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2,3,5-三苯基氯化四氮唑 (TTC) — 氧化还原指示剂,组织活力检测与种子生存力测定核心试剂

2026-05-08 13:53:24

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一、产品基本信息项目内容产品名称2,3,5-三苯基氯化四氮唑英文名称2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride中文别名红四氮唑、氯化

一、产品基本信息

项目内容
产品名称2,3,5-三苯基氯化四氮唑
英文名称2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride
中文别名红四氮唑、氯化三苯基四氮唑、四唑红、TTZ、TPTZ
CAS号298-96-4
分子式C₁₉H₁₅ClN₄
分子量334.80 g/mol
MDL号MFCD00011963
EINECS号206-071-7
外观白色至浅黄色结晶粉末
纯度≥99%(湖南汇百益)
熔点250°C(分解)
溶解性溶于水(10 mg/mL)、乙醇、丙酮;不溶于乙醚
储存条件2-8°C冷藏保存,避光防潮
用途氧化还原指示剂,用于脑缺血模型染色、种子活力检测、菌落计数、乳品抗生素残留检测、肉类鲜度测定等

二、产品简介与核心优势

TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)是一种经典的氧化还原指示剂,属于四唑盐类化合物,是生命科学研究和临床前药效评价中不可或缺的核心工具试剂。

TTC本身是一种无色或微黄色的化合物。其检测原理基于活细胞内的脱氢酶活性:当TTC进入活细胞后,被细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶(Succinate dehydrogenase, SDH) 等脱氢酶还原,断裂四唑环,生成不溶性的红色三苯基甲臜(1,3,5-triphenylformazan, TPF)。这一红色沉淀在酶活性位点处沉积,实现可视化检测。如果组织细胞死亡或活力下降,则无法发生该反应,组织不能被染色或染色较浅。

核心优势

  • 经典的氧化还原指示剂:TTC是呼吸链中吡啶-核苷结构酶系统的质子受体,可作为氧化还原指示剂,与正常组织中的脱氢酶反应呈红色
  • 脂溶性:可渗透进入活细胞,在细胞内被还原沉积
  • 操作简便:TTC染色全过程约15-30分钟,远远优于传统HE染色,几乎不需要特殊实验器材
  • 结果直观:正常组织被染成红色,坏死或梗死区不被染色,肉眼即可判断
  • 可重复使用:TTC染液在短时间内可重复使用2-3次
  • 应用广泛:涵盖脑缺血模型评估、种子活力检测、菌落计数、乳品抗生素残留检测、肉类鲜度测定等多个领域

三、应用原理

TTC的显色反应基于活细胞内脱氢酶催化的还原反应:

Step 1:细胞摄取

  • TTC(无色/微黄色)进入活细胞
  • 利用其脂溶性特性穿透细胞膜

Step 2:酶催化还原

  • 在活细胞线粒体琥珀酸脱氢酶等脱氢酶催化下
  • TTC的四唑环被还原断裂
  • 生成不溶性的红色三苯基甲臜(TPF)

Step 3:显色沉积

  • 红色TPF在酶活性位点沉积
  • 活细胞/组织呈现红色
  • 死细胞/坏死组织无法还原TTC,不着色或着色浅

反应特点

  • 反应特异性强,直接反映细胞代谢活性
  • 不溶性红色沉淀,显色位置精确
  • 操作简便,染色快速(15-30分钟)

四、主要应用领域

4.1 脑缺血/心肌梗死模型评估(核心应用)

