4-硝基苯基磷酸双[三(羟甲基)甲胺]盐水合物 [磷酸酶用培养基]（PNPP-DiTris）— 高纯度磷酸酶显色底物，临床诊断与生物科研核心原料

一、产品基本信息

二、产品简介与核心优势

PNPP-DiTris（4-硝基苯基磷酸双[三(羟甲基)甲胺]盐水合物）是对硝基苯磷酸酯（pNPP）的双-Tris盐形式，是一种高纯度、高水溶性的通用型磷酸酶显色底物。在碱性磷酸酶（ALP）或酸性磷酸酶催化下，PNPP水解生成对硝基苯酚（p-nitrophenol），对硝基苯酚在碱性条件下呈现亮黄色，产物颜色深度与酶活性呈正比，可通过分光光度法在405 nm处进行定量检测。

与传统的PNPP二钠盐（CAS 333338-18-4）不同，本产品的双-Tris盐结构具有独特的优势：Tris作为缓冲成分，为酶促反应提供了优化的微环境，确保检测具备高灵敏度与出色的重复性。

核心优势：

• 缓冲盐一体化：独特的双-Tris盐结构，溶解后自带缓冲能力，为磷酸酶反应提供稳定的pH环境
  
• 水溶性极佳：易溶于水（100 mg/mL），配制方便，溶液澄清透明
  
• 显色稳定：生成的可溶性黄色产物稳定性好，批间差异小，结果重复性高
  
• 高灵敏度：可检测低至皮摩尔级别的磷酸酶活性
  
• 操作简便：反应可用NaOH终止，终止后颜色稳定，便于批量检测
  
• 应用广泛：涵盖临床诊断、ELISA、TRAP活性检测、天然PAGE等多个领域
  

三、主要应用领域

3.1 临床诊断：碱性磷酸酶（ALP）活性检测（核心应用）

PNPP-DiTris是临床生化检测中碱性磷酸酶（ALP）活性测定的经典底物。ALP是肝功能、骨骼疾病的重要血清学指标，其活性检测在临床诊断中具有重要价值。

检测原理：血清中的ALP催化PNPP水解生成对硝基苯酚，通过测定405 nm处吸光度的变化速率，可定量计算ALP活性。

临床意义：

• 肝胆疾病（如肝炎、胆道梗阻）：ALP升高
  
• 骨骼疾病（如骨质疏松、骨肿瘤、Paget病）：ALP升高
  
• 佝偻病（儿童）：ALP显著升高
  

试剂盒应用：本品已被正式用于NPP底物-AMP缓冲液法的碱性磷酸酶检测试剂盒中，作为核心显色底物，用于人体血清样本中ALP活性的检测，辅助肝胆疾病和骨骼疾病的诊断。

3.2 酶联免疫吸附测定（ELISA）

PNPP-DiTris是ELISA实验中碱性磷酸酶（AP）标记系统最常用的显色底物。与HRP/TMB系统相比，AP/PNPP系统具有背景更低、反应可终止的优势。

典型应用：

ELISA检测流程：

1. 将AP标记的抗体/抗原与待测样本孵育
   
2. 洗涤去除未结合标记物
   
3. 加入PNPP-DiTris底物溶液，孵育15-60分钟
   
4. 加入终止液（3N NaOH）终止反应
   
5. 酶标仪在405 nm处读取吸光度
   

3.3 抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）活性定量

PNPP-DiTris可作为特异性底物用于定量分析细胞裂解液中的抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）活性。TRAP是破骨细胞活性的标志物，其检测在骨代谢研究中具有重要价值：

