水溶性四氮唑-8 (WST-8) — 高灵敏度细胞增殖检测试剂，CCK-8法核心原料

一、产品基本信息

二、产品简介与核心优势

WST-8是一种新一代水溶性四唑盐，是MTT及XTT等传统四唑盐的理想升级替代品，也是CCK-8（Cell Counting Kit-8）细胞增殖检测试剂盒的核心显色原料。在细胞内脱氢酶（主要位于线粒体）催化下，WST-8在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪硫酸甲酯（1-Methoxy PMS）存在时被还原，生成高度水溶性的橙黄色甲臜（formazan）染料。该反应的颜色深度与活细胞数量成正比，通过酶标仪在450 nm处测定吸光度，即可高灵敏地评估细胞增殖、活性和毒性。

与MTT、XTT、MTS等传统四唑盐相比，WST-8具有多项显著优势：

核心优势：

• 操作极简：WST-8试剂为即用型溶液，加入细胞培养孔后可直接孵育检测，无需任何有机溶剂溶解步骤，全程无需换液
  
• 超高灵敏度：与MTT相比，WST-8具有更宽的线性范围和更高的检测灵敏度，特别适合低密度细胞和高通量药物筛选
  
• 极低细胞毒性：与MTT的高毒性（会完全杀伤细胞）不同，WST-8毒性极低且不进入细胞，染色后细胞形态和活力基本不受影响，可用于同一培养物的连续观察
  
• 甲臜水溶性：生成的甲臜产物完全溶于培养基，不会像MTT甲臜（不溶于水）那样形成结晶，无需有机溶剂溶解
  
• 高度稳定：WST-8溶液在4°C下可稳定保存1年，-20°C下可稳定保存2年甚至更长时间
  
• 优异兼容性：培养基中的酚红、血清成分对检测影响极小，计算时扣除背景即可
  

三、WST-8 vs. 其他四唑盐：对比分析

湖南汇百益提供多种四唑盐产品，您可根据实验需求选择：

注：WST-8是CCK-8法的核心原料，CCK-8试剂盒的本质就是含WST-8和电子载体的预混溶液。

选择建议：

• 高通量药物筛选、现代细胞实验室：首选WST-8（CCK-8法），是目前最先进、最便捷的细胞增殖检测方案
  
• 传统实验且已有成熟MTT方案：可继续使用MTT，但需注意其细胞毒性
  
• 悬浮细胞检测：WST-8无需换液，特别适合悬浮细胞
  

四、检测原理

WST-8的显色反应基于活细胞线粒体脱氢酶的还原反应：

Step 1：电子传递

• 活细胞内的线粒体脱氢酶（特别是琥珀酸脱氢酶等）将NAD(P)H氧化为NAD(P)+
  
• 电子载体1-Methoxy PMS接受电子并传递给WST-8
  

Step 2：四唑盐还原

• WST-8（淡黄色，氧化型）
  
• 在1-Methoxy PMS介导下被还原
  
• 四唑环断裂，生成橙黄色甲臜染料（formazan）
  

Step 3：定量检测

• 甲臜染料完全溶解在细胞培养基中
  
• 使用酶标仪在430-490 nm（最佳450 nm）处测定吸光度
  
• 吸光度强度与活细胞数量成正比，与细胞毒性成反比
  

反应特点：

• 反应特异性强，仅限于活细胞
  
• 甲臜水溶性，无需有机溶剂溶解
  
• 毒性极低，可连续监测同一培养物
  
• 线性范围宽，灵敏度高
  

五、主要应用领域

5.1 CCK-8细胞增殖检测试剂盒（核心应用）

WST-8是CCK-8（Cell Counting Kit-8）细胞增殖检测试剂盒的核心显色组分。全球范围内的生物医药公司和科研机构普遍采用CCK-8法进行细胞增殖评估，WST-8原料的纯度和批间稳定性直接影响试剂盒的质量。

