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3,3′,5,5′-四甲基联苯胺二盐酸盐水合物(TMB 2HCl·xH₂O)— 高纯度HRP显色底物,ELISA与IHC检测的理想选择

2026-04-16 10:12:44

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一、产品基本信息项目内容产品名称3,3‘,5,5’-四甲基联苯胺二盐酸盐水合物英文名称3,3‘,5,5’-Tetramethylbenzidine dihydr

一、产品基本信息

项目                                     内容



产品名称

3,3‘,5,5’-四甲基联苯胺二盐酸盐水合物

英文名称

3,3‘,5,5’-Tetramethylbenzidine dihydrochloride hydrate

CAS号

207738-08-7

分子式

C₁₆H₂₀N₂·2HCl·xH₂O

分子量

313.27(无水物) / 294.82(一水合物计)

外观

白色至类白色结晶粉末

纯度

≥98%(HPLC)

熔点

>300°C

溶解性

溶于醋酸:水(1:2)混合溶剂,0.1g/5mL

储存条件

2-8°C冷藏,避光防潮

用途

HRP显色底物,用于ELISA、IHC、Western Blotting

二、产品简介与核心优势

TMB二盐酸盐水合物是TMB(3,3‘,5,5’-四甲基联苯胺)的水溶性盐酸盐形式,也是一种高灵敏度的辣根过氧化物酶(HRP)显色底物。在HRP和过氧化氢存在下,TMB二盐酸盐被氧化生成可溶性的蓝绿色产物,加酸终止后变为亮黄色,可在450 nm处进行终点检测。

核心优势

  • 水溶性优异:与TMB游离碱不同,本品易溶于水及醋酸-水混合溶剂,无需有机溶剂助溶,使用方便
  • 检测灵敏度高:作为HRP的敏感显色底物,特别适用于ELISA和IHC实验中低丰度目标物的检测
  • 安全环保:联苯胺的非致癌性替代品(Ames试验阴性),使用安全,已在临床检验和法医鉴定等领域全面取代强致癌物联苯胺
  • 显色稳定:反应生成的蓝绿色产物稳定性好,背景值低,结果重复性高
  • 水合物形式:结晶水分子有助于产品在储存过程中的稳定性,减少吸潮风险

三、主要应用领域

3.1 ELISA酶联免疫检测(核心应用)

TMB二盐酸盐水合物是ELISA实验中HRP标记检测系统的经典显色底物。其显色反应基于H₂O₂存在下HRP催化氧化TMB,产生可溶性蓝色产物,在370 nm或620-650 nm处测定吸光度。加入酸性终止液(如2M H₂SO₄)后,蓝色变为黄色,在450 nm处进行终点检测。

该产品已广泛应用于各种ELISA检测方案中:

  • 传染病标志物检测(如乙肝、丙肝、HIV等)
  • 肿瘤标志物检测(如CA125、PSA、AFP等)
  • 自身免疫抗体检测
  • 细胞因子定量分析
  • 食品安全中兽药残留、农药残留的ELISA检测

3.2 免疫组化(IHC)与免疫细胞化学

TMB二盐酸盐水合物是免疫组化染色中检测HRP标记探针的优良比色底物。在组织切片或细胞样本中,经HRP标记的二抗与目标抗原结合后,加入TMB底物溶液,阳性部位呈现蓝色或蓝绿色染色,可在显微镜下观察。TMB强烈的脂溶性使其能够进入细胞和细胞器中,产生深蓝色的沉淀物,便于观察和分析。

IHC操作流程

  1. 样本与一抗孵育(通常4°C过夜)
  2. PBS洗涤后,加入HRP标记的二抗,孵育30分钟至1小时
  3. 加入TMB底物溶液(TMB二盐酸盐 + H₂O₂),显色10-30分钟
  4. 达到理想显色强度后,用终止液终止反应
  5. 显微镜观察,目标区域呈现蓝色或蓝绿色染色

