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N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸 钠盐 (BES钠盐) — Good's缓冲液即用型试剂,磷酸钙转染与诊断试剂核心原料

2026-06-08 14:53:11

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一、产品基本信息项目内容产品名称N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸 钠盐英文名称BES Sodium Salt (N,N-Bis(2-hydroxyeth

一、产品基本信息

项目内容
产品名称N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸 钠盐
英文名称BES Sodium Salt (N,N-Bis(2-hydroxyethyl)-2-aminoethanesulfonic acid sodium salt)
中文别名BES钠盐、2-(二乙醇胺基)乙磺酸钠、N,N-二(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸钠
CAS号66992-27-6
分子式C₆H₁₄NNaO₅S
分子量235.23 g/mol
MDL号MFCD00067425
外观白色结晶粉末
纯度≥99%(滴定法),湖南汇百益
有效缓冲范围pH 6.4-7.8
pKa(25°C,游离酸)7.1
pKa(20°C,游离酸)7.15
溶解度(水)333.3 mg/mL(约1.42 M),澄清无色
储存条件室温密封保存,阴凉干燥处
级别分子生物学级、细胞培养级
用途磷酸钙介导真核细胞转染、诊断试剂制造、细胞培养基缓冲组分、限制性内切酶反应、蛋白质纯化

二、产品简介与核心优势

BES钠盐(BES Sodium Salt)是Good's缓冲液家族中经典缓冲剂BES的高纯度、高水溶性钠盐形式。作为一种两性离子磺酸类缓冲剂,BES钠盐在pH 6.4-7.8范围内具有优异的缓冲能力,其游离酸的pKa为7.1-7.15(20-25°C),完美覆盖了细胞培养、分子生物学和诊断试剂生产的pH需求。

与BES游离酸相比,BES钠盐的最大优势在于其即用型特性。它是预先中和的钠盐形式,可直接溶解配制缓冲液,无需用NaOH调节pH,极大简化了实验操作流程,并避免了因pH调节引入的额外钠离子或杂质。

BES钠盐继承了Good's缓冲液家族的核心特性:高水溶性、低细胞膜通透性、低金属螯合能力(不螯合Mg²⁺、Ca²⁺、Mn²⁺)、高化学稳定性、低紫外吸收(290 nm处吸光度≤0.1)。这些特性使其在需要精确pH控制的敏感生化实验中表现卓越。

磷酸钙介导的真核细胞转染领域,BES具有不可替代的地位。经典的Chen & Okayama转染方案(1987年,被引用超过10,000次)专门推荐使用BES缓冲生理盐水(BBS)进行高效稳定转染。BES钠盐作为BBS缓冲液的核心原料,支持磷酸钙-DNA沉淀物的缓慢、可控形成,从而获得比HEPES缓冲系统更高的稳定转染效率。

BES钠盐也被广泛应用于诊断试剂制造,其低紫外吸收、低重金属含量和批间稳定性符合诊断试剂生产的严格要求。在限制性内切酶反应中,BES对DNA操作的干扰小于Tris缓冲液,是分子生物学实验的理想选择。

湖南汇百益提供纯度≥99%的BES钠盐产品,严格符合分子生物学级质量标准,不含DNase、RNase和蛋白酶,现货供应,可按需定制包装。

三、BES钠盐的核心特性

3.1 Good's缓冲液的典范

BES属于Good's缓冲液家族,该家族缓冲剂专门设计用于生物学研究。Good's缓冲剂的共同特点包括:

  • 高水溶性:在生理pH范围内完全溶解
  • 低细胞膜通透性:不易穿透生物膜,对细胞过程干扰小
  • pKa稳定性:位于生理pH范围,受温度影响较小
  • 低金属螯合能力:不螯合Mg²⁺、Ca²⁺等关键金属离子
  • 高化学稳定性:不易与反应物发生副反应
  • 低紫外吸收:在紫外和可见光区吸光度极低(240-700 nm)

BES钠盐完全符合这些标准,其有效缓冲范围为pH 6.4-7.8,覆盖了大多数生物化学实验的pH需求。

3.2 缓冲特性总结

特性数值/描述
有效缓冲范围pH 6.4-7.8
pKa(25°C,游离酸)7.1
pKa(20°C,游离酸)7.15
性质两性离子
分子量235.23 g/mol
分子式C₆H₁₄NNaO₅S
溶解度(水)333.3 mg/mL,澄清无色
熔点159-163°C
干燥失重≤1.0%
紫外吸收(290 nm,10%溶液)≤0.1
重金属(以Pb计)≤5 ppm
金属离子结合不螯合Mg²⁺、Ca²⁺、Mn²⁺

