4-(2-羟乙基)-1-哌嗪丙磺酸 (EPPS) — Good's缓冲液生理pH专家，HEPES理想替代品与高效蛋白转膜核心试剂

一、产品基本信息

二、产品简介与核心优势

EPPS（4-(2-羟乙基)-1-哌嗪丙磺酸），又名HEPPS，是Good's缓冲液家族中针对生理pH范围的重要成员，由Good等人于20世纪60年代开发并推广应用。作为一种两性离子磺酸类缓冲剂，EPPS在pH 7.3-8.7范围内具有优异的缓冲能力，其pKa为8.0（25°C），完美覆盖了大多数细胞培养、酶学研究和分子生物学实验的pH需求 。

EPPS的结构与HEPES相似（哌嗪环连接丙磺酸基团而非乙磺酸），但pKa略高（8.0 vs 7.55），使其在pH 7.8-8.2范围内缓冲能力更优 。该产品已通过BioPerformance认证，适用于哺乳动物细胞培养，经内毒素和总需氧微生物计数检测，确保细胞实验的可靠性 。

EPPS的核心优势在于其卓越的生物相容性。它继承了Good's缓冲液的七大核心特性：高水溶性、低细胞膜通透性、pKa稳定性、低金属螯合能力（不与Mg²⁺、Ca²⁺等常见金属离子形成络合物）、高化学稳定性、低紫外吸收（A290 ≤0.1，33%溶液），以及高化学惰性 。

在Western Blot蛋白转膜领域，EPPS具有独特的重要价值。2013年发表于《Analytical Biochemistry》的研究首次证实，基于HEPES和EPPS的缓冲液是快速半干式转移（12分钟内）最有效的缓冲体系，其转移效率优于传统Towbin缓冲液 。这一发现解决了传统转移方法耗时、转移效率低的问题，使EPPS成为蛋白免疫检测的首选缓冲液之一。

EPPS也已用于验证pH变化对后中肠内容物和前中肠组织匀浆蛋白水解活性的影响，作为凝胶内酶解消化的消化缓冲液，以及用于脑源性细胞外囊泡蛋白的16-plex等压串联质谱标签肽标记 。

