡、锶、铜、镁和锌

五、溶液配制与使用建议

5.1 EGTA储存液配制

EGTA微溶于水,必须用碱性溶液溶解

0.5 M EGTA储存液(pH 8.0)配制

  1. 称取190.2 g EGTA,加入约800 mL去离子水
  2. 在磁力搅拌器上搅拌,缓慢加入NaOH颗粒或浓NaOH溶液
  3. 调节pH至8.0,EGTA逐渐溶解
  4. 定容至1000 mL
  5. 过滤除菌(如需要),分装保存

常见工作浓度

应用场景推荐浓度备注
钙缓冲液配制1-10 mM需精确计算Kapp值
细胞外钙螯合0.5-5 mM用于生理功能研究
ELISA碱性磷酸酶抑制1-5 mM可逆抑制
重金属污染修复(土壤)1-3 mmol/kg植物强化修复

5.2 钙缓冲液配制要点

制备准确的EGTA钙缓冲液需注意:

  1. EGTA纯度测定:市售EGTA纯度一般≥97%,需确认
  2. 钙污染控制:去离子水、试剂中可能含钙,需用螯合树脂处理或使用“钙空白”对照
  3. 表观结合常数(Kapp)计算:受pH、离子强度、温度影响,需在实验条件下测定
  4. 推荐方法:采用Bers方法(1982)同时测定纯度、污染和Kapp值

5.3 储存条件

  • 粉末:室温密封干燥保存,避光防潮,有效期5年
  • 溶液:4°C短期保存,-20°C长期保存,避免反复冻融

六、产品质量标准

湖南汇百益新材料有限公司提供的EGTA产品严格执行以下质量标准:

检测项目质量指标
外观白色结晶粉末
纯度≥99%
分子式C₁₄H₂₄N₂O₁₀
分子量380.35
溶解性溶于碱性溶液
水分≤1.0%
重金属≤5 ppm
生物学活性符合钙离子螯合验证标准

湖南汇百益通过严格的质量控制体系,确保产品纯度符合分子生物学级别要求,钙离子螯合活性稳定可靠。产品批间一致性良好,适合科研及诊断试剂的规模化使用。

七、供应商介绍:湖南汇百益新材料有限公司

湖南汇百益新材料有限公司成立于2014年,位于怀化市洪江工业园,拥有50,000平方米生产基地。公司是一家专注于生物基础试剂研发、生产与销售的“国家高新技术企业”“湖南省专精特新企业”,拥有独立研发试验中心和生产基地,并已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证。

公司先后获得“怀化市工程技术研究中心”“湖南师范大学化学生物学功能材料产学研基地”“创新创业大赛湖南省优秀企业”“湖南新材料企业”等一系列荣誉称号。

依托强大的生产平台与技术实力,公司可灵活提供OEM代工服务个性化定制方案,如提纯、精制加工等,以满足客户多元化需求。旗下品牌“汇百试剂”,通过提供性能稳定可靠、品质媲美进口、成本更具优势的国产试剂,为生物医药、体外诊断、生物工程及科研机构等领域的客户提供基础材料解决方案,以实现关键生物基础试剂国产化替代与关键试剂本土化供应,切实解决中国生物试剂的供应瓶颈问题,并持续助力科研突破与产业创新升级。

公司研发、生产、销售各种高纯生化试剂,包括:

  • 糖苷系列:IPTG、ONPG、PNPG、DTT、x-gal、x-gluc等
  • 生物缓冲剂:Tricine、HEPES、MOPS、CAPS、TAPS、MES、BES等
  • 表面活性剂与去污剂:SDS、SURFACTIN、EMPIGEN BB、CHAPS、SB-8至SB-18系列等
  • 检测试剂:泛影酸钠、PCA钙、G-418硫酸盐、DTE、TCEP-HCl、PMSF、PNPP、ABTS、TMB、TMB-PS、鲁米诺、异鲁米诺、ABEI、MU-Gal、D-荧光素钾盐等
  • 高纯生化试剂:DEPC、异硫氰酸胍、PMSF、MTT、BSA、WST-8等

湖南汇百益提供的EGTA产品具有以下突出优势:

  • 高纯度:纯度≥99%,批次稳定性好,钙离子螯合选择性优异
  • 分子生物学级品质:产品经严格质检,符合钙缓冲液配制标准
  • 现货供应:常备库存,支持快速发货,满足紧急实验需求
  • 规格灵活:提供从克级到公斤级的产品
  • 专业包装:采用密封、防潮包装,室温/冷藏运输保存
  • 技术支持:专业技术团队提供全程使用指导与问题解答
  • 源头工厂:自产自销,具备价格优势和供应稳定性

八、采购与使用建议

在采购EGTA(CAS 67-42-5)时,建议重点关注以下几点:

  1. 纯度要求:对于钙缓冲液配制和敏感生理实验,建议选择纯度≥99%的产品,以确保钙离子结合常数的准确性和实验可重复性。
  2. 溶解性注意:EGTA微溶于水,必须用碱(NaOH/KOH)溶解,不可直接用去离子水溶解。
  3. 钙缓冲液配制验证:对于精确控制Ca²⁺浓度的实验,建议采用Bers方法(1982)同时测定EGTA纯度、钙污染和表观结合常数。
  4. pH控制:EGTA的钙结合能力呈pH依赖性,在pH 7.0-8.0范围内表观结合常数显著变化,实验中需严格控制pH。
  5. 储存条件室温密封干燥保存,避免吸潮,有效期5年。
  6. EGTA-AM选择:如需进行细胞内钙离子螯合实验,需采购EGTA-AM(CAS 99590-86-0),而非EGTA本身。

九、联系我们

如需获取EGTA(CAS 67-42-5)的产品报价、样品或技术支持,请联系湖南汇百益新材料有限公司:


声明:本产品仅供科研使用,不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书,并遵守实验室安全操作规范。


作者: 湖南汇百益新材料有限公司
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一、产品基本信息项目内容产品名称乙二醇-双(2-氨基乙醚)-N,N,N′,N′-四乙酸英文名称Ethylene glycol-bis(2-aminoethyle
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