5-溴-4-氯-3-吲哚基-beta-D-葡糖苷酸钠 (X-Gluc) — GUS报告基因显色底物，转基因植物检测核心工具

一、产品基本信息

二、产品简介与核心优势

X-Gluc（5-溴-4-氯-3-吲哚基-beta-D-葡糖苷酸钠）是一种高纯度的β-葡萄糖苷酸酶（β-glucuronidase，GUS）显色底物，是转基因植物研究领域应用最广泛的报告基因检测试剂。

GUS基因（uidA）是从大肠杆菌中分离出来的报告基因，其编码的β-葡萄糖苷酸酶能够催化X-Gluc的糖苷键水解。在适宜条件下，GUS酶催化X-Gluc分解，经过两步反应最终生成不溶性的深蓝色沉淀（5,5’-二溴-4,4’-二氯靛蓝）。这一特性使研究者能够直观地观察转基因植物中外源基因的表达情况，无需任何仪器即可定性检测。

X-Gluc与X-Gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷）同属于吲哚酚类显色底物家族，两者结构相似、显色原理相同。区别在于：X-Gal是β-半乳糖苷酶（lacZ）的底物，用于蓝白斑筛选；X-Gluc是β-葡萄糖苷酸酶（GUS）的底物，用于转基因植物检测。湖南汇百益同时提供这两款经典产品，满足生命科学研究的多样化需求。

核心优势：

• 不溶性深蓝色沉淀：水解产物形成稳定、不溶性的深蓝色沉淀，显色部位精确，背景清晰，肉眼即可观察
  
• GUS报告基因检测金标准：数十年应用验证，是转基因植物研究中应用最广泛的报告基因检测工具
  
• 高灵敏度与特异性：绝大多数植物细胞内不存在内源GUS活性，检测特异性强，假阳性率低
  
• 结果可长期保存：蓝色沉淀极其稳定，在乙醇中不褪色，染色后的样本可长期保存观察
  
• 兼容性优异：可与多种其他报告基因系统联用，适用于融合蛋白表达定位研究
  
• 应用领域广阔：涵盖植物基因工程、微生物检测、食品卫生、临床尿路感染诊断等多个领域
  

三、GUS报告基因系统简介

3.1 什么是GUS基因？

GUS基因（uidA）是从大肠杆菌中分离出来的报告基因，其编码的β-葡萄糖苷酸酶（β-glucuronidase） 是一种分子量约为68 kDa的水解酶。该酶能够催化多种β-葡萄糖苷酯类物质的水解，包括X-Gluc等显色底物。