3.3 BES钠盐 vs. BES游离酸

对比项BES钠盐(本品)BES游离酸
CAS号66992-27-610191-18-1
分子式C₆H₁₄NNaO₅SC₆H₁₅NO₅S
分子量235.23213.25
水溶性333.3 mg/mL良好
使用前处理直接溶解即可需加NaOH调pH
主要优势即用型,使用便捷灵活性更高

选择建议

  • 磷酸钙转染、常规缓冲液配制首选BES钠盐,使用便捷,无需调节pH
  • 需要精确控制离子强度的实验:可选择BES游离酸,自行调节

3.4 BES vs. 其他Good's缓冲液:对比分析

对比项BES(本品)HEPESMOPSTris
pKa(25°C)7.17.557.28.1
有效缓冲范围pH 6.4-7.8pH 6.8-8.2pH 6.5-7.9pH 7.0-9.0
磷酸钙转染最佳(Chen & Okayama法)标准方案不适用不适用
低温溶解度(0°C)3.2 M较低较低较低
限制性内切酶兼容性优于Tris最佳良好较高干扰
诊断试剂适用性适用适用适用适用
金属离子结合不结合Mg²⁺、Ca²⁺极低极低与Cu²⁺结合

选择建议

  • 磷酸钙介导稳定转染必须使用BES,Chen & Okayama方案指定缓冲液
  • 诊断试剂生产:BES是优质选择
  • 限制性内切酶反应(Tris干扰时)选择BES
  • 冷室实验(0-4°C缓冲液配制)首选BES,溶解度最高
  • 细胞培养(pH 7.2-7.4,常规):HEPES更常用
  • RNA电泳:选择MOPS

四、主要应用领域

4.1 磷酸钙介导真核细胞转染(核心应用Ⅰ)

BES最经典的应用是磷酸钙介导的真核细胞转染,这是分子生物学中将外源DNA导入真核细胞的标准方法之一。经典的Chen & Okayama转染方案(1987年,被引用超过10,000次)专门推荐使用BES缓冲生理盐水(BBS)进行高效稳定转染

技术原理

  • BES缓冲系统支持磷酸钙-DNA沉淀物的缓慢、可控形成
  • 相比之下,HEPES缓冲系统导致沉淀物快速形成,直接沉积在细胞上
  • 缓慢形成的沉淀物具有更高的转染效率,特别适用于稳定转化

标准BBS缓冲液配方(Chen & Okayama法):

组分浓度
BES钠盐50 mM
NaCl280 mM
Na₂HPO₄1.5 mM
pH(25°C)6.95-7.00

转染条件

  • 磷酸钙-DNA共沉淀在BBS中形成
  • 3% CO₂条件下孵育细胞(pH控制更精准)
  • 16-24小时后更换新鲜培养基

优势

  • 对环状质粒DNA的稳定转化特别高效
  • BES钠盐可直接溶解配制,无需调节pH,减少配制误差

4.2 诊断试剂制造(核心应用Ⅱ)

BES钠盐作为高质量生物缓冲剂,广泛用于体外诊断试剂的生产

应用场景

  • 生化诊断试剂盒缓冲组分
  • 免疫检测试剂盒
  • 酶联免疫吸附测定(ELISA)
  • 诊断检测制造

质量优势

  • 纯度≥99%,低重金属含量(≤5 ppm)
  • 低紫外吸收(290 nm ≤0.1),不干扰光学检测
  • 高水溶性(333.3 mg/mL),配制便捷
  • 批间稳定性好,符合诊断试剂生产要求

4.3 细胞培养基缓冲组分(核心应用Ⅲ)

BES钠盐可作为细胞培养基的辅助缓冲组分,适用于哺乳动物细胞培养。

应用特点

  • 在pH 6.8-7.4范围内提供稳定缓冲能力
  • 不螯合培养基中的Ca²⁺、Mg²⁺等关键金属离子
  • 低毒性,支持细胞正常生长和增殖
  • 适用于需要磷酸钙-DNA共沉淀的转染实验中的培养基缓冲

