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N,N-双(2-羟乙基)甘氨酸 (BICINE) — Good's缓冲液碱性范围核心成员,细胞培养与蛋白纯化优质选择

2026-06-08 14:04:38

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一、产品基本信息项目内容产品名称N,N-双(2-羟乙基)甘氨酸英文名称BICINE (N,N-Bis(2-hydroxyethyl)glycine)中文别名二(

一、产品基本信息

项目内容
产品名称N,N-双(2-羟乙基)甘氨酸
英文名称BICINE (N,N-Bis(2-hydroxyethyl)glycine)
中文别名二(2-羟乙基)甘氨酸、BICINE生物缓冲剂
CAS号150-25-4
分子式C₆H₁₃NO₄
分子量163.17 g/mol 
MDL号MFCD00004290
外观白色结晶粉末
纯度≥99%(湖南汇百益)
有效缓冲范围pH 7.6-9.0 
pKa(20°C)8.35 
pKa(25°C)8.3 
1%水溶液pH4.0-5.0 
溶解度(水)易溶(约200 mg/mL)
熔点190-192°C 
储存条件室温密封保存,阴凉干燥处
用途细胞培养缓冲组分、蛋白质纯化、酶活性测定、蛋白质结晶、离子交换色谱、SDS-PAGE、IVD诊断试剂

二、产品简介与核心优势

BICINE(N,N-双(2-羟乙基)甘氨酸)是Good's缓冲液家族中针对碱性pH范围的重要成员,由Good等人在20世纪60年代系统研究并推广应用。作为一种两性离子氨基缓冲剂,BICINE在pH 7.6-9.0范围内具有优异的缓冲能力,其pKa为8.3-8.35(20-25°C),覆盖了多种酶促反应和细胞生理过程的最佳pH条件。

BICINE的核心优势在于其卓越的缓冲能力和生物相容性。与传统的Tris缓冲液相比,BICINE具有Good's缓冲液的七大核心特性:高水溶性、低细胞膜通透性、低金属螯合能力、高化学稳定性、pKa温度系数小、低紫外吸收,以及对酶活性无明显抑制。这些特性使其特别适合需要在碱性条件下进行的酶促反应和蛋白研究。

BICINE最早于20世纪20年代被合成,后经Good等筛选成为Good's缓冲液家族的重要成员,为生化研究提供pH 6.15-8.35范围内的缓冲选择。如今,BICINE已被广泛应用于蛋白质纯化、离子交换层析、SDS-PAGE电泳、蛋白质结晶、酶活性测定细胞培养等领域。

研究表明,在尿酸酶碱性酶质体制备中,使用BICINE缓冲液可显著提高酶的热稳定性、耐酸碱稳定性和抗蛋白酶解稳定性。BICINE也被用于心脏灌流实验中维持磷酸果糖激酶的活性状态。在低温实验中,BICINE特别适合在4°C条件下维持稳定的pH环境。

湖南汇百益提供纯度≥99%的BICINE产品,严格符合分子生物学级质量标准,不含DNase、RNase和蛋白酶,现货供应,可按需定制包装。

三、BICINE的核心特性

3.1 Good's缓冲液的典范

BICINE属于Good's缓冲液家族,该家族缓冲剂专门设计用于生物学研究。Good's缓冲剂的共同特点包括:

  • 高水溶性:在水和其他极性溶剂中具有良好的溶解度
  • 低细胞膜通透性:不易穿透生物膜,对细胞过程干扰小
  • pKa稳定性:pKa受温度影响相对较小
  • 低金属螯合能力:与常见金属离子弱相互作用
  • 高化学稳定性:不易与反应物发生副反应
  • 低紫外吸收:在紫外和可见光区吸收极低

BICINE完全符合这些标准,其有效缓冲范围为pH 7.6-9.0,覆盖了多种碱性酶学和细胞培养的pH需求。

3.2 缓冲特性总结

特性数值/描述
有效缓冲范围pH 7.6-9.0 
pKa(20°C)8.35 
pKa(25°C)8.3 
性质两性离子
分子量163.17 g/mol 
溶解度易溶于水(约200 mg/mL)
熔点190-192°C 
1%水溶液pH4.0-5.0 
紫外吸收(0.1 M,260 nm)≤0.08 
紫外吸收(0.1 M,280 nm)≤0.05 
金属离子结合极低

3.3 BICINE vs. 其他碱性缓冲液:对比分析

对比项BICINE(本品)TrisHEPESTAPS
pKa(25°C)8.38.17.58.4
有效缓冲范围pH 7.6-9.0pH 7.0-9.0pH 6.8-8.2pH 7.7-9.1
温度依赖性显著(-0.03/°C)
金属离子结合极低与Cu²⁺结合极低极低
细胞毒性
紫外吸收极低极低极低极低
主要应用细胞培养、蛋白纯化、电泳通用缓冲、电泳细胞培养碱性酶学

