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三(羟甲基)氨基甲烷 (Tris) — 生物缓冲液通用核心原料,分子生物学与生物制药基础试剂

2026-06-08 11:03:49

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一、产品基本信息项目内容产品名称三(羟甲基)氨基甲烷英文名称Tris(hydroxymethyl)aminomethane (Tris base)中文别名TRI

一、产品基本信息

项目内容
产品名称三(羟甲基)氨基甲烷
英文名称Tris(hydroxymethyl)aminomethane (Tris base)
中文别名TRIS、缓血酸铵、氨丁三醇、2-氨基-2-羟甲基-1,3-丙二醇
CAS号77-86-1
分子式C₄H₁₁NO₃
分子量121.14 g/mol
MDL号MFCD00004679
EINECS号201-064-4
外观白色结晶粉末
纯度≥99%(湖南汇百益)
熔点168-172°C
溶解性易溶于水(550 g/L,25°C),溶于乙醇
有效缓冲范围pH 7.0-9.1
pKa(25°C)8.1
1%水溶液pH10.0-11.5
储存条件室温密封保存,阴凉干燥
用途生物缓冲液配制、核酸/蛋白质电泳、IVD诊断试剂原料、生物制药缓冲体系、细胞培养基组分

二、产品简介与核心优势

Tris(三(羟甲基)氨基甲烷)是生命科学研究中应用最广泛的生物缓冲剂之一,被称为生物缓冲液的“通用语言”,在分子生物学、生物化学和生物制药领域具有不可替代的地位。Tris自20世纪60年代被引入实验室以来,已成为全球分子生物学实验室的基础试剂。

Tris是一种弱碱性胺类缓冲剂,其pKa为8.1(25°C),在pH 7.0-9.0范围内具有优异的缓冲能力。其分子结构中含有三个羟甲基和一个氨基,使其在水中具有极高的溶解度(25°C时达550 g/L),且水溶液在空气中不吸收二氧化碳,性质稳定。

Tris的核心优势在于其广泛的兼容性和灵活性。它不会与大多数生物分子发生相互作用,对酶活性影响小,适合多种生化反应体系。通过不同的酸调节剂(盐酸、乙酸、硼酸),Tris可衍生出TAE、TBE、TE等多种经典缓冲液,覆盖核酸电泳、蛋白质电泳、核酸储存等核心实验场景。

在生物制药领域,Tris被用作疫苗制剂(如mRNA疫苗)的中和缓冲液和药物辅料,确保制剂稳定性和pH控制。高纯度、低内毒素级别的Tris更是生物制药生产的理想辅料。

Tris的毒性较低,大鼠口服LD₅₀低于4460 mg/kg,在正确使用方法下安全性良好。其主要缺点在于pKa受温度影响较大(每升高1°C,pKa下降约0.03),在温度波动较大的实验中需注意校准。

湖南汇百益提供纯度≥99%的Tris产品,严格符合分子生物学级和生物制药级质量标准,现货供应,可按需定制包装。

三、Tris的核心特性

3.1 Good‘s缓冲液的典范

Tris是最早被广泛应用于生物化学研究的缓冲剂之一,虽然不是Norman Good筛选的“Good’s缓冲液”家族成员,但其应用广泛度远超Good‘s缓冲液。Tris的成功激发了Good’s缓冲液家族的开发,至今仍是全球实验室使用频率最高的缓冲剂。

3.2 缓冲特性总结

特性数值/描述
有效缓冲范围pH 7.0-9.1
pKa(25°C)8.1
pKa(37°C)7.8
温度依赖性-0.03/°C
性质弱碱性胺
水溶性550 g/L(25°C)
紫外吸收低(260 nm以上)
稳定性水溶液不吸收CO₂

3.3 Tris缓冲液的温度依赖性

Tris缓冲液的pKa受温度影响显著。研究表明,温度每升高1°C,pKa下降约0.03单位。在温度波动较大的实验(如某些酶促反应)中,需根据实际温度校准缓冲液pH。

温度(°C)近似pKa
48.8
258.1
377.8

3.4 Tris的多种形式

产品形式CAS号特点适用场景
Tris(游离碱,本品)77-86-1需用酸调pH常规缓冲液配制
Tris-HCl1185-53-1预先中和,即用型对pH精度要求高的实验
Tris-EDTA(TE)含EDTADNA/RNA储存

四、主要应用领域

4.1 核酸电泳缓冲液(核心应用Ⅰ)

Tris是琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳中最常用的缓冲体系基础组分。通过选择不同的酸调节剂,可获得不同特性的电泳缓冲液。

TAE缓冲液(Tris/Acetate/EDTA)

  • 组成:Tris + 乙酸 + EDTA
  • 特点:缓冲能力较弱,但对大片段DNA分离效果好
  • 适用:大分子DNA片段电泳分析、后续酶促实验

TBE缓冲液(Tris/Borate/EDTA)