培养基补充方法:配制0.5-1 M BES钠盐母液,0.22 μm滤膜过滤除菌后,按需要添加至终浓度10-30 mM。

4.4 限制性内切酶反应(核心应用Ⅳ)

BES对限制性内切酶反应的干扰小于Tris缓冲液,是DNA操作实验的理想选择。

作用机制

  • BES分子中质子化叔胺的空间位阻效应
  • 对DNA负电荷的屏蔽作用弱于Tris
  • 酶与DNA的结合更有效,反应效率更高

干扰排序:Tris(干扰最大)> BES > HEPES(干扰最小)

应用场景

  • Tris干扰严重的DNA酶切反应
  • 需要高酶活性的限制性内切酶反应体系
  • 成本敏感的实验(BES成本低于HEPES时)

4.5 蛋白质纯化与生化研究

BES钠盐在蛋白质纯化和酶学研究中具有重要应用。

应用场景

  • 蛋白质纯化缓冲液(亲和层析、离子交换层析)
  • 酶活性测定(在pH 6.4-7.8范围内表现优异)
  • 电泳和色谱缓冲液
  • 蛋白质稳定性研究

应用优势

  • 两性离子特性,对蛋白-配体相互作用干扰小
  • 不螯合金属离子,不影响金属依赖性蛋白的结构和功能
  • 低紫外吸收,不干扰蛋白检测

五、实验方案

5.1 BES钠盐溶液配制

BES钠盐易溶于水(333.3 mg/mL),推荐使用去离子水配制。

1 M BES钠盐储存液配制(1 L)

步骤操作说明
1称取235.2 g BES钠盐粉末分子量235.23,终体积1 L
2加入800 mL去离子水室温溶解,溶液澄清
3搅拌至完全溶解无需调节pH(钠盐形式已中和)
4如需精确pH,用1 M HCl微调缓慢滴加,不断搅拌
5定容至1000 mL补充至终体积
60.22 μm滤膜过滤除菌如用于细胞培养

注意事项

  • BES钠盐在0°C时溶解度可达3.2 M,可配制高浓度储存液用于冷室实验
  • 配制高浓度溶液无需加热
  • BES钠盐溶液可在4°C稳定保存6个月

5.2 磷酸钙转染BES缓冲生理盐水配制

2× BBS缓冲液(pH 6.95,500 mL)

组分用量终浓度
BES钠盐5.88 g50 mM
NaCl8.18 g280 mM
Na₂HPO₄0.106 g1.5 mM
去离子水至500 mL

配制方法

  1. 称取BES钠盐、NaCl和Na₂HPO₄
  2. 加入400 mL去离子水,搅拌溶解
  3. 用1 M HCl或1 M NaOH微调pH至6.95(25°C条件下测量)
  4. 定容至500 mL
  5. 0.22 μm滤膜过滤除菌
  6. 分装后-20°C保存或4°C短期保存

转染操作流程(Chen & Okayama法):

  1. 转染前24小时,细胞铺板
  2. 混合DNA、CaCl₂和2× BBS缓冲液
  3. 室温孵育20分钟形成沉淀
  4. 将沉淀混合物滴加到细胞中
  5. 3% CO₂条件下孵育16-24小时
  6. 更换新鲜培养基,继续培养

5.3 限制性内切酶反应缓冲液

BES缓冲的限制性内切酶反应体系

组分终浓度说明
BES钠盐10-50 mM替代Tris-HCl
MgCl₂10 mM酶辅助因子
DTT1 mM还原剂
pH7.0-7.5根据酶选择

优势:BES对限制性内切酶的干扰小于Tris缓冲液,特别适用于Tris干扰严重的酶促反应。

5.4 工作浓度参考

应用场景推荐浓度备注
磷酸钙转染(BBS)50 mM BES钠盐pH 6.95,2× BBS
细胞培养基10-30 mM辅助缓冲,过滤除菌
诊断试剂10-100 mM根据具体方法优化
限制性内切酶反应10-50 mMTris替代品
蛋白质纯化10-50 mM根据蛋白稳定性优化
冷室储存液可达3.2 M(0°C)高浓度储备液