湖南汇百益提供纯度≥99%的EPPS产品，严格符合分子生物学级质量标准，不含DNase、RNase和蛋白酶，现货供应，可按需定制包装。

三、EPPS的核心特性

3.1 Good's缓冲液的典范

EPPS属于Good's缓冲液家族，该家族缓冲剂专门设计用于生物学研究。Good's缓冲剂的共同特点包括 ：

• 高水溶性：在生理pH范围内完全溶解
  
• 低细胞膜通透性：不易穿透生物膜，对细胞过程干扰小
  
• pKa稳定性：位于中性pH范围，受温度影响小
  
• 低金属螯合能力：不与Mg²⁺、Ca²⁺等金属离子形成络合物
  
• 高化学稳定性：不易与反应物发生副反应
  
• 低紫外吸收：在紫外和可见光区吸光度极低
  

EPPS完全符合这些标准，其pKa为8.0（25°C），有效缓冲范围为pH 7.3-8.7 。

3.2 缓冲特性总结

3.3 EPPS vs. HEPES：对比分析

EPPS与HEPES结构相似，但丙磺酸基团（3碳链）替代了乙磺酸基团（2碳链）。这一结构差异带来了几个关键优势：

选择建议 ：

• Western Blot快速半干转膜：EPPS和HEPES均极佳，EPPS是优质选择
  
• 磷酸化反应：EPPS特别适用，尤其当Tricine不能使用时 
  
• 细胞培养（pH 7.4-8.0）：两者均可，EPPS在较高pH缓冲能力更强
  
• Folin蛋白检测：EPPS可用，不适用于biuret检测 
  

四、主要应用领域

4.1 Western Blot快速半干转膜（核心应用Ⅰ）

EPPS在Western Blot快速半干转膜领域具有重要的应用价值，是该领域的新兴标准缓冲液 。

研究数据 ：

• 发表期刊：Analytical Biochemistry（2013年）
  
• 实验条件：12分钟内完成半干式转移
  
• 关键发现：基于HEPES和HEPPS/EPPS的缓冲液是快速半干式转移最有效的缓冲体系
  
• 转移效率：显著优于传统Towbin转移缓冲液
  

应用优势：

• 转移时间从传统1-2小时缩短至12分钟
  
• 转移效率高，蛋白质损失少
  
• 适用于多种蛋白类型
  
• 与下游免疫检测兼容性良好
  

标准转膜缓冲液配方：

适用蛋白类型：适用于常规蛋白及碱性蛋白的转移。

4.2 细胞培养基缓冲组分（核心应用Ⅱ）

EPPS已被验证适用于哺乳动物细胞培养，是细胞培养基的优质缓冲组分 。

质量保证 ：

• BioPerformance认证：高等级质量认证（400级）
  
• 内毒素检测：经验证符合规格
  
• 总需氧微生物计数：经验证符合规格
  
• 细胞培养验证：适用于哺乳动物细胞培养技术
  

应用特点：

• pKa=8.0，在pH 7.8-8.2范围内缓冲能力最佳 
  
• 对细胞无毒，支持细胞正常生长和增殖
  
• 在需要金属阳离子的培养基中优势明显
  
• 化学稳定性高，不与培养基组分反应
  

培养基补充方法：配制0.5-1 M EPPS母液，0.22 μm滤膜过滤除菌后，按需要添加至终浓度10-30 mM。

4.3 蛋白质组学与质谱分析（核心应用Ⅲ）

EPPS在蛋白质组学和质谱分析中具有重要应用 。

应用场景：

• 凝胶内酶解：作为消化缓冲液，用于制备凝胶内酶解样品 
  
• TMT肽段标记：用于脑源性细胞外囊泡蛋白的16-plex等压串联质谱标签肽标记 
  
• 质谱兼容性：低紫外吸收（A290 ≤0.1）不干扰质谱检测 
  

应用优势：

• 不含干扰质谱检测的杂质
  
• 与多种质谱标签兼容
  
• 批次稳定性好，保证实验结果可重复性
  

4.4 酶活性测定与生化研究

EPPS常用于酶活性测定和酶动力学研究。

典型应用 ：

• 验证pH变化对后中肠内容物和前中肠组织匀浆蛋白水解活性的影响
  
• 磷酸化反应缓冲液（尤其当Tricine不能使用时）
  

应用优势：

• 在pH 7.3-8.7范围内提供稳定缓冲环境
  
• 不螯合金属离子，不影响金属依赖性酶活性
  
• 对酶活性影响小
  

4.5 诊断试剂生产

EPPS作为高质量生物缓冲剂，可用于体外诊断试剂的生产 。

应用场景：

• 生化诊断试剂盒缓冲组分
  
• 免疫检测试剂盒
  
• 诊断测定制造
  

质量优势 ：

• 符合诊断试剂生产质量要求
  
• 低内毒素、低重金属
  
• 批间稳定性好
  

4.6 蛋白质纯化与分子生物学

EPPS在蛋白质纯化和分子生物学技术中具有广泛应用。

应用场景 ：

• 核酸纯化缓冲液
  
• PCR反应缓冲体系
  
• SDS-PAGE蛋白分析缓冲液
  
• 蛋白质纯化层析缓冲液
  

五、实验方案

5.1 EPPS溶液配制

EPPS易溶于水，推荐使用去离子水配制 。

0.5 M EPPS储存液配制（1 L，pH 8.0）：

注意事项 ：

• 溶解度：25 g/50 mL水，配制高浓度溶液无需加热
  
• 调节pH时需缓慢滴加NaOH，避免局部过碱
  
• EPPS溶液可在4°C稳定保存6个月
  
• 避免高温长时间储存
  

5.2 Western Blot快速半干转膜缓冲液配制