选择建议

  • 细胞培养(pH 7.6-8.5)首选BICINE,对细胞无毒,维持pH稳定
  • 蛋白质纯化与离子交换层析:选择BICINE,不螯合金属离子
  • 碱性酶学研究(pH 8.0-9.0):BICINE是优质选择
  • 蛋白质结晶:BICINE是常用结晶缓冲液
  • 低温实验:BICINE特别适合4°C条件下的缓冲

四、主要应用领域

4.1 细胞培养与组织保存(核心应用Ⅰ)

BICINE是细胞培养基和组织保存液的优质缓冲组分,特别适合需要在碱性条件下维持pH稳定的细胞实验。

应用特点

  • 低细胞毒性:对培养细胞无毒,支持细胞正常生长
  • 低温适用性:特别适用于低温(4°C)条件下的实验
  • 组织保存:用于心脏灌流等组织保存液

研究案例:在猪心脏低温缺氧灌流实验中,使用BICINE缓冲液可维持磷酸果糖激酶(PFK)的活性状态,避免酶快速失活,有效保护了能量代谢相关酶的完整性。

培养基补充方法:BICINE可配制成0.5 M储存液,过滤除菌后按需要添加至终浓度20-50 mM。

4.2 蛋白质纯化与离子交换层析(核心应用Ⅱ)

BICINE在蛋白质纯化离子交换层析中具有重要应用。

应用场景

  • 离子交换层析:作为洗脱缓冲液组分,维持pH稳定
  • 蛋白纯化缓冲液:用于蛋白提取、纯化和储存
  • 蛋白质结晶:BICINE是蛋白质结晶的常用缓冲液

应用优势

  • 不螯合金属离子,不影响金属依赖性蛋白的结构和功能
  • 低紫外吸收,不干扰蛋白检测
  • 在pH 7.6-9.0范围内提供稳定缓冲环境

4.3 酶活性测定与稳定性研究(核心应用Ⅲ)

BICINE在酶活性测定酶稳定性研究中具有广泛应用。

典型酶类

  • 尿酸酶(Uricase)
  • DNA聚合酶
  • 限制性内切酶
  • 在碱性pH条件下有活性的各种酶

关键研究:在尿酸酶碱性酶质体制备中,使用BICINE缓冲液可显著提高酶的热稳定性、耐酸碱稳定性和抗蛋白酶解稳定性。研究证实,BICINE为酶促反应提供了有利的微环境。

4.4 SDS-PAGE与电泳应用(核心应用Ⅳ)

BICINE可作为SDS-PAGE电泳的缓冲液组分

应用场景

  • 蛋白质电泳的电极缓冲液
  • 凝胶制备缓冲液

技术优势

  • 电泳过程中维持稳定pH
  • 对蛋白迁移影响小
  • 在碱性条件下表现优异

4.5 IVD诊断试剂原料

BICINE作为高质量生物缓冲剂,可用于体外诊断试剂的生产

应用场景

  • 生化诊断试剂盒缓冲组分
  • 免疫检测试剂盒
  • 碱性磷酸酶检测体系
  • 酶联免疫吸附测定(ELISA)

4.6 核酸与蛋白质结晶

BICINE广泛用于核酸和蛋白质的结晶研究

应用特点

  • 提供稳定的pH环境
  • 不干扰分子间的相互作用
  • 适用于结晶条件筛选

五、实验方案

5.1 BICINE溶液配制

BICINE易溶于水,推荐使用去离子水配制。

0.5 M BICINE储存液配制(1 L,pH 8.0)

步骤操作说明
1称取81.6 g BICINE粉末分子量163.17,终体积1 L
2加入800 mL去离子水室温溶解,溶液澄清
3搅拌至完全溶解BICINE水溶液呈酸性(1%溶液pH 4.0-5.0)
4用1 M NaOH调节pH至8.0缓慢滴加,不断搅拌
5定容至1000 mL补充至终体积
60.22 μm滤膜过滤除菌如用于细胞培养

注意事项

  • BICINE配制成0.5 M母液后,可于4°C稳定存放
  • 使用前可根据实验需要稀释
  • BICINE溶液可高压灭菌

5.2 细胞培养基缓冲液配制

BICINE缓冲细胞培养基(pH 8.0-8.4)