应用场景：

• 细胞增殖实验（不同处理条件下细胞生长曲线绘制）
  
• 细胞毒性实验（药物、化合物、纳米材料等的细胞毒性评估）
  
• 药物高通量筛选（96/384孔板格式，快速筛选候选化合物）
  
• 肿瘤药敏试验（评估化疗药物对患者肿瘤细胞的杀伤效果）
  
• 生物因子活性检测（生长因子、细胞因子等的生物学活性测定）
  
• 细胞培养条件优化（培养基组分、血清浓度等对细胞增殖的影响）
  

检测流程（标准96孔板）：

1. 细胞接种于96孔板（建议贴壁细胞≥1000个/孔，白细胞≥2500个/孔）
   
2. 加入待测药物或处理因素，培养适当时间
   
3. 每孔加入10 μL CCK-8溶液（含WST-8和电子载体）
   
4. 37°C孵育1-4小时
   
5. 酶标仪450 nm测定吸光度
   
6. 计算细胞存活率或增殖率
   

5.2 重组人细胞因子活性测定

研究证实，WST-8可成功用于重组人白细胞介素-2（IL-2）的生物学活性测定。在依赖IL-2的细胞株培养体系中，WST-8被活细胞还原的程度与IL-2的活性浓度呈正相关，建立了一种快速、简便的IL-2活性检测方法。

5.3 微生物活性检测

WST-8可用于细菌、酵母等微生物的活性检测和抗菌药物敏感性试验。通过测定微生物代谢活性，评估抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）。

5.4 悬浮细胞研究

WST-8法无需更换培养基，可直接在悬浮细胞培养体系中加入试剂，特别适合悬浮生长的淋巴细胞、白血病细胞、杂交瘤细胞等的活性检测。

5.5 组织工程与再生医学

在三维细胞培养体系中，WST-8可用于支架上种子细胞的活力和增殖检测，评估生物材料的细胞相容性。

六、产品质量标准

湖南汇百益新材料有限公司提供的WST-8产品严格执行以下质量标准：

湖南汇百益通过优化合成工艺与精制技术，将产物纯度稳定控制在≥98%（HPLC检测），确保显色反应的灵敏度高、背景值低、批次间一致性良好，适合CCK-8试剂盒的规模化生产。

