产品概述
Sulfo-EMCS是一种水溶性、不可裂解的异型双功能交联试剂,分子两端分别携带胺反应性的磺基-NHS酯与巯基反应性的马来酰亚胺,中间由一段脂肪族己酸间隔臂连接,臂长9.4 Å。其磺基-NHS酯端在pH 7–9条件下与蛋白质伯胺形成稳定酰胺键;马来酰亚胺端在pH 6.5–7.5条件下与游离巯基形成硫醚键。Sulfo-EMCS区别于非磺化EMCS的核心特性在于:磺酸基团赋予其优异的水溶性,无需有机溶剂助溶即可直接在水相缓冲液中反应;同时使其无法穿透细胞膜(细胞渗透性:否),成为细胞表面标记与胞外偶联的专用工具。其脂肪族间隔臂引发免疫应答的可能性较低,适用于对连接子免疫原性有严格要求的应用。
核心应用
蛋白质与多肽的定向偶联:Sulfo-EMCS用于将含氨基的分子与含巯基的分子共价连接,适用于制备抗体-酶偶联物、抗体-药物偶联物(ADC)的不可裂解连接子及半抗原-载体蛋白免疫原。两步法策略为:先以磺基-NHS酯端修饰一种蛋白,经脱盐去除过量试剂后,再加入含游离巯基的第二种蛋白。
生物材料表面功能化:在一项专利文献中,Sulfo-EMCS被用于将GM-CSF拮抗肽P22共价偶联至氨基功能化的壳聚糖泡沫材料,构建用于伤口环境中捕获治疗因子的亲和材料。该偶联物对GM-CSF的捕获量较未修饰材料提高49%(608 pg/mL vs. 376 pg/mL),证实了Sulfo-EMCS在生物材料功能化中的实用价值。
细胞表面标记与蛋白质交联:Sulfo-EMCS的膜不可渗透性使其适用于选择性标记细胞表面蛋白,而不触及胞内组分。亦可用于蛋白质-蛋白质交联研究及诊断探针构建。
产品优势与关键参数
水溶性:可直接溶于水相缓冲液,无需DMSO/DMF助溶,避免有机溶剂对蛋白结构的扰动。反应条件:磺基-NHS酯端与伯胺在pH 7–9反应;马来酰亚胺端与巯基在pH 6.5–7.5反应。溶解性(储备液):DMSO中溶解度约125 mg/mL,便于配制高浓度储备液后稀释至水性体系。储存:粉末形式在-20°C可稳定3年,4°C可稳定2年;溶液形式建议-80°C保存不超过6个月,避免反复冻融。
关键操作提示:反应缓冲液中不得含Tris、甘氨酸等游离胺(竞争磺基-NHS酯)或DTT等还原剂(竞争马来酰亚胺)。若目标蛋白需先还原二硫键暴露巯基,须在偶联前彻底去除还原剂。磺基-NHS酯水溶液不稳定,建议现配现用。
储存与安全
GHS分类提示具有皮肤刺激(H315)与严重眼刺激(H319) 危害。操作时请佩戴防护手套、护目镜及防尘口罩,避免吸入粉尘与皮肤接触。本品仅供科研使用,具体安全信息请参阅产品安全数据表(SDS)。