组分终浓度说明
BICINE20-50 mM主要缓冲成分
其他培养基组分按标准配方
pH7.6-9.0根据细胞需求优化

补充方法:取无菌0.5 M BICINE母液,按培养基体积的1/10-1/25比例添加,混匀后调节pH即可使用。

5.3 蛋白质纯化缓冲液配制

BICINE蛋白纯化缓冲液(pH 8.0-8.5)

组分终浓度用途
BICINE20-50 mM主缓冲成分
NaCl0-500 mM离子强度调节
可选添加剂(如EDTA、DTT)按需根据蛋白特性

配制方法:先配制BICINE母液,用NaOH调至目标pH,再加入盐和其他添加剂,最后用水定容。

5.4 工作浓度参考

应用场景推荐浓度备注
细胞培养基10-50 mM特别适合低温实验
蛋白质纯化10-50 mM根据蛋白稳定性优化
离子交换层析20-50 mM洗脱缓冲液
酶活性测定20-100 mM根据酶最适pH优化
SDS-PAGE10-50 mM电泳缓冲液
蛋白质结晶10-100 mM根据结晶条件筛选
IVD试剂盒10-100 mM根据具体方法优化
尿酸酶研究与Tris、HEPES比较BICINE效果最佳

六、注意事项与安全信息

6.1 关键实验注意事项

pH调节要点

  • BICINE水溶液呈酸性(1%溶液pH 4.0-5.0)
  • 必须用NaOH调节至目标pH后才具有缓冲能力
  • 配制高浓度储存液时,可边加NaOH边搅拌

金属离子兼容性

  • BICINE与常见金属离子结合能力极低
  • 不螯合Ca²⁺、Mg²⁺等金属离子
  • 适合金属离子依赖性酶的研究

低紫外吸收

  • 高品质BICINE在260 nm和280 nm处吸收极低
  • 不干扰蛋白质和核酸的光度法检测

低温适用性

  • BICINE特别适合4°C条件下的实验
  • pKa随温度变化较小,低温下仍维持良好缓冲能力

产品吸湿性

  • BICINE粉末具一定吸湿性
  • 建议在干燥环境中称量,使用后立即密封容器

6.2 储存条件

条件要求
粉末室温密封保存,阴凉干燥处
溶液4°C保存,可稳定保存6个月
有效期粉末在干燥条件下可稳定保存2-3年

6.3 安全信息

项目信息
物理状态白色结晶粉末
GHS分类非危险物质或混合物
个人防护实验服、护目镜、手套
操作常规实验操作,避免吸入粉尘
储存室温密封,阴凉干燥

BICINE通常被认为是安全、无毒的实验室试剂。为了您的安全和健康,建议穿实验服并戴一次性手套操作。

七、产品质量标准

湖南汇百益新材料有限公司提供的BICINE产品严格执行以下质量标准:

检测项目质量指标参考标准
外观白色结晶粉末
纯度(滴定)≥99.0%
分子式C₆H₁₃NO₄
分子量163.17
有效缓冲范围pH 7.6-9.0
pKa(20°C)8.35
pKa(25°C)8.3
1%水溶液pH4.0-5.0
水分≤1.0%
重金属(以Pb计)≤0.0005%
紫外吸收(260 nm,0.1 M)≤0.08
紫外吸收(280 nm,0.1 M)≤0.05
级别分子生物学级

湖南汇百益通过优化合成与精制工艺,将产物纯度稳定控制在≥99%,产品符合分子生物学级质量标准。公司已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证,确保批次间稳定性。

包装规格:实验室规格:25g、100g、500g、1kg;工业规格:5kg、25kg;可按客户需求定制包装。

八、BICINE vs. 其他Good's缓冲液:对比分析

对比项BICINE(本品)TrisHEPESTAPSCHES
pKa(25°C)8.38.17.58.49.3
有效缓冲范围pH 7.6-9.0pH 7.0-9.0pH 6.8-8.2pH 7.7-9.1pH 8.6-10.0
温度依赖性显著
金属离子结合极低与Cu²⁺结合极低极低极低
细胞毒性
主要应用细胞培养、蛋白纯化、电泳通用缓冲细胞培养碱性酶学极端碱性
低温适用性优异一般一般一般一般

选择建议

  • 细胞培养(pH 7.6-8.5)首选BICINE,特别适合低温实验
  • 蛋白质纯化与离子交换层析:BICINE是优质选择
  • 碱性酶学研究(pH 8.0-9.0):BICINE和TAPS均可,BICINE更经济
  • 蛋白质结晶:BICINE是常用结晶缓冲液
  • 需要更高pH(>9.0):选择CHES

九、供应商介绍

湖南汇百益新材料有限公司成立于2014年,位于湖南省怀化市洪江区工业园,拥有50,000平方米生产基地。公司是一家专注于生物基础试剂研发、生产与销售的国家高新技术企业湖南省专精特新企业,拥有独立研发试验中心和生产基地,并已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证。