  • 组成:Tris + 硼酸 + EDTA
  • 特点:缓冲能力强,分辨率高
  • 适用:小分子DNA片段电泳分析

TE缓冲液(Tris/EDTA)

  • 组成:Tris-HCl + EDTA
  • 特点:弱碱性,对DNA碱基有保护性
  • 适用:DNA的稳定和长期储存

4.2 蛋白质电泳缓冲液(核心应用Ⅱ)

Tris是SDS-PAGE蛋白电泳的核心缓冲组分

Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液

  • 组成:Tris + 甘氨酸 + SDS
  • 适用:常规变性蛋白电泳(Western Blot样品分离)
  • 特点:分辨率好,适用于大多数蛋白分子量分析

4.3 IVD诊断试剂原料(核心应用Ⅲ)

在临床体外诊断领域,Tris作为通用缓冲剂广泛用于多种生化、免疫检测试剂盒。

应用场景

  • 肝功能检测试剂盒(ALT、AST等)
  • 肾功能检测试剂盒(BUN、Cr等)
  • 血糖血脂检测试剂盒
  • 免疫比浊检测试剂盒
  • 酶联免疫吸附测定(ELISA)

4.4 生物制药缓冲体系(核心应用Ⅳ)

在生物制药领域,Tris被用作疫苗和蛋白制剂的缓冲辅料

mRNA疫苗中的应用

  • 在mRNA疫苗(如Moderna新冠疫苗)制备中,Tris-HCl(pH 7.5-8.0)用于中和脂质纳米颗粒与mRNA的混合物,确保制剂稳定性
  • 作为注射剂的辅料(如依那西普),调节药物溶液的pH并增强稳定性

高纯度Tris要求

  • 生物制药生产需要高纯度、低内毒素级别的Tris
  • Pfanstiehl等品牌提供cGMP药典质量Tris碱,符合USP、EP、BP、ChP标准,适用于注射剂和生物制剂生产

4.5 细胞培养基缓冲组分

Tris可作为细胞培养基的辅助缓冲体系。

应用特点

  • 在细胞培养中维持pH稳定
  • 开放环境(无CO₂)下的pH维持优于碳酸氢盐
  • 推荐浓度10-50 mM

4.6 蛋白质纯化与生化研究

Tris是蛋白质纯化和酶学研究的常用缓冲液

应用场景

  • 亲和层析和离子交换层析缓冲液
  • 蛋白质提取和裂解缓冲液(如RIPA裂解液)
  • 酶活性测定缓冲液
  • 蛋白质储存缓冲液

五、实验方案

5.1 Tris溶液配制

Tris易溶于水,推荐使用去离子水配制。

1 M Tris-HCl储存液配制(1 L,pH 8.0)

步骤操作说明
1称取121.1 g Tris粉末分子量121.14,终体积1 L
2加入800 mL去离子水室温溶解,溶液澄清
3用浓HCl调节pH至8.0缓慢滴加,不断搅拌,约需8-10 mL浓HCl
4定容至1000 mL补充至终体积
50.22 μm滤膜过滤除菌如用于细胞培养

注意事项

  • Tris溶液不可高压灭菌(高温可能导致降解),应采用过滤除菌
  • 调pH时需考虑温度影响,25°C调至pH 8.0的溶液在4°C时pH会升至约8.8
  • 配制高浓度母液时,完全溶解需一定时间

5.2 50× TAE缓冲液配制(1 L)

配方

组分用量终浓度
Tris242 g2 M
冰乙酸57.1 mL1 M
0.5 M EDTA(pH 8.0)100 mL50 mM

配制方法

  1. 称取242 g Tris,加入约800 mL去离子水
  2. 加入57.1 mL冰乙酸和100 mL EDTA溶液
  3. 搅拌至完全溶解
  4. 定容至1000 mL
  5. 使用时稀释50倍(20 mL缓冲液 + 980 mL水)得1× TAE工作液

5.3 5× TBE缓冲液配制(1 L)

配方

组分用量终浓度
Tris54 g445 mM
硼酸27.5 g445 mM
0.5 M EDTA(pH 8.0)20 mL10 mM

配制方法

  1. 称取54 g Tris和27.5 g硼酸
  2. 加入约800 mL去离子水
  3. 加入20 mL EDTA溶液
  4. 搅拌至完全溶解
  5. 定容至1000 mL
  6. 使用时稀释5倍得1× TBE工作液

5.4 Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液(10×,1 L)

配方

组分用量终浓度
Tris30.3 g250 mM
甘氨酸144 g1.92 M
SDS10 g1%(w/v)

配制方法

  1. 称取30.3 g Tris、144 g甘氨酸和10 g SDS
  2. 加入约800 mL去离子水
  3. 搅拌至完全溶解
  4. 定容至1000 mL
  5. 使用时稀释10倍得1×工作液