六、注意事项与安全信息

6.1 关键实验注意事项

磷酸钙转染要点

  • BES缓冲的转染方案特别适用于环状质粒DNA的稳定转化
  • pH调节至关重要,应在25°C条件下精确调至6.95-7.00
  • CO₂浓度应为3%(而非标准5%),以确保pH稳定性
  • 与HEPES缓冲的快速沉淀法相比,BES法的缓慢沉淀形成可获得更高稳定转染效率
  • BES钠盐预中和形式可直接溶解配制,减少pH调节误差

限制性内切酶兼容性

  • BES对限制性内切酶反应的干扰小于Tris缓冲液
  • 当Tris干扰严重影响酶切效率时,BES是优选替代品
  • 干扰排序:Tris > BES > HEPES

金属离子兼容性

  • BES不螯合Mg²⁺、Ca²⁺、Mn²⁺,适合含这些金属离子的体系
  • BES强烈结合Cu²⁺,可能影响BCA检测等涉及铜离子的反应

低温溶解度优势

  • BES在0°C时溶解度达3.2 M
  • 可配制高浓度储存液在4°C保存
  • 特别适合冷室或冰浴操作的实验流程

低紫外吸收

  • 10%水溶液在290 nm处吸光度≤0.1
  • 不干扰蛋白质和核酸的光度法检测
  • 适用于分光光度分析和光谱学研究

产品吸湿性

  • BES钠盐粉末具一定吸湿性
  • 建议在干燥环境中称量,使用后立即密封容器

6.2 储存条件

条件要求
粉末室温密封保存,阴凉干燥处
粉末有效期60个月(5年)
溶液(4°C)可稳定保存6个月
溶液(-20°C,密封)可保存1个月
高浓度储备液(≥1 M)-20°C分装保存,避免反复冻融

6.3 安全信息

项目信息
物理状态白色结晶粉末
GHS分类GHS07(警告)
危险声明H315(皮肤刺激)、H319(严重眼刺激)、H335(呼吸道刺激)
防范说明P261(避免吸入粉尘)、P305+P351+P338(如入眼,用水冲洗)
个人防护实验服、护目镜、手套、N95口罩
操作在通风良好处操作,避免吸入粉尘
储存室温密封,阴凉干燥
运输非危险品

BES钠盐通常被认为是安全、低毒的实验室试剂。常规浓度(≤30 mM)对大多数细胞系安全。

七、产品质量标准

湖南汇百益新材料有限公司提供的BES钠盐产品严格执行以下质量标准:

检测项目质量指标参考来源
外观白色结晶粉末
纯度(滴定,干基)≥99.0%
分子式C₆H₁₄NNaO₅S
分子量235.23 g/mol
有效缓冲范围pH 6.4-7.8
pKa(25°C,游离酸)7.1
溶解度333.3 mg/mL水,澄清无色
干燥失重≤1.0%
氯化物(Cl⁻)≤0.05%
硫酸根(SO₄²⁻)≤0.01%
铁(Fe)≤0.0005%
重金属(以Pb计)≤5 ppm
紫外吸收(290 nm,10%溶液)≤0.1

湖南汇百益通过优化合成与精制工艺,将产物纯度稳定控制在≥99%,产品符合分子生物学级质量标准。公司已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证,确保批次间稳定性。

包装规格:实验室规格:25g、100g、500g、1kg;工业规格:5kg、25kg;可按客户需求定制包装。

八、供应商介绍

湖南汇百益新材料有限公司成立于2014年,位于湖南省怀化市洪江区工业园,拥有50,000平方米生产基地。公司是一家专注于生物基础试剂研发、生产与销售的国家高新技术企业湖南省专精特新企业,拥有独立研发试验中心和生产基地,并已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证。

公司先后获得“怀化市工程技术研究中心”“湖南师范大学化学生物学功能材料产学研基地”“创新创业大赛湖南省优秀企业”“湖南新材料企业”等一系列荣誉称号。

依托强大的生产平台与技术实力,公司可灵活提供OEM代工服务与个性化定制方案,如提纯、精制加工等,以满足客户多元化需求。旗下品牌“汇百试剂”,通过提供性能稳定可靠、品质媲美进口、成本更具优势的国产试剂,为生物医药、体外诊断、生物工程及科研机构等领域的客户提供基础材料解决方案。

公司研发、生产、销售各种高纯生化试剂,包括:

  • 糖苷系列:IPTG、ONPG、PNPG、DTT、x-gal、x-gluc等
  • 生物缓冲剂:Tricine、HEPES、MOPS、BES钠盐、PIPES、MES、CAPS、TAPS、BIS-TRIS、BICINE、TES、EPPS、BES游离酸等
  • 表面活性剂与去污剂:SDS、SURFACTIN、EMPIGEN BB、CHAPS、CHAPSO、SB-8至SB-18系列等
  • 检测试剂:泛影酸钠、G-418硫酸盐、DTE、TCEP-HCl、PMSF、PNPP、ABTS、TMB、TMB-PS、鲁米诺、异鲁米诺、ABEI、D-荧光素钾盐、NAD⁺、NADH、NADP⁺、NADPH等
  • 高纯生化试剂:DEPC、异硫氰酸胍、盐酸胍、PMSF、MTT、BSA、WST-8等

湖南汇百益提供的BES钠盐产品具有以下突出优势:

  • 高纯度:纯度≥99%(滴定法),批次稳定性好
  • 即用型:钠盐形式,直接溶解即可使用,无需调节pH
  • 磷酸钙转染标准试剂:Chen & Okayama转染方案的首选缓冲液
  • 诊断试剂适用:符合诊断试剂生产质量要求
  • 低温高溶解度:0°C时3.2 M溶解度,冷室实验理想选择
  • 限制性内切酶兼容:干扰小于Tris缓冲液
  • 金属离子兼容:不螯合Mg²⁺、Ca²⁺、Mn²⁺
  • 低紫外吸收:290 nm吸光度≤0.1,不干扰光学检测
  • 现货供应:常备库存,支持快速发货,可定制包装
  • 技术支持:专业技术团队提供全程使用指导与问题解答
  • 源头工厂:自产自销,具备价格优势和供应稳定性

九、采购与使用建议

在采购BES钠盐(CAS 66992-27-6)时,建议重点关注以下几点:

纯度要求:对于磷酸钙转染、诊断试剂生产和IVD应用,应选择纯度≥99%(滴定法)的高品质产品。关注重金属含量(≤5 ppm)和紫外吸收指标(290 nm ≤0.1)。

产品形态选择

  • BES钠盐(本品,CAS 66992-27-6):预先中和形式,直接溶解即可使用,是常规缓冲液配制的首选
  • BES游离酸(CAS 10191-18-1):需用NaOH调pH,适合需要精确控制离子强度的实验

应用方向选择

  • 磷酸钙介导稳定转染首选BES,Chen & Okayama方案的核心缓冲液
  • 诊断试剂生产:BES是优质选择,符合诊断试剂制造要求
  • 限制性内切酶反应:当Tris干扰时选择BES替代
  • 冷室缓冲液储存:BES在0°C时溶解度3.2 M,适合4°C储存的高浓度母液
  • 细胞培养基:适用于需要磷酸钙-DNA共沉淀的转染实验
  • 蛋白质纯化:根据蛋白稳定性优化浓度

缓冲范围确认:BES的有效缓冲范围为pH 6.4-7.8,pKa=7.1(25°C)。如实验pH在此范围内且需要磷酸钙转染,BES是唯一选择

储存条件:粉末室温密封保存,阴凉干燥处。BES钠盐溶液可在4°C稳定保存6个月。

安全操作:操作时佩戴实验服、护目镜、手套及N95口罩,避免吸入粉尘。本产品仅限科研和工业生产使用,不用于临床诊断或治疗。

十、联系我们

如需获取BES钠盐(CAS 66992-27-6)的产品报价、样品或技术支持,请联系湖南汇百益新材料有限公司:

  • 产品咨询:13319523173
  • 订购邮箱:ivy@hnhbsj.com
  • 官方网站https://www.hbsjxcl.com/
  • 公司地址:湖南省怀化市洪江区工业园8号

声明:本产品仅供科研和工业生产使用,不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书,并遵守实验室安全操作规范。


作者: 汇百益-百博士
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N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸 钠盐 (BES钠盐) — Good's缓冲液即用型试剂,磷酸钙转染与诊断试剂核心原料
一、产品基本信息项目内容产品名称N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸 钠盐英文名称BES Sodium Salt (N,N-Bis(2-hydroxyeth
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