公司先后获得“怀化市工程技术研究中心”“湖南师范大学化学生物学功能材料产学研基地”“创新创业大赛湖南省优秀企业”“湖南新材料企业”等一系列荣誉称号。

依托强大的生产平台与技术实力,公司可灵活提供OEM代工服务与个性化定制方案,如提纯、精制加工等,以满足客户多元化需求。旗下品牌“汇百试剂”,通过提供性能稳定可靠、品质媲美进口、成本更具优势的国产试剂,为生物医药、体外诊断、生物工程及科研机构等领域的客户提供基础材料解决方案。

公司研发、生产、销售各种高纯生化试剂,包括:

  • 糖苷系列:IPTG、ONPG、PNPG、DTT、x-gal、x-gluc等
  • 生物缓冲剂:Tricine、HEPES、MOPS、BICINE、PIPES、MES、CAPS、TAPS、BES、Tris、Tris-HCl、BIS-TRIS等
  • 表面活性剂与去污剂:SDS、SURFACTIN、EMPIGEN BB、CHAPS、CHAPSO、SB-8至SB-18系列等
  • 检测试剂:泛影酸钠、G-418硫酸盐、DTE、TCEP-HCl、PMSF、PNPP、ABTS、TMB、TMB-PS、鲁米诺、异鲁米诺、ABEI、D-荧光素钾盐、NAD⁺、NADH、NADP⁺、NADPH等
  • 高纯生化试剂:DEPC、异硫氰酸胍、盐酸胍、PMSF、MTT、BSA、WST-8等

湖南汇百益提供的BICINE产品具有以下突出优势:

  • 高纯度:纯度≥99%,批次稳定性好,符合分子生物学级质量标准
  • Good's缓冲液经典成员:pKa=8.3,有效缓冲范围pH 7.6-9.0
  • 细胞培养优选:低毒性,特别适用于低温实验
  • 蛋白质纯化支持:已成功用于尿酸酶等蛋白的稳定性研究
  • 低紫外吸收:260/280 nm吸光度极低,不干扰蛋白检测
  • 现货供应:常备库存,支持快速发货,可定制包装
  • 技术支持:专业技术团队提供全程使用指导与问题解答
  • 源头工厂:自产自销,具备价格优势和供应稳定性

十、采购与使用建议

在采购BICINE(CAS 150-25-4)时,建议重点关注以下几点:

纯度要求:对于细胞培养、酶学研究和IVD诊断试剂生产,应选择纯度≥99%的分子生物学级产品,并关注紫外吸收指标(260 nm ≤0.08,280 nm ≤0.05)。

应用方向选择

  • 细胞培养基缓冲:BICINE是细胞培养的优质缓冲剂,特别适合低温实验
  • 蛋白质纯化与离子交换层析:广泛用于蛋白质纯化缓冲液
  • 酶活性测定:已成功用于尿酸酶等酶的研究
  • 蛋白质结晶:是蛋白质结晶的常用缓冲液
  • SDS-PAGE电泳:可用作电泳缓冲液组分
  • 组织保存:用于心脏灌流等组织保存实验
  • IVD诊断试剂:适用于碱性检测体系

缓冲范围确认:BICINE的有效缓冲范围为pH 7.6-9.0,pKa=8.3(25°C)。如实验pH在此范围内且需要避免金属离子干扰,BICINE是优于Tris的选择。

与Tris的选择

  • 需要较高温度稳定性时,BICINE比Tris更适合
  • BICINE对金属依赖性酶的干扰更小
  • 低温实验(如4°C)推荐BICINE

储存条件:粉末室温密封保存,阴凉干燥处。0.5 M BICINE母液可在4°C稳定保存6个月。

安全操作:操作时佩戴实验服、护目镜及手套,避免吸入粉尘。本产品仅限科研和工业生产使用,不用于临床诊断或治疗。

十一、联系我们

如需获取BICINE(CAS 150-25-4)的产品报价、样品或技术支持,请联系湖南汇百益新材料有限公司:

  • 产品咨询:13319523173
  • 订购邮箱:ivy@hnhbsj.com
  • 官方网站https://www.hbsjxcl.com/
  • 公司地址:湖南省怀化市洪江区工业园8号

声明:本产品仅供科研和工业生产使用,不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书,并遵守实验室安全操作规范。


作者: 汇百益-百博士
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N,N-双(2-羟乙基)甘氨酸 (BICINE) — Good's缓冲液碱性范围核心成员,细胞培养与蛋白纯化优质选择
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