5.5 工作浓度参考

应用场景推荐浓度备注
TAE电泳缓冲液(1×)40 mM Tris核酸电泳
TBE电泳缓冲液(1×)89 mM Tris小片段DNA电泳
TE缓冲液10 mM Tris-HClDNA储存
SDS-PAGE电泳缓冲液(1×)25 mM Tris蛋白电泳
蛋白质纯化10-50 mM根据蛋白稳定性优化
IVD试剂盒10-200 mM根据具体方法优化
细胞培养基10-50 mM辅助缓冲体系

六、注意事项与安全信息

6.1 关键实验注意事项

温度效应

  • Tris缓冲液的pKa随温度变化显著(-0.03/°C)
  • 在温度波动较大的实验中,建议在实验温度下校准pH

浓度效应

  • Tris的pKa具有浓度依赖性
  • 高浓度Tris缓冲液的pH与低浓度时有差异,需注意校准

金属离子兼容性

  • Tris可与某些金属离子(如Cu²⁺、Co²⁺)形成络合物
  • 在涉及这些金属离子的实验中需注意潜在干扰

紫外吸收

  • Tris在260 nm以上紫外吸收极低
  • 不干扰蛋白质和核酸的光度法检测

不适合固定组织

  • Tris与戊二醛发生反应,不适用于电子显微镜样品固定(需改用二甲胂酸盐或PIPES缓冲液)

产品吸湿性

  • Tris粉末具一定吸湿性,建议在干燥环境中称量
  • 使用后立即密封容器

腐蚀性

  • Tris对铜、铝有腐蚀作用
  • 应避免使用金属容器长期接触

6.2 储存条件

条件要求
粉末室温密封保存,阴凉干燥,避光
溶液4°C保存,过滤除菌后可稳定保存6个月
有效期粉末在干燥条件下可稳定保存2-3年

6.3 安全信息

项目信息
物理状态白色结晶粉末
急性毒性低毒(LD₅₀ > 4460 mg/kg,大鼠口服)
刺激性对眼睛、呼吸道有刺激性
个人防护实验服、护目镜、手套
操作在通风良好处操作,避免吸入粉尘
储存室温密封,阴凉干燥

Tris在典型工作浓度下通常被认为是无毒、安全的实验室试剂。但对眼睛和呼吸道有刺激性,操作时建议佩戴适当的个人防护装备,遵循标准实验室安全规范。误食后大部分会以原形排出体外,但仍需注意避免摄入。

七、产品质量标准

湖南汇百益新材料有限公司提供的Tris产品严格执行以下质量标准:

检测项目质量指标
外观白色结晶粉末
纯度(滴定)≥99%
分子式C₄H₁₁NO₃
分子量121.14
熔点168-172°C
溶解性550 g/L(25°C),澄清
pH(5%水溶液,25°C)10.0-11.5
紫外吸收(260 nm,1 M)≤0.1
紫外吸收(280 nm,1 M)≤0.1
水分≤1.0%
灼烧残渣≤0.1%
重金属≤10 ppm
氯离子(Cl⁻)≤0.01%
硫酸根(SO₄²⁻)≤0.01%
铁(Fe)≤5 ppm
钙(Ca)≤10 ppm
镁(Mg)≤5 ppm
内毒素≤5 EU/g(注射级)
DNase/RNase未检出(分子生物学级)

湖南汇百益通过优化合成工艺与精制技术,将产物纯度稳定控制在≥99%,产品符合分子生物学级质量标准。湖南汇百益拥有50,000平方米生产基地,已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证,确保批次间稳定性。

包装规格:实验室规格:100g、500g、1kg;工业规格:5kg、25kg;可按客户需求定制包装。

八、Tris vs. 其他常见缓冲液:对比分析

对比项Tris(本品)PBSHEPESMOPS
pKa(25°C)8.17.2(磷酸)7.57.2
有效缓冲范围pH 7.0-9.1pH 6.0-8.0pH 6.8-8.2pH 6.5-7.9
温度依赖性(-0.03/°C)
金属离子结合与Cu²⁺、Co²⁺结合与Ca²⁺、Mg²⁺结合极低极低
细胞毒性无毒
紫外吸收极低极低极低极低
主要应用通用缓冲、电泳细胞培养、免疫检测细胞培养RNA电泳
成本经济经济较高较高

选择建议

  • 常规分子生物学实验、电泳缓冲液首选Tris,成本经济,应用广泛
  • 细胞培养(生理pH):PBS或HEPES更常用
  • 金属离子敏感实验:选择HEPES或MOPS
  • RNA电泳:选择MOPS

