2023-12-11 13:53:38
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在生物化学领域中哌嗪-1,4-二乙磺酸PIPES(CAS:5625-37-6)是一种非常重要的缓冲剂,它不同于其他含有二(2-羟乙基)氨基基团的缓冲剂,如Bis-tris和Bicine。PIPES与多数金属离子不能形成稳定配合物,因此适用于含有金属离子的溶液体系中的缓冲剂。

根据已有的研究结果,PIPES被广泛应用于许多不同的应用中。例如,它可以被应用于使用磷酸纤维素色谱纯化微管蛋白。此外,它还可以用于凝胶过滤法纯化重组GTP结合蛋白ARF1和ARF2,以及作为缓冲液从大肠杆菌中结晶转酮酶。
然而,需要注意的是,由于PIPES能形成自由基,因此不适合应用于氧化还原体系。在阳离子交换色谱法中,应当使用低浓度的PIPES缓冲液,这是因为PIPES具有相对较大的离子强度,而且其pKa值具有浓度依赖性。
PIPES的pKa值接近生理pH,这意味着在通过细胞膜的时候它不能被吸收,而且可以透过紫外线。因此,它可以应用于体外细胞培养基。在乳酸氧化酶法测定血浆中乳酸的研究中,发现37℃时PIPES能稳定172小时,这优于Tris只能稳定72小时的表现。此外,用PIPES缓冲液配制的PI染液可以染色新鲜细胞,这可以对临床肿瘤的细胞增殖状况和DNA倍性进行分析。
在免疫荧光标记时,可以用50 mmol/L PIPES缓冲液配制的4%多聚甲醛进行固定。此外,PIPES还可以满足当腺苷二磷酸(ADP)结合于松弛的扇形成肌纤维细胞时,需要极低的络合二价阳离子的条件。它可以作为缓冲液应用于鼠肝脏过氧化物酶体中尿酸氧化酶超微结构的定位。此外,PIPES还可以诱导纯化的微管蛋白的聚合作用。
尽管PIPES在科研领域中有着广泛的应用,但是必须注意的是,严禁将其用于人体。此外,尽管PIPES在某些生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒中被用作成分,但它仍然是一种科研用化学品,而非人体消耗品。
总的来说,PIPES是一种具有独特特性的缓冲剂,在生物化学、分子生物学和药理学等领域中被广泛应用。然而,尽管它具有许多优点,但是在使用过程中必须注意其可能存在的风险和限制。
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