3.2 为什么选择GUS作为植物报告基因？

GUS基因在植物报告基因系统中具有不可替代的优势：

这些优势使GUS基因成为植物遗传转化研究中最常用的报告基因之一。

四、显色原理

X-Gluc的显色反应基于GUS酶催化的两步反应：

Step 1：酶催化水解

• 在GUS酶（β-葡萄糖苷酸酶）催化下
  
• X-Gluc的葡萄糖醛酸苷键被水解断裂
  
• 生成葡萄糖醛酸和5-溴-4-氯-3-吲哚基（BCI）
  

Step 2：氧化二聚显色

• BCI在空气中自发氧化
  
• 两分子BCI发生二聚反应
  
• 生成不溶性的深蓝色沉淀——5,5'-二溴-4,4'-二氯靛蓝
  

Step 3：结果观察

• GUS酶活性位点呈现肉眼可见的深蓝色
  
• 沉淀极其稳定，在乙醇中不褪色
  

反应特点：

• 反应特异性强，灵敏度高
  
• 产物为不溶性沉淀，显色位置精确
  
• 无需终止液，颜色可长期保存
  
• 不褪色特性便于样本存档
  

五、主要应用领域

5.1 转基因植物检测（核心应用）

X-Gluc最广泛的应用是转基因植物研究中GUS报告基因的组织化学染色。通过检测GUS基因的表达，研究者可以：

• 启动子活性分析：研究特定启动子的组织特异性和诱导表达特性
  
• 基因表达定位：确定外源基因在植物不同组织、器官中的表达部位
  
• 转化效率评估：快速筛选阳性转基因植株
  
• 融合蛋白研究：与目标蛋白融合表达，研究蛋白的亚细胞定位
  

适用范围：拟南芥、烟草、水稻、玉米、大豆等多种转基因植物的根、茎、叶、花、种子等组织。

5.2 食品与环境微生物检测

大肠杆菌中约95%的菌株具有β-葡萄糖苷酸酶活性，X-Gluc可用于：

• 饮用水中大肠杆菌检测：取代传统方法精确检测，大大降低假阳性和假阴性
  
• 食品卫生检验：检测肉、奶制品、贝类等食品中的大肠杆菌污染
  
• 环境水样监测：评估水体微生物污染程度
  

5.3 临床诊断

X-Gluc可用于尿路感染的大肠杆菌快速检测，通过显色反应直观判断尿样中是否存在大肠杆菌。

5.4 GUS酶活性定性分析

在生物化学和分子生物学研究中，X-Gluc可用于：

• GUS酶表达系统的活性验证
  
• 基因工程菌株的筛选鉴定
  
• 酶抑制剂筛选研究
  

六、GUS染色实验方案

6.1 试剂准备

X-Gluc储存液配制（20 mg/mL）：

1. 用DMF或DMSO溶解X-Gluc粉末，配制20 mg/mL储存液
   
2. 涡旋混匀，用铝箔包裹避光
   
3. 分装后于-20°C储存，一年内有效
   
4. 注意：储存液若失效，溶液会变成亮红色
   

GUS染色工作液配制：

• 将X-Gluc储存液用染色缓冲液稀释至1 mg/mL的工作浓度
  
• 染色缓冲液成分（参考）：50 mM磷酸盐缓冲液（pH 7.0）、10 mM EDTA、0.1% Triton X-100
  

6.2 实验流程

第一步：取材与固定

• 将叶片、花瓣、根茎等组织剪成小片，放于离心管中
  
• 用4%多聚甲醛（新鲜配制）固定30分钟
  
• 用磷酸盐缓冲液润洗
  

第二步：染色

• 加入GUS染色工作液至完全覆盖组织
  
• 25-37°C避光孵育1小时至过夜，至出现明显蓝色
  
• 对于厚组织或大样本，可采用真空渗透法辅助底物渗入
  

第三步：脱色

• 将组织转入70%乙醇或80%丙酮中脱色2-3次
  
• 至阴性对照材料完全脱色呈白色
  
• X-Gluc染色阳性的蓝色斑点极稳定，在酒精中不褪色
  

第四步：观察

• 肉眼观察：阳性部位呈现蓝色斑点
  
• 显微镜观察：部分细微蓝色斑点需在显微镜下观察
  

6.3 注意事项

• X-Gluc对光敏感，染色过程需避光
  
• DMSO和DMF具有吸湿性，应使用新开封的溶剂
  
• 植物组织染色前需去除叶绿素干扰
  
• 建议设置阳性和阴性对照实验
  
• 染色时间可根据样本类型调整，一般不超过24小时
  

七、产品质量标准

湖南汇百益新材料有限公司提供的X-Gluc产品严格执行以下质量标准：

湖南汇百益通过优化合成工艺与精制技术，将产物纯度稳定控制在≥98%（HPLC检测），确保显色反应的灵敏度高、背景清晰。产品批间稳定性良好，-20°C避光保存可长期保持活性。

储存稳定性：粉末在-20°C条件下可稳定保存3年。DMF/DMSO溶液在-20°C避光可保存1年。

八、供应商介绍：湖南汇百益新材料有限公司

湖南汇百益新材料有限公司成立于2014年，位于怀化市洪江工业园，拥有50,000平方米生产基地。公司是一家专注于生物基础试剂研发、生产与销售的“国家高新技术企业”、“湖南省专精特新企业”，拥有独立研发试验中心和生产基地，并已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证。公司严格按照国际标准，不断完善硬件设施与质控流程，构建了全方位覆盖的精控生产体系，核心产品IPTG、DTT等高端生物原材料，质量已达国际先进水平。

依托强大的生产平台与技术实力，公司可灵活提供OEM代工服务与个性化定制方案，如提纯、精制加工等，以满足客户多元化需求。旗下品牌“汇百试剂”，通过提供性能稳定可靠、品质媲美进口、成本更具优势的国产试剂，为生物医药、体外诊断、生物工程及科研机构等领域的客户提供基础材料解决方案，以实现关键生物基础试剂国产化替代与关键试剂本土化供应，切实解决中国生物试剂的供应瓶颈问题，并持续助力科研突破与产业创新升级。

公司研发、生产、销售各种高纯生化试剂，包括：

• 糖苷系列：IPTG、ONPG、PNPG、DTT、x-gal、x-gluc、PETG、MU-Gal等
  
• 生物缓冲剂：Tricine、HEPES、MOPS、CAPS、TAPS、MES、BES等
  
• 表面活性剂与去污剂：SDS、SURFACTIN、EMPIGEN BB、CHAPS、SB-8至SB-18系列等
  
• 检测试剂：泛影酸钠、PCA钙、G-418硫酸盐、DTE、TCEP-HCl、PMSF、PNPP、ABTS、TMB、TMB-PS、鲁米诺、异鲁米诺、ABEI、D-荧光素钾盐等
  
• 高纯生化试剂：DEPC、异硫氰酸胍、PMSF、MTT、BSA、WST-8等
  

湖南汇百益提供的X-Gluc产品具有以下突出优势：

• 高纯度：HPLC纯度≥98%，批次稳定性好，显色性能优异
  
• 分子生物学级：产品经严格质检，符合GUS染色检测标准
  
• 现货供应：常备库存，支持快速发货，满足紧急实验需求
  
• 规格灵活：提供从毫克级到克级（10 mg、50 mg、100 mg、500 mg、1 g等）的产品
  
• 配套齐全：可同时提供DMF、染色缓冲液等配套试剂，一站式采购
  
• 专业包装：采用避光、密封、防潮包装，-20°C冷冻运输保存，确保产品稳定性
  
• 技术支持：专业技术团队提供全程使用指导与问题解答
  
• 源头工厂：自产自销，具备价格优势和供应稳定性
  

九、采购与使用建议

在采购X-Gluc（CAS 129541-41-9）时，建议重点关注以下几点：

1. 纯度要求：对于转基因植物GUS染色，建议选择分子生物学级产品（纯度≥98%），以确保低背景和高显色灵敏度。
   
2. 溶解性：X-Gluc微溶于水，需使用DMF（二甲基甲酰胺）或DMSO作为溶剂。DMF为首选溶剂，溶解度可达20 mg/mL。注意DMF和DMSO具有吸湿性，应使用新开封的溶剂。
   
3. 储存条件：-20°C冷冻保存，避光防潮。X-Gluc对光敏感，长期暴露于光线下降解变色。未开封粉末在-20°C下可稳定保存3年。
   
4. 储存液配制：
   
5. 实验注意事项：
   

十、联系我们

如需获取X-Gluc（CAS 129541-41-9）的产品报价、样品或技术支持，请联系湖南汇百益新材料有限公司：

• 产品咨询：13319523173
  
• 订购邮箱：ivy@hnhbsj.com
  
• 官方网站：https://www.hbsjxcl.com/
  

声明：本产品仅供科研使用，不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书，并遵守实验室安全操作规范。