• 骨质疏松研究：评估骨吸收活性
  
• 骨肿瘤研究：分析骨破坏程度
  
• 破骨细胞分化研究：监测破骨细胞形成和活性
  

3.4 天然聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）酶活性鉴定

在非变性凝胶电泳（Native PAGE）后，PNPP-DiTris可用于原位显色鉴定具有活性的磷酸酶蛋白条带：

1. 电泳分离活性磷酸酶（保持天然构象）
   
2. 凝胶与PNPP-DiTris底物溶液孵育
   
3. 具有磷酸酶活性的条带位置呈现黄色
   
4. 适用于碱性磷酸酶、酸性磷酸酶的同工酶分析
   

3.5 酸性磷酸酶活性检测

PNPP-DiTris同样是酸性磷酸酶（ACP）活性检测的经典底物。ACP是前列腺癌的重要血清标志物，其检测在前列腺疾病诊断中具有价值。

应用场景：

• 前列腺癌筛查与监测（前列腺源性ACP）
  
• 血小板、红细胞中ACP活性测定
  
• 破骨细胞酸性磷酸酶活性分析
  

3.6 药物筛选与抑制剂研究

在药物研发中，PNPP-DiTris可用于筛选磷酸酶抑制剂或激活剂：通过检测405 nm吸光度的变化评估化合物对酶活性的影响，广泛应用于：

• 抗骨质疏松药物筛选（TRAP抑制剂，抑制破骨细胞活性）
  
• 抗肿瘤药物筛选（靶向磷酸酶信号通路）
  
• 代谢性疾病药物研发
  

3.7 细胞信号传导研究

磷酸酶在细胞信号传导途径中起关键作用，PNPP-DiTris可用于研究磷酸酶在信号传导过程中的作用及其调控机制。

3.8 核酸与细胞生物学研究

在核酸相关实验中，可用于核酸酶活性的研究；也可用于细胞内磷酸酶活性的定位和定量分析，通过观察显色情况了解细胞内磷酸酶的分布和活性变化。

四、显色原理

PNPP-DiTris的显色反应基于磷酸酶催化的水解反应：

Step 1：在磷酸酶（碱性磷酸酶或酸性磷酸酶）催化下，PNPP水解

Step 2：脱去磷酸基团，生成对硝基苯酚（p-nitrophenol）

Step 3：对硝基苯酚在碱性条件下转变为醌式结构，呈现亮黄色

Step 4：在405 nm处有最大吸收峰，吸光度与酶活性成正比

Step 5：加入3N NaOH可终止反应，终止后颜色稳定

反应特点：

• 反应特异性强，灵敏度高
  
• 产物为可溶性黄色物质，适合分光光度法检测
  
• 反应可被终止，适合终点法和动力学法测定
  
• 双-Tris盐结构为反应提供稳定的pH环境
  

五、PNPP-DiTris vs. 其他PNPP盐形式：对比分析

湖南汇百益提供多种PNPP盐形式产品，您可根据实验需求选择：

选择建议：

• 临床诊断试剂盒开发：选择PNPP-DiTris，缓冲盐一体化，稳定性好
  
• 常规ELISA检测（AP标记系统）：两者均可，PNPP-DiTris使用更便捷
  
• TRAP活性检测：PNPP-DiTris是推荐底物
  

六、产品质量标准

湖南汇百益新材料有限公司提供的PNPP-DiTris产品严格执行以下质量标准：

湖南汇百益通过优化合成工艺与精制技术，将产物纯度稳定控制在≥98%（HPLC检测），严格控制游离对硝基苯酚含量，确保显色反应的背景值低、灵敏度高。产品批间稳定性良好，适合诊断试剂盒的规模化生产。

七、供应商介绍：湖南汇百益新材料有限公司

湖南汇百益新材料有限公司成立于2014年，位于怀化市洪江工业园，拥有50,000平方米生产基地。公司是一家专注于生物基础试剂研发、生产与销售的“国家高新技术企业”、“湖南省专精特新企业”，拥有独立研发试验中心和生产基地，并已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证。公司严格按照国际标准，不断完善硬件设施与质控流程，构建了全方位覆盖的精控生产体系，核心产品IPTG、DTT等高端生物原材料，质量已达国际先进水平。

