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一般描述
MES水合物缓冲液(2-(N-吗啉基)乙磺酸一水合物)是一种两性离子生物缓冲液,广泛应用于生物、环境和生化研究。pKa为6.1,是生理pH下缓冲溶液的首选。MES在20世纪60年代被开发为Good的缓冲液之一,满足特定标准:中等pKa、最大水溶性、在其他溶剂中的最小溶解度、最小盐效应、在不同温度下的稳定性、化学和酶稳定性,在可见光和UV光谱范围内的最小吸收以及易于合成。MES一水合物的特性,如低紫外线吸收率、最小反应性、pH稳定性和水溶性,使其成为Good的缓冲液。
MES水合物缓冲液还具有高水溶性和最小的金属离子结合,是各种应用的理想选择:
细胞生物学:MES水合物缓冲液通常是缓冲细胞培养基的首选,因为与Tris和磷酸盐等其他缓冲液相比,其对细胞的毒性较低。
蛋白质纯化和提取:其在宽pH范围内的稳定性和最小的金属离子结合使MES水合物缓冲液成为蛋白质纯化和萃取方案中的宝贵资产。
凝胶电泳:MES水合物缓冲液也是变性凝胶电泳中常用的运行缓冲液,确保蛋白质分离和分析的可靠结果。
应用
MES水合物已用于:
用作BACE1酶提取的提取缓冲液组分
在测定成纤维细胞中的5,10-亚甲基四氢叶酸合成酶(百万赫兹)活性时,用作反应混合物组分
在mAb或消费税融合蛋白偶联羧化改性聚苯乙烯胶乳(CML)珠过程中,用作MES偶联缓冲液组分
特点和优势
经过测试,确认重金属污染水平较低,确保适用于各种应用
有效缓冲pH为5.5-6.7(25°C),pKa为6.1(25°C.)
高度溶于水
最小金属离子结合
与Tris和磷酸盐等其他缓冲液相比,对细胞的毒性更小
在宽pH范围内稳定
紫外线吸收率低
最小反应性
制备说明
可通过氢氧化钠滴定至所需的酸碱度值,制备使用MES的缓冲液。也可将MES和MES钠盐的储备溶液混合,达到所需的酸碱度。目前已公布了使用储备溶液制备指定 酸碱度缓冲液的标准混比表。不建议在pH 7.4的缓冲液中使用MES此时应考虑其他缓冲液。
储存及稳定性
溶液可在2-8°C条件下稳定保存数月。通过0.2μM过滤器过滤灭菌。不建议对任何磺酸缓冲液进行高温高压灭菌。如果缓冲液必须不含核酸酶,请先处理水,然后在高温高压灭菌后添加缓冲液。MES溶液高压蒸汽灭菌后,会变成黄色(尽管酸碱度值并未明显变化)。黄色分解产物具体成分未知。
其他说明
溶解性:MES可溶于水,在0.5米或更高浓度下可形成透明无色溶液。类似产品MES水合物M8250已在20克/80毫升水或130万浓度下进行了测试。根据浓度不同,溶液的酸碱度应当在2.5至5.之间。0℃下的饱和溶液约为0.65米。

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