3.3 Western Blotting

TMB二盐酸盐水合物也可作为Western Blotting中HRP标记二抗的显色底物,用于检测膜上的目标蛋白条带。显色反应在膜上产生不溶性沉淀,形成可见的条带。

3.4 血红蛋白定量检测

TMB二盐酸盐可用于定量检测血红蛋白(Hb)。在过氧化氢存在下,血红蛋白的过氧化物酶活性可催化TMB氧化显色,显色强度与血红蛋白浓度成正比,适用于临床实验室的Hb测定。

3.5 游离氯检测与环境监测

TMB二盐酸盐可作为游离氯的光谱试剂,用于水质检测中的余氯分析。

四、检测原理

TMB二盐酸盐水合物的检测原理基于辣根过氧化物酶(HRP)催化的氧化显色反应:

Step 1:在HRP催化下,TMB与过氧化氢发生单电子氧化反应,生成蓝绿色的阳离子自由基中间产物。

Step 2:该产物在370 nm和620-650 nm处有特征吸收峰,可通过分光光度法进行定量检测,吸光度强度与目标物浓度成正比。

Step 3:加入酸性终止液(如2M H₂SO₄或1% SDS溶液)后,反应产物转变为黄色的二亚胺末端氧化产物,最大吸收波长变为450 nm,适用于终点法测定。

五、TMB系列产品对比:如何选择?

湖南汇百益新材料有限公司提供完整的TMB系列显色底物产品线,您可根据实验需求选择合适的形式:



选择建议

  • 如果您需要水溶性好、储存稳定性高的TMB产品,且常用于ELISA和IHC实验,本品(CAS 207738-08-7)是理想选择
  • 水合物形式含有结晶水分子,在储存过程中更稳定,不易吸潮变质
  • 若您使用自动化检测系统或需要更高灵敏度,建议选择TMB-PS

六、产品质量标准

湖南汇百益新材料有限公司提供的TMB二盐酸盐水合物产品严格执行以下质量标准:

检测项目                                          质量指标



外观

白色至类白色结晶粉末

纯度(HPLC)

≥98.0%

熔点

>300°C

水分

≤6.0%

溶解性

0.1g/5mL溶于醋酸:水(1:2),溶液澄清

游离TMB含量

≤0.5%

湖南汇百益通过优化合成工艺与精制技术,将产物纯度稳定控制在≥98%(HPLC检测),关键杂质含量控制在极低水平,确保显色反应的背景值低、灵敏度高。其批间稳定性控制在±2%以内,适合ELISA试剂盒的规模化生产和IVD企业的原料采购需求。

七、TMB二盐酸盐水合物在IVD产业链中的战略地位

TMB类显色底物是体外诊断(IVD)试剂盒的核心原料之一,在免疫诊断领域具有不可替代的地位。

TMB二盐酸盐水合物作为TMB系列的重要成员,具有以下战略价值:

  • 水合物优势:结晶水分子使产品在长期储存中更加稳定,特别适合需要长期保存的试剂盒原料
  • 性价比高:相较于TMB-PS等高端衍生物,TMB二盐酸盐水合物在保证性能的同时具有更好的成本优势
  • 应用成熟:ELISA和IHC检测中最经典、最成熟的显色底物之一,技术验证充分
  • 安全环保:作为联苯胺的非致癌性替代品,已在临床检验、法医鉴定等领域全面取代传统致癌物

主要需求领域包括:

  • ELISA试剂盒生产(占比约45%)
  • IVD诊断原料供应(约32%)
  • 免疫组化试剂(约15%)
  • 科研试剂(约8%)