依托强大的生产平台与技术实力，公司可灵活提供OEM代工服务与个性化定制方案，如提纯、精制加工等，以满足客户多元化需求。旗下品牌“汇百试剂”，通过提供性能稳定可靠、品质媲美进口、成本更具优势的国产试剂，为生物医药、体外诊断、生物工程及科研机构等领域的客户提供基础材料解决方案，以实现关键生物基础试剂国产化替代与关键试剂本土化供应，切实解决中国生物试剂的供应瓶颈问题，并持续助力科研突破与产业创新升级。

公司研发、生产、销售各种高纯生化试剂，包括：

• 糖苷系列：IPTG、ONPG、PNPG、DTT、x-gal、x-gluc等
  
• 生物缓冲剂：Tricine、HEPES、MOPS、CAPS、TAPS、MES、BES等
  
• 表面活性剂与去污剂：SDS、SURFACTIN、EMPIGEN BB、CHAPS、SB-8至SB-18系列等
  
• 检测试剂：泛影酸钠、PCA钙、G-418硫酸盐、DTE、TCEP-HCl、PMSF、PNPP、ABTS、TMB、TMB-PS、鲁米诺、异鲁米诺、ABEI、MU-Gal、D-荧光素钾盐等
  
• 高纯生化试剂：DEPC、异硫氰酸胍、PMSF、MTT、BSA、WST-8等
  

湖南汇百益提供的PNPP-DiTris产品具有以下突出优势：

• 高纯度：HPLC纯度≥98%，批次稳定性好，显色性能优异
  
• 缓冲盐一体化：双-Tris盐结构，使用便捷，检测重现性高
  
• 低背景：严格控制游离对硝基苯酚含量，确保试剂空白低
  
• 高灵敏度：酶活性验证通过，检测灵敏度满足诊断试剂盒要求
  
• 现货供应：常备库存，支持快速发货，满足紧急生产需求
  
• 规格灵活：提供从克级到公斤级的产品，满足从科研到工业级生产的不同需求
  
• 专业包装：采用避光、密封、防潮包装，确保产品在运输和储存过程中的稳定性
  
• 技术支持：专业技术团队提供全程使用指导与问题解答
  
• 源头工厂：自产自销，具备价格优势和供应稳定性
  

八、采购与使用建议

在采购PNPP-DiTris（CAS 68189-42-4）时，建议重点关注以下几点：

1. 纯度要求：对于临床诊断试剂盒生产，建议选择HPLC纯度≥98%的产品，以确保检测结果的准确性和重复性。≥97%（enzymatic）也可满足常规检测需求。
   
2. 游离对硝基苯酚含量：优质的PNPP-DiTris应严格控制游离对硝基苯酚含量（≤0.1%），这是评价产品背景值的关键指标。
   
3. 水溶性验证：PNPP-DiTris应完全溶于水，100 mg/mL浓度下溶液应澄清透明，无不溶物。
   
4. 批间一致性：对于试剂盒的规模化生产，批间差异是关键质量指标，选择具备严格质量控制体系的供应商。
   
5. 供货稳定性：选择具备稳定供应链和可靠交付能力的供应商，确保长期稳定的原料供应。
   
6. 包装规格：常见规格包括1g、5g、25g、100g、1kg等。建议按需分装，避免反复冻融。
   
7. 储存条件：-20°C冷冻保存，避光防潮。本品在室温条件下可能自发水解，长期保存务必冷冻。
   
8. 使用建议：
   

九、联系我们

如需获取PNPP-DiTris（CAS 68189-42-4）的产品报价、样品或技术支持，请联系湖南汇百益新材料有限公司：

• 产品咨询：13319523173
  
• 订购邮箱：ivy@hnhbsj.com
  
• 官方网站：https://www.hbsjxcl.com/
  

声明：本产品仅供科研使用，不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书，并遵守实验室安全操作规范。