九、供应商介绍

湖南汇百益新材料有限公司成立于2014年,位于湖南省怀化市洪江区工业园,拥有50,000平方米生产基地。公司是一家专注于生物基础试剂研发、生产与销售的国家高新技术企业湖南省专精特新企业,拥有独立研发试验中心和生产基地,并已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证。

公司先后获得“怀化市工程技术研究中心”“湖南师范大学化学生物学功能材料产学研基地”“创新创业大赛湖南省优秀企业”“湖南新材料企业”等一系列荣誉称号。

依托强大的生产平台与技术实力,公司以Tris等生物缓冲剂为核心产品,实现从原料到终产品的规模化生产。公司可灵活提供OEM代工服务与个性化定制方案,如提纯、精制加工等,以满足客户多元化需求。旗下品牌“汇百试剂”,通过提供性能稳定可靠、品质媲美进口、成本更具优势的国产试剂,为生物医药、体外诊断、生物工程及科研机构等领域的客户提供基础材料解决方案。

公司研发、生产、销售各种高纯生化试剂,包括:

  • 糖苷系列:IPTG、ONPG、PNPG、DTT、x-gal、x-gluc等
  • 生物缓冲剂:Tricine、HEPES、MOPS、Tris、PIPES、MES、CAPS、TAPS、BES等
  • 表面活性剂与去污剂:SDS、SURFACTIN、EMPIGEN BB、CHAPS、CHAPSO、SB-8至SB-18系列等
  • 检测试剂:泛影酸钠、G-418硫酸盐、DTE、TCEP-HCl、PMSF、PNPP、ABTS、TMB、TMB-PS、鲁米诺、异鲁米诺、ABEI、D-荧光素钾盐、NAD⁺、NADH、NADP⁺、NADPH等
  • 高纯生化试剂:DEPC、异硫氰酸胍、盐酸胍、PMSF、MTT、BSA、WST-8等

湖南汇百益提供的Tris产品具有以下突出优势:

  • 高纯度:纯度≥99%,批次稳定性好,符合分子生物学级质量标准
  • 通用性最强:适用于核酸电泳、蛋白电泳、IVD试剂、生物制药等多种应用场景
  • 高水溶性:溶解度550 g/L(25°C),配制便捷
  • 经济实惠:相比HEPES、MOPS等缓冲剂,Tris成本更低
  • 生物制药级品质:可提供低内毒素注射级产品
  • 现货供应:常备库存,支持快速发货,可定制包装
  • 技术支持:专业技术团队提供全程使用指导与问题解答
  • 源头工厂:自产自销,具备价格优势和供应稳定性

十、采购与使用建议

在采购Tris(CAS 77-86-1)时,建议重点关注以下几点:

纯度要求:对于常规分子生物学实验,选择纯度≥99%即可;对于IVD诊断试剂生产和生物制药应用,应选择纯度≥99.9%、低内毒素的高级别产品。

应用方向选择

  • 核酸电泳:可选择TAE或TBE缓冲液(由Tris配制),TAE适合大片段DNA,TBE适合小片段DNA
  • 蛋白质电泳:配制Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液
  • IVD试剂盒:作为通用缓冲剂,广泛应用于多种生化、免疫检测
  • 生物制药:用于疫苗制剂中和缓冲液、蛋白药物辅料
  • DNA/RNA储存:配制TE缓冲液(Tris + EDTA)
  • 蛋白质纯化:配制裂解缓冲液和层析缓冲液

产品形态选择

  • Tris游离碱(本品,CAS 77-86-1):需用酸调pH,灵活性最高
  • Tris-HCl(CAS 1185-53-1):预先中和形式,直接溶解即可使用
  • 根据是否需要调pH选择合适形式

缓冲范围确认:Tris的有效缓冲范围为pH 7.0-9.1,pKa=8.1(25°C)。如实验pH在此范围内,Tris是理想选择。

温度效应考虑:Tris的pKa随温度变化显著(-0.03/°C)。在温度波动较大的实验中,建议在实验温度下校准缓冲液pH。

储存条件:粉末室温密封保存,阴凉干燥,避光。Tris溶液可在4°C稳定保存6个月。

安全操作:操作时佩戴实验服、护目镜及手套,避免吸入粉尘。本产品仅限科研和工业生产使用,不用于临床诊断或治疗。

十一、联系我们

如需获取Tris(CAS 77-86-1)的产品报价、样品或技术支持,请联系湖南汇百益新材料有限公司:

  • 产品咨询:13319523173
  • 订购邮箱:ivy@hnhbsj.com
  • 官方网站https://www.hbsjxcl.com/
  • 公司地址:湖南省怀化市洪江区工业园8号

声明:本产品仅供科研和工业生产使用,不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书,并遵守实验室安全操作规范。


作者: 汇百益-百博士
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一、产品基本信息项目内容产品名称三(羟甲基)氨基甲烷英文名称Tris(hydroxymethyl)aminomethane (Tris base)中文别名TRI
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