基于Analytical Biochemistry研究的最佳配方 ：

EPPS转膜缓冲液标准配方（pH 8.0-8.5，1 L）：

配制方法：

1. 称取EPPS粉末，加800 mL去离子水溶解
   
2. 加入甲醇，混匀
   
3. 用10 M NaOH调节pH至8.0-8.5
   
4. 定容至1 L
   
5. 预冷至4°C后使用
   

转膜条件建议 ：

• 转移时间：12分钟（快速半干式）
  
• 转移温度：4°C（冰浴）或室温
  
• 适用膜：硝酸纤维素膜（NC膜）或PVDF膜
  
• 电流/电压：根据转移仪器优化
  

5.3 细胞培养基EPPS缓冲液配制

BioPerformance级EPPS缓冲细胞培养基（pH 7.8-8.2） ：

补充方法：配制1 M EPPS母液（用NaOH调至目标pH），过滤除菌后，按培养基体积的1/100-3/100比例添加。

质量验证：BioPerformance级EPPS经验证内毒素和总需氧微生物计数合格，适用于哺乳动物细胞培养 。

5.4 工作浓度参考

六、EPPS vs. 其他Good's缓冲液：对比分析

选择建议 ：

• Western Blot快速半干转膜（12分钟）：首选EPPS，与HEPES并列最佳 
  
• 磷酸化反应缓冲液：选择EPPS，尤其当Tricine不能使用时 
  
• 细胞培养（pH 7.8-8.0）：首选EPPS，缓冲能力优于HEPES
  
• Folin蛋白检测：EPPS可用 
  
• biuret蛋白检测：EPPS不适用 
  

七、注意事项与安全信息

7.1 关键实验注意事项

Western Blot快速转膜要点 ：

• EPPS基于缓冲液可在12分钟内完成半干式蛋白转移
  
• 转移效率优于传统Towbin缓冲液
  
• 建议使用预冷的缓冲液进行转膜
  
• 转移时间需根据蛋白分子量和凝胶厚度优化
  

pH调节要点：

• EPPS水溶液呈酸性，必须用NaOH调节至目标pH
  
• 25°C调节的pH在4°C时约升高0.2-0.3单位
  
• 缓冲液配制后应确认pH（25°C条件下测量）
  

金属离子兼容性 ：

• EPPS对Mg²⁺、Ca²⁺等常见二价金属离子的结合能力极低
  
• 不形成不溶性金属络合物
  
• 适合金属离子依赖性酶的研究和含金属离子的培养基
  

低紫外吸收 ：

• 33% w/w溶液在290 nm处吸光度≤0.1
  
• 不干扰蛋白质和核酸的光度法检测
  
• 适用于质谱分析等光敏感检测
  

检测方法兼容性 ：

• EPPS可用于Folin蛋白检测
  
• EPPS不适用于biuret蛋白检测
  
• 进行蛋白定量时需根据方法选择合适的缓冲体系
  

细胞培养注意事项 ：

• BioPerformance级EPPS已通过内毒素和微生物检测
  
• 适用于哺乳动物细胞培养
  
• 使用前需过滤除菌
  

产品吸湿性：

• EPPS粉末具一定吸湿性
  
• 建议在干燥环境中称量，使用后立即密封容器
  

诊断试剂应用 ：

• EPPS可用于诊断测定制造
  
• 低内毒素、低重金属含量符合诊断试剂要求
  

7.2 储存条件

7.3 安全信息

EPPS通常被认为是安全、无毒的实验室试剂。BioPerformance级产品已通过严格的质量检测，适用于细胞培养和诊断试剂生产 。

八、产品质量标准

湖南汇百益新材料有限公司提供的EPPS产品严格执行以下质量标准：

湖南汇百益通过优化合成与精制工艺，将产物纯度稳定控制在≥99%，产品符合分子生物学级质量标准。公司已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证，确保批次间稳定性。

包装规格：实验室规格：25g、100g、500g、1kg；工业规格：5kg、25kg；可按客户需求定制包装。

九、供应商介绍

湖南汇百益新材料有限公司成立于2014年，位于湖南省怀化市洪江区工业园，拥有50,000平方米生产基地。公司是一家专注于生物基础试剂研发、生产与销售的国家高新技术企业、湖南省专精特新企业，拥有独立研发试验中心和生产基地，并已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证。

公司先后获得“怀化市工程技术研究中心”“湖南师范大学化学生物学功能材料产学研基地”“创新创业大赛湖南省优秀企业”“湖南新材料企业”等一系列荣誉称号。

依托强大的生产平台与技术实力，公司可灵活提供OEM代工服务与个性化定制方案，如提纯、精制加工等，以满足客户多元化需求。旗下品牌“汇百试剂”，通过提供性能稳定可靠、品质媲美进口、成本更具优势的国产试剂，为生物医药、体外诊断、生物工程及科研机构等领域的客户提供基础材料解决方案。

公司研发、生产、销售各种高纯生化试剂，包括：

• 糖苷系列：IPTG、ONPG、PNPG、DTT、x-gal、x-gluc等
  
• 生物缓冲剂：Tricine、HEPES、MOPS、EPPS、PIPES、MES、CAPS、TAPS、BES、Tris、Tris-HCl、BIS-TRIS、BICINE、TES钠盐等
  
