产品概述
焦碳酸二乙酯(DEPC)是一种高效、广谱的核糖核酸酶(RNase)不可逆抑制剂,同时也是用于修饰蛋白质中组氨酸与酪氨酸残基的特异性试剂。其核心作用机制是通过乙氧甲酰化反应共价修饰RNase等蛋白质的活性中心,使其永久失活。DEPC是防止RNA在提取、储存及操作过程中被降解的关键预处理试剂,广泛应用于对RNA完整性要求极高的分子生物学实验。
核心应用
一、RNA相关实验的试剂与耗材预处理:以0.1% (v/v) 的浓度用于处理去离子水、缓冲液及实验器皿,彻底灭活环境中潜在的RNase污染,是确保PCR、RT-PCR、Northern印迹及斑点杂交等实验成功的首要步骤。
二、蛋白质组学与结构研究:作为组氨酸和酪氨酸残基的特异性化学修饰探针,用于研究蛋白质活性位点、功能域及构象变化。
三、核酸结构分析:可作为DNA结构探针,与双链DNA中完全或部分未堆叠的碱基反应,用于研究DNA的二级结构、损伤或蛋白质-DNA相互作用。
四、细胞生理学研究:在特定模型中,用于研究兰尼碱受体/Ca²⁺通道的功能及肌质网囊泡的Ca²⁺通透性。
产品优势与使用须知
本产品作为强效RNase灭活剂,作用迅速且效果彻底,能最大程度保护RNA的完整性。其在水溶液中不稳定,可通过加热(如高压灭菌)或长时间静置完全分解为无毒的乙醇和二氧化碳,易于去除。操作时需注意:DEPC对胺类化合物(如Tris)敏感,会迅速反应失效,因此含胺缓冲液不可用DEPC直接处理;同时应避免与氨接触,以防生成潜在致癌物氨基甲酸乙酯。本品是构建无RNase实验环境的基石试剂。