3,3‘,5,5’-四甲基联苯胺（TMB）— ELISA首选显色底物与体外诊断核心原料

一、产品基本信息

• 产品名称：３，３‘，５，５’－四甲基联苯胺
  
• 英文名称：３，３‘，５，５’－Ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｉｄｉｎｅ
  
• ＣＡＳ号：５４８２７－１７－７
  
• 分子式：Ｃ₁₆Ｈ₂₀Ｎ₂
  
• 分子量：２４０．３４
  
• 外观：白色至类白色结晶粉末
  
• 纯度：≥９９％（ＨＰＬＣ）
  
• 熔点：１６８－１７１°Ｃ
  
• 溶解性：难溶于水，易溶于丙酮、乙醚、ＤＭＳＯ、ＤＭＦ等有机溶剂
  
• 储存条件：２－８°Ｃ冷藏，避光防潮，远离金属，有效期１－２年
  

二、产品简介与核心优势

ＴＭＢ是ＥＬＩＳＡ（酶联免疫吸附试验）中最常用的辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）显色底物，是联苯胺的非致癌性安全替代品，Ａｍｅｓ试验结果阴性。在ＨＲＰ和过氧化氢存在下，ＴＭＢ被氧化生成可溶性蓝绿色产物，可通过分光光度法进行定量检测，加酸终止后产物变为黄色，在４５０　ｎｍ处读取吸光度。

核心优势：

• 检测灵敏度高：ＴＭＢ具有极高的检测灵敏度，特别适用于ＥＬＩＳＡ、ＥＩＡ等免疫检测方法中低丰度目标物的定量分析。
  
• 安全性好：非致癌性联苯胺替代品（Ａｍｅｓ试验阴性），使用安全，符合实验室环保要求，已在临床检验和法医鉴定等领域逐步取代强致癌物联苯胺及其衍生物。
  
• 稳定性强：在适当储存条件下（２－８°Ｃ避光）具有良好的化学稳定性，ＴＭＢ显色液背景值低，批间差异小，结果重复性高。
  
• 显色鲜明：反应生成的蓝色产物颜色鲜明，对比度高，易于肉眼观察和仪器定量。
  

三、主要应用领域

３．１　ＥＬＩＳＡ酶联免疫检测（核心应用）

ＴＭＢ是ＥＬＩＳＡ实验中ＨＲＰ标记检测系统的首选显色底物，也是迄今为止最常用的生色底物。其显色反应基于Ｈ₂Ｏ₂存在下ＨＲＰ催化氧化ＴＭＢ，产生可溶性蓝色产物，在３７０　ｎｍ或６２０－６５０　ｎｍ处测定吸光度。加入酸性终止液（如２Ｍ　Ｈ₂ＳＯ₄）后，蓝色变为黄色，在４５０　ｎｍ处进行终点检测。

ＴＭＢ已广泛应用于各种ＥＬＩＳＡ检测方案中，包括：

• 传染病标志物检测（如乙肝、丙肝、ＨＩＶ等）
  
• 肿瘤标志物检测（如ＣＡ１２５、ＰＳＡ等）
  
• 自身免疫抗体检测
  
• 细胞因子定量分析
  
• 食品安全中兽药残留、农药残留的ＥＬＩＳＡ检测（如磺胺残留总量检测）
  

３．２　临床生化检验与粪便隐血试验

ＴＭＢ作为过氧化酶的新型底物，在临床生化检验中获得了广泛应用。在粪便隐血试验中，以ＴＭＢ为主要原料制备的干片试纸，浸入粪便样本液后试纸呈蓝色即为阳性，能够检测到样本中血红蛋白（Ｈｂ）含量范围为５－１０　０００　μｇ／ｍＬ，是消化道出血筛查的重要方法。

３．３　法医检验与潜血检测

ＴＭＢ可用于潜血指纹检测和潜血鞋印显现，在刑事侦破领域具有重要应用价值。ＴＭＢ能够与血液中的血红蛋白发生显色反应，对低浓度血液样本具有灵敏的检测能力。

３．４　水质检测与环境监测

ＴＭＢ可作为游离氯的光谱试剂，用于水质检测中的余氯、亚硝酸盐等指标分析，同时也可用于环境监测领域的氯含量分析。

３．５　食品安全与农药残留检测

ＴＭＢ在食品安全检测领域具有重要应用。近年来，基于纳米酶的比色传感平台利用ＴＭＢ作为显色底物，开发了针对食品中噻菌灵等农药残留的快速检测方法，检测范围为０．０３－１．２　µｇ／ｍＬ，检测限低至１１．７　ｎｇ／ｍＬ。同时，ＴＭＢ也广泛用于兽药残留、食品添加剂等项目的ＥＬＩＳＡ检测中。