• 表面活性剂与去污剂：SDS、SURFACTIN、EMPIGEN BB、CHAPS、CHAPSO、SB-8至SB-18系列等
  
• 检测试剂：泛影酸钠、G-418硫酸盐、DTE、TCEP-HCl、PMSF、PNPP、ABTS、TMB、TMB-PS、鲁米诺、异鲁米诺、ABEI、D-荧光素钾盐、NAD⁺、NADH、NADP⁺、NADPH等
  
• 高纯生化试剂：DEPC、异硫氰酸胍、盐酸胍、PMSF、MTT、BSA、WST-8等
  

湖南汇百益提供的EPPS产品具有以下突出优势：

• 高纯度：纯度≥99%，批次稳定性好，符合分子生物学级质量标准
  
• Western Blot快速转膜标准试剂：12分钟完成半干式转移，效率最优 
  
• 细胞培养级品质：BioPerformance认证，适用于哺乳动物细胞 
  
• 生理pH缓冲专家：有效缓冲范围pH 7.3-8.7，pKa=8.0，覆盖碱性生理pH需求 
  
• 磷酸化反应适用：特别适合磷酸化研究，Tricine替代选择 
  
• 金属离子兼容：不结合Ca²⁺、Mg²⁺等金属离子 
  
• 蛋白质组学验证：已用于凝胶内酶解和TMT肽段标记 
  
• 诊断试剂适用：可用于诊断测定制造 
  
• 现货供应：常备库存，支持快速发货，可定制包装
  
• 技术支持：专业技术团队提供全程使用指导与问题解答
  
• 源头工厂：自产自销，具备价格优势和供应稳定性
  

十、采购与使用建议

在采购EPPS（CAS 16052-06-5）时，建议重点关注以下几点：

纯度要求：对于Western Blot转膜、细胞培养和IVD诊断试剂生产，应选择纯度≥99%的高品质产品。对于哺乳动物细胞培养，建议选择BioPerformance级（Sigma E0276等效级别）产品，经内毒素和微生物检测验证 。

应用方向选择：

• Western Blot快速半干转膜（12分钟）：首选EPPS，与HEPES并列最佳 
  
• 细胞培养基缓冲（pH 7.8-8.0）：首选EPPS，BioPerformance级经验证适用于哺乳动物细胞 
  
• 磷酸化反应缓冲液：选择EPPS，尤其当Tricine不能使用时 
  
• 蛋白质组学样品制备：用于凝胶内酶解消化缓冲液 
  
• 质谱分析TMT肽标记：用于脑源性细胞外囊泡蛋白的16-plex等压TMT肽标记 
  
• IVD诊断试剂生产：可用于诊断测定制造 
  
• Folin蛋白检测：EPPS可用 
  
• biuret蛋白检测：EPPS不适用 
  

产品形态选择：

• EPPS游离酸（本品，CAS 16052-06-5）：需用NaOH调pH，灵活性最高
  
• HEPPS钠盐：预先中和形式，直接溶解即可使用
  

与HEPES的选择 ：

• 需要较高pH缓冲（pH 8.0-8.5）：首选EPPS
  
• Western Blot快速半干转膜：EPPS和HEPES均极佳
  
• 磷酸化反应：EPPS特别适用
  

缓冲范围确认：EPPS的有效缓冲范围为pH 7.3-8.7，pKa=8.0（25°C）。如实验pH在此范围内，EPPS是HEPES的优质替代品 。

储存条件：粉末室温密封保存，阴凉干燥处。EPPS溶液可在4°C稳定保存6个月。

安全操作：操作时佩戴实验服、护目镜及手套，避免吸入粉尘。本产品仅限科研和工业生产使用，不用于临床诊断或治疗。

十一、联系我们

如需获取EPPS（CAS 16052-06-5）的产品报价、样品或技术支持，请联系湖南汇百益新材料有限公司：

• 产品咨询：13319523173
  
• 订购邮箱：ivy@hnhbsj.com
  
• 官方网站：https://www.hbsjxcl.com/
  
• 公司地址：湖南省怀化市洪江区工业园8号
  

声明：本产品仅供科研和工业生产使用，不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书，并遵守实验室安全操作规范。