TTC染色是脑缺血和心肌梗死研究中评价梗死体积的“金标准”方法,也是临床前药效评价的关键检测手段。

应用场景

  • 大脑中动脉栓塞(MCAO)模型梗死体积测定
  • 心肌缺血再灌注损伤评估
  • 神经保护药物药效筛选
  • 缺血预处理保护作用研究

染色结果判读

组织类型TTC染色颜色
正常脑组织、心肌组织红色
脑梗坏死区、心肌梗死区不着色/白色
缺血半暗带介于红色与白色之间

实验流程

  1. 取新鲜脑组织或心肌组织,-20°C速冻20-30分钟
  2. 切取2-3mm厚的组织切片
  3. 浸入2% TTC染色液中,37°C避光染色25-35分钟
  4. 用PBS或去离子水洗去多余染液
  5. 观察并拍照记录(如需长期保存,可用4%多聚甲醛固定)

方法优势

  • 方法简便:取材于新鲜组织,无需固定包埋
  • 节省时间:全过程约15-30分钟,远优于HE染色
  • 设备简单:几乎不需要特殊实验器材

4.2 种子活力检测

TTC法是种子生存能力检测的经典方法,1894年首次合成TTC后即用于此领域。

检测原理:有活力的种子胚组织活细胞中的脱氢酶可以将TTC还原成红色TPF,细胞死亡或活力衰退则不能染色或染色较浅。

应用场景

  • 种子批活力评估
  • 种子贮藏效果监测
  • 育种材料筛选
  • 种质资源活力鉴定

4.3 食品微生物检测

4.3.1 乳品抗生素残留检测(TTC法)

TTC法是我国鲜乳中抗生素残留检测的标准方法(GB 4789.27-2008第一法)

检测原理

  • 若牛奶中有抗生素存在,加入菌种(嗜热链球菌)经培养后菌种不增殖
  • 加入TTC后不发生还原反应,溶液保持无色(阳性)
  • 若无抗生素,菌种生长繁殖,代谢产生的氢将TTC还原成红色(阴性)

检测灵敏度(GB法):

  • 青霉素:0.004 U/mL
  • 链霉素:0.5 U/mL
  • 庆大霉素:0.4 U/mL
  • 卡那霉素:5 U/mL

方法特点:简便、快速、无需特殊设备,3-4小时可出报告

4.3.2 肉类鲜度测定

TTC显色法可用于动物性肉类食品鲜度的快速测定

检测原理:TTC可被肉食品中含有的琥珀酸脱氢酶还原成红色甲臜

方法特点:操作简便、30分钟即可报出结果、易于观察、适用于现场监督监测

4.3.3 菌落总数测定

TTC可作为琼脂培养基中细菌菌落计数的显色剂。菌落总数检测中的显色剂多为TTC,细菌生长时细胞代谢产物与TTC发生氧化还原反应,将指示剂还原成红色产物,使菌落着色更易于观察。

主要应用

  • 食品加工过程菌落总数快速测定
  • 环境涂抹样本检测
  • 食品及水样微生物检测

方法优势

  • 判读更清晰,易与食品颗粒分开
  • 操作简单,节省人工
  • 避免热损伤菌落蔓延发生
  • 多数测试片以低浓度TTC为指示剂,对常见微生物无抑制

4.4 植物花粉/根尖活力检测

TTC染色可用于植物花粉和根尖活力的快速评估:

染色判读

  • 活种子/胚组织:被染成不同程度的红色
  • 死组织或无活力组织:不着色

五、产品质量标准

湖南汇百益新材料有限公司提供的TTC产品严格执行以下质量标准:

检测项目质量指标
外观白色至浅黄色结晶粉末
纯度≥99%
熔点250°C(分解)
溶解性10 mg/mL溶于水,溶液澄清
干燥失重≤0.5%
灼烧残渣≤0.2%
重金属≤5 ppm

湖南汇百益通过优化合成工艺与精制技术,将产物纯度稳定控制在≥99%,试剂经严格质检,颜色反应灵敏,确保显色反应的背景值低、灵敏度高。产品批间稳定性良好,适合科研及工业用户的规模化使用。