储存稳定性：

• 粉剂在-20°C避光条件下可稳定保存2-3年
  
• 配制成CCK-8溶液后，4°C避光可稳定保存至少1年，-20°C可稳定保存2年
  
• 产品对光敏感，储存和工作液均应避光
  

七、WST-8的储存与使用建议

7.1 储存条件

• 粉末储存：-20°C冷冻保存，避光防潮
  
• 溶液储存：CCK-8溶液（WST-8+电子载体）在4°C避光可稳定保存1年，-20°C可保存2年以上
  
• 稳定性监测：CCK-8溶液呈淡粉至粉红色，若颜色显著变深（深红色），表明可能已降解
  

7.2 使用建议

CCK-8检测标准流程（参照文献）：

• 接种密度：96孔板，贴壁细胞至少1000个/孔（100 μL培养基），白细胞至少2500个/孔
  
• 加药处理：培养过夜或药物处理适当时间
  
• CCK-8加入量：每孔加入10 μL CCK-8溶液（最终WST-8浓度约~0.5 mM）
  
• 孵育时间：37°C，CO₂培养箱，1-4小时（灵敏度和线性与孵育时间正相关）
  
• 检测波长：酶标仪450 nm（若无双波长，可选择430-490 nm之间）
  
• 参考波长：650 nm（用于背景扣除，降低误差）
  

不同培养板规格用量：

• 96孔板：加入10 μL CCK-8溶液/孔
  
• 48孔板：加入20 μL CCK-8溶液/孔
  
• 24孔板：加入40 μL CCK-8溶液/孔
  
• 6孔板：加入100 μL CCK-8溶液/孔
  

7.3 注意事项

• 避光操作：WST-8对光敏感，实验中注意避光（可使用铝箔包裹）
  
• 气泡干扰：测定前检查有无气泡，以免影响吸光度
  
• 孵育时间优化：对于不同细胞系和处理条件，建议预先进行时间-信号线性关系预实验
  
• 背景扣除：空白孔（培养基+CCK-8，不加细胞）应有较高OD值（>0.1），需减去背景
  
• 细胞毒性极低的优势：由于WST-8几乎无细胞毒性，同一培养物可用于连续时间点的多次检测
  

八、供应商介绍：湖南汇百益新材料有限公司

湖南汇百益新材料有限公司成立于2014年，位于怀化市洪江工业园，拥有50,000平方米生产基地。公司是一家专注于生物基础试剂研发、生产与销售的“国家高新技术企业”、“湖南省专精特新企业”，拥有独立研发试验中心和生产基地，并已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证。公司严格按照国际标准，不断完善硬件设施与质控流程，构建了全方位覆盖的精控生产体系，核心产品IPTG、DTT等高端生物原材料，质量已达国际先进水平。

公司先后获得“怀化市工程技术研究中心”“湖南师范大学化学生物学功能材料产学研基地”“创新创业大赛湖南省优秀企业”“湖南新材料企业”等一系列荣誉称号。核心产品DTT荣获“湖南省首批次重点新材料产品”认定。

依托强大的生产平台与技术实力，公司可灵活提供OEM代工服务与个性化定制方案，如提纯、精制加工等，以满足客户多元化需求。旗下品牌“汇百试剂”，通过提供性能稳定可靠、品质媲美进口、成本更具优势的国产试剂，为生物医药、体外诊断、生物工程及科研机构等领域的客户提供基础材料解决方案，以实现关键生物基础试剂国产化替代与关键试剂本土化供应，切实解决中国生物试剂的供应瓶颈问题，并持续助力科研突破与产业创新升级。

公司研发、生产、销售各种高纯生化试剂，包括：

• 糖苷系列：IPTG、ONPG、PNPG、DTT、x-gal、x-gluc、D-荧光素钾盐等
  
• 生物缓冲剂：Tricine、HEPES、MOPS、CAPS、TAPS、MES、BES等
  
• 表面活性剂与去污剂：SDS、SURFACTIN、EMPIGEN BB、CHAPS、SB-8至SB-18系列等
  
• 检测试剂：G-418硫酸盐、TCEP-HCl、PMSF、PNPP、ABTS、TMB、TMB-PS、鲁米诺、异鲁米诺、ABEI、WST-8、PMS、黄嘌呤钠盐、CNP-AFU、乙酸-1-萘酯等
  
• 高纯生化试剂：DEPC、异硫氰酸胍、PMSF、MTT、BSA等
  

湖南汇百益提供的WST-8产品具有以下突出优势：

• 高纯度：纯度≥98%，批次稳定性好，细胞增殖检测性能优异
  
• CCK-8试剂盒核心原料：可直接用于CCK-8法细胞增殖检测试剂盒的生产
  
• 现货供应：常备库存，支持快速发货，满足紧急生产需求
  
• 规格灵活：提供从克级到公斤级的产品，满足从科研到工业级生产的不同需求
  
• 专业包装：采用避光、密封、防潮包装，-20°C冷冻运输保存
  
• 技术支持：专业技术团队提供全程使用指导与问题解答
  
• 源头工厂：自产自销，具备价格优势和供应稳定性
  

九、联系我们

如需获取WST-8（CAS 193149-74-5）的产品报价、样品或技术支持，请联系湖南汇百益新材料有限公司：

• 产品咨询：13319523173
  
• 订购邮箱：ivy@hnhbsj.com
  
• 官方网站：https://www.hbsjxcl.com/
  
• 公司地址：湖南省怀化市洪江区工业园8号
  

声明：本产品仅供科研使用，不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书，并遵守实验室安全操作规范。