八、供应商介绍:湖南汇百益新材料有限公司

湖南汇百益新材料有限公司成立于2014年,位于怀化市洪江工业园,拥有50,000平方米生产基地。湖南汇百益新材料有限公司是一家专注于生物基础试剂研发、生产与销售的“国家高新技术”、“湖南省专精特新”企业,拥有独立研发试验中心和生产基地,并已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证。公司严格按照国际标准,不断完善硬件设施与质控流程,构建了全方位覆盖的精控生产体系,核心产品IPTG、DTT等高端生物原材料,质量已达国际先进水平。

依托强大的生产平台与技术实力,工厂可灵活提供OEM代工服务与个性化定制方案,如提纯、精致加工等,以满足客户多元化需求。旗下品牌“汇百试剂”,通过提供性能稳定可靠、品质媲美进口、成本更具优势的国产试剂,为生物医药、体外诊断、生物工程及科研机构等领域的客户提供基础材料解决方案,以实现关键生物基础试剂国产化替代与关键试剂本土化供应,切实解决中国生物试剂的供应瓶颈问题,并持续助力科研突破与产业创新升级。

 

  • 糖苷系列:IPTG、ONPG、PNPG、DTT、x-gal、x-gluc等
  • 生物缓冲剂:TRIS、HEPES、MOPS、CAPS、TAPS、ADA等
  • 诊断试剂原料:ABTS、TMB、TMB-HCl、TMB-PS、TTC等
  • 高纯生化试剂:DEPC、TCEP-HCl、异硫氰酸胍、PMSF、MTT、BSA等

湖南汇百益提供的TMB二盐酸盐水合物产品具有以下突出优势:

  • 高纯度:HPLC纯度≥98%,批次稳定性好,适合ELISA试剂盒的规模化生产
  • 水溶性良好:在醋酸-水体系中溶解迅速,使用方便
  • 水合物稳定:含结晶水形式,储存稳定性更佳,不易吸潮
  • 现货供应:常备库存,支持快速发货,满足紧急生产需求
  • 规格灵活:提供从克级到公斤级的产品,满足从科研到工业级生产的不同需求
  • 专业包装:采用避光、密封、防潮包装,确保产品在运输和储存过程中的稳定性
  • 技术支持:专业技术团队提供全程使用指导与问题解答

九、采购与使用建议

在采购TMB二盐酸盐水合物(CAS 207738-08-7)时,建议重点关注以下几点:

  1. 纯度要求:对于ELISA试剂盒生产和IVD诊断试剂等敏感应用场景,请选择HPLC纯度≥98%的产品,以确保检测结果的准确性和重复性。
  2. 水合物确认:本品为水合物形式(CAS 207738-08-7),与无水物TMB-HCl(CAS 64285-73-0)不同。水合物形式在储存过程中更稳定,不易吸潮。
  3. 溶解性验证:建议使用醋酸:水(1:2)混合溶剂进行溶解,0.1g/5mL应得到澄清溶液。
  4. 批间一致性:对于试剂盒的规模化生产,批间差异是关键质量指标。选择具备严格质量控制和稳定结晶技术的供应商,批间差应控制在±2%以内。
  5. 供货稳定性:选择具备稳定供应链和可靠交付能力的供应商,确保长期稳定的原料供应。
  6. 包装规格:根据实验用量选择合适的包装规格,常见规格包括1g、5g、25g、100g、1kg等。建议按需分装储存,避免反复冻融。
  7. 储存条件:收到产品后请立即2-8°C冷藏、避光防潮保存,远离金属。TMB对光敏感,应避免长时间暴露于强光下。
  8. 使用建议

十、联系我们

如需获取TMB二盐酸盐水合物(CAS 207738-08-7)的产品报价、样品或技术支持,请联系湖南汇百益新材料有限公司:


声明:本产品仅供科研使用,不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书,并遵守实验室安全操作规范。


作者: 湖南汇百益新材料有限公司
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3,3′,5,5′-四甲基联苯胺二盐酸盐水合物(TMB 2HCl·xH₂O)— 高纯度HRP显色底物,ELISA与IHC检测的理想选择
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