六、供应商介绍:湖南汇百益新材料有限公司

湖南汇百益新材料有限公司(原湖南韵邦生物科技有限公司)成立于2014年,位于怀化市洪江循环高新产业园区,拥有50,000平方米生产基地。公司是一家专注于生物基础试剂研发、生产与销售的“国家高新技术企业”“湖南省专精特新企业”,拥有独立研发试验中心和生产基地,并已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证。公司严格按照国际标准,不断完善硬件设施与质控流程,构建了全方位覆盖的精控生产体系,核心产品IPTG、DTT等高端生物原材料,质量已达国际先进水平。

公司先后获得“怀化市工程技术研究中心”“湖南师范大学化学生物学功能材料产学研基地”“创新创业大赛湖南省优秀企业”“湖南新材料企业”等一系列荣誉称号,产品远销东南亚、欧美等多个国家和地区。

依托强大的生产平台与技术实力,公司可灵活提供OEM代工服务个性化定制方案,如提纯、精制加工等,以满足客户多元化需求。旗下品牌“汇百试剂”,通过提供性能稳定可靠、品质媲美进口、成本更具优势的国产试剂,为生物医药、体外诊断、生物工程及科研机构等领域的客户提供基础材料解决方案,以实现关键生物基础试剂国产化替代与关键试剂本土化供应,切实解决中国生物试剂的供应瓶颈问题,并持续助力科研突破与产业创新升级。

公司研发、生产、销售各种高纯生化试剂,包括:

  • 糖苷系列:IPTG、ONPG、PNPG、DTT、x-gal、x-gluc、PETG、MU-Gal等
  • 生物缓冲剂:Tricine、HEPES、MOPS、CAPS、TAPS、MES、BES等
  • 表面活性剂与去污剂:SDS、SURFACTIN、EMPIGEN BB、CHAPS、SB-8至SB-18系列等
  • 检测试剂:泛影酸钠、PCA钙、G-418硫酸盐、DTE、TCEP-HCl、PMSF、PNPP、ABTS、TMB、TMB-PS、鲁米诺、异鲁米诺、ABEI、D-荧光素钾盐、G-6-P-Na₂、TBHBA、TTC
  • 高纯生化试剂:DEPC、异硫氰酸胍、PMSF、MTT、BSA、WST-8等

湖南汇百益提供的TTC产品具有以下突出优势:

  • 高纯度:纯度≥99%,批次稳定性好,显色灵敏
  • 现货供应:常备库存,支持快速发货,满足紧急实验需求
  • 规格灵活:提供从克级到公斤级(1G、5G、25G、100G、500G、1KG等)的产品,满足从科研到工业级生产的不同需求
  • 专业包装:采用避光、密封、防潮包装,2-8°C冷藏运输保存
  • 技术支持:专业技术团队提供全程使用指导与问题解答
  • 源头工厂:自产自销,具备价格优势和供应稳定性

七、采购与使用建议

在采购TTC(CAS 298-96-4)时,建议重点关注以下几点:

  1. 纯度要求:对于脑缺血染色等敏感实验,建议选择纯度≥99%的产品,以确保显色清晰度和背景干净。
  2. 溶解性验证:TTC应完全溶于水,10 mg/mL浓度下溶液应澄清。
  3. 溶液配制
  4. 染色注意事项
  5. 储存条件2-8°C冷藏保存,避光防潮。本产品具有轻微的光和热敏感性,储存及使用过程中避免长时间曝光或接触高温。
  6. 批间一致性:对于标准化实验流程,选择具备严格质量控制体系的供应商。
  7. 供货稳定性:选择具备稳定供应链的供应商,确保长期稳定的原料供应。

八、联系我们

如需获取TTC(CAS 298-96-4)的产品报价、样品或技术支持,请联系湖南汇百益新材料有限公司:


声明:本产品仅供科研使用,不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书,并遵守实验室安全操作规范。


作者: 汇百益-百博士
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一、产品基本信息项目内容产品名称2,3,5-三苯基氯化四氮唑英文名称2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride中文别名红四氮唑、氯化
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