３．６　酶活性测定与生化分析

ＴＭＢ可用于过氧化物酶活性的定量测定，也可用于细胞培养中死细胞鉴定。在分光光度法中，ＴＭＢ还可用作铁离子的指示剂，与铁络合生成显色产物，实现铁离子的定量分析。

３．７　其他科研应用

• 生物样品的免疫染色
  
• 尿联试纸的配制
  
• 唾液中酒精的快速检测
  
• 血液中葡萄糖、白蛋白的快速测定
  
• 类固醇、性激素的检测
  
• 抗原、抗体及遗传物质的分析检测
  

四、检测原理

ＴＭＢ的检测原理基于辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）催化的氧化显色反应：

Ｓｔｅｐ　１：在ＨＲＰ催化下，ＴＭＢ与过氧化氢发生单电子氧化反应，生成蓝绿色的阳离子自由基中间产物。

Ｓｔｅｐ　２：该产物在３７０　ｎｍ和６２０－６５０　ｎｍ处有特征吸收峰，可通过分光光度法进行定量检测，吸光度强度与目标物浓度成正比。

Ｓｔｅｐ　３：加入酸性终止液（如２Ｍ　Ｈ₂ＳＯ₄或１％　ＳＤＳ溶液）后，反应产物转变为黄色的二亚胺末端氧化产物，最大吸收波长变为４５０　ｎｍ，适用于终点法测定。

Ｓｔｅｐ　４：当用于总抗氧化能力检测时，抗氧化物质会抑制ＴＭＢ的氧化反应，抑制程度与抗氧化能力呈正相关。

五、ＴＭＢ在体外诊断产业链中的战略地位

ＴＭＢ是体外诊断（ＩＶＤ）试剂盒的核心原料之一，在免疫诊断领域具有不可替代的地位。据行业研究数据，２０２４年全球ＴＭＢ底物市场规模约为７６２０万美元，预计２０３４年将扩大至１．２７７１亿美元，年复合增长率为５．３％。北美市场以３８％的份额占据主导，亚太地区以２５％的份额快速增长。在ＴＭＢ类底物市场中，水溶性衍生物ＴＭＢ－ＰＳ的占比已提升至４５％，中国企业的份额从２０１９年的１２％增长至２８％，国产替代趋势明显。

ＴＭＢ的需求主要来自ＥＬＩＳＡ应用（占约４５％）、药物和生物技术行业（约３２％）、临床实验室（约１８％）及学术研究（约５％）。超６０％的最终用户偏好高灵敏度的ＴＭＢ底物配方，以增强光密度值。随着ＰＯＣＴ快速诊断的普及，近５２％的快速诊断试剂盒现已整合ＴＭＢ底物。

六、产品质量标准

湖南汇百益新材料有限公司提供的ＴＭＢ产品严格执行以下质量标准：

湖南汇百益通过优化合成工艺，将产物纯度稳定控制在≥９９％（ＨＰＬＣ检测），关键杂质含量控制在极低水平，确保显色反应的背景值低于０．０５　ＯＤ（４５０ｎｍ）。其自主研发的结晶技术使批间差控制在±２％以内，这在免疫组化等精密实验中尤为重要。

七、供应商介绍：湖南汇百益新材料有限公司

湖南汇百益新材料有限公司成立于２０１４年，位于怀化市洪江工业园，拥有２７０００平方米生产基地，建筑面积１００００平方米。经过多年发展，现已形成以“糖化学”“生物缓冲剂”“体外诊断试剂原材料”“高纯生物基础试剂”等为主导的，集研发、生产、销售和服务于一体的国家高新技术企业，已通过ＩＳＯ９００１：２０１５质量体系认证，并建立了自有试剂品牌——“汇百试剂”。

公司产品线涵盖千余种高纯生化试剂，包括：

• 糖苷系列：ＩＰＴＧ、ＯＮＰＧ、ＰＮＰＧ、ＤＴＴ、ｘ－ｇａｌ、ｘ－ｇｌｕｃ等
  
• 生物缓冲剂：ＴＲＩＳ、ＴＡＰＳ、ＣＡＰＳ、ＭＯＰＳ、ＨＥＰＥＳ、ＡＤＡ等
  
• 诊断试剂原料：ＡＢＴＳ、ＴＭＢ、ＴＴＣ、ＴＭＢ－ＰＳ等
  
• 高纯生化试剂：ＤＥＰＣ、ＴＣＥＰ－ＨＣｌ、异硫氰酸胍、ＰＭＳＦ、ＭＴＴ、ＢＳＡ等
  

湖南汇百益提供的ＴＭＢ产品具有以下突出优势：

• 高纯度：ＨＰＬＣ纯度≥９９％，批次稳定性好，适合ＥＬＩＳＡ试剂盒的规模化生产
  
• 现货供应：常备库存，支持快速发货，满足紧急生产需求
  
• 专业包装：采用避光、密封、防潮包装，确保产品在运输和储存过程中的稳定性
  
• 技术支持：专业技术团队提供全程使用指导与问题解答
  
• 规模化供应能力：可提供从克级到公斤级的ＴＭＢ产品，满足从科研到工业级生产的不同需求
  

八、采购与使用建议

在采购ＴＭＢ（ＣＡＳ　５４８２７－１７－７）时，建议重点关注以下几点：

1. 纯度要求：对于ＥＬＩＳＡ试剂盒生产和ＩＶＤ诊断试剂等敏感应用场景，请选择ＨＰＬＣ纯度≥９９％的产品，以确保检测结果的准确性和重复性。
   
2. 批间一致性：对于试剂盒的规模化生产，批间差异是关键质量指标。选择具备严格质量控制和稳定结晶技术的供应商，如湖南汇百益新材料有限公司。
   
3. 供货稳定性：选择具备稳定供应链和可靠交付能力的供应商，确保长期稳定的原料供应。
   
4. 包装规格：根据实验用量选择合适的包装规格，常见规格包括１ｇ、５ｇ、１０ｇ、２５ｇ、１００ｇ等。建议按需分装储存，避免反复冻融。
   
5. 储存条件：收到产品后请立即２－８°Ｃ冷藏、避光防潮保存，远离金属。ＴＭＢ显色液配制后应在４°Ｃ避光短期保存，不宜长期存放。
   

九、联系我们

如需获取ＴＭＢ的产品报价、样品或技术支持，请联系湖南汇百益新材料有限公司：

• 产品咨询：１３３１９５２３１７３
  
• 订购邮箱：ｉｖｙ＠ｈｎｈｂｓｊ．ｃｏｍ
  
• 官方网站：ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｈｂｓｊｘｃｌ．ｃｏｍ／
  

声明：本产品仅供科研使用，不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书，并遵守实验室安全操作规范。