核酸电泳常用缓冲液配制方法（二)
2023-10-16 13:52:17
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一、50×TAE Buffer (pH8.5)试 剂 名 称用 量终浓度去离子水至1000ml/Tris242g2MNa2EDTA•2H2O37.2g100mM
”
七、20×SSC
试 剂 名 称 | 用 量 | 终浓度 |
去离子水 | 至1000ml | / |
氯化钠 | 175.3g | 3.0M |
Na3citrate•2H2O(柠檬酸钠) | 88.2g | 0.3M |
配制方法：
1.先将上述试剂加入约800ml去离子水中，充分搅拌溶解；
2.用14 N HCl调节pH值至7.0后，定容至1 L。
3.高温高压灭菌，室温保存。
八、20×SSPE Buffer
试 剂 名 称 | 用 量 | 终浓度 |
去离子水 | 至1000ml | / |
氯化钠 | 175.3g | 3.0M |
NaH2PO4•H2O | 27.6 g | 0.2M |
Na2EDTA•2H2O | 7.4 g | 0.02M |
配制方法：
1.先将上述试剂加入约800ml去离子水中，充分搅拌溶解；
2.用NaON调节pH值至7.4后，定容至1 L。
3.高温高压灭菌，室温保存。
九、50 X Denhardt'S溶液
试 剂 名 称 | 用 量 | 终浓度 |
去离子水 | 至500ml | / |
Ficoll 400 | 5g | 1%(w/v) |
PoLyvlnylpyrrolldone | 5g | 1%(w/v) |
BSA | 5g | 1%(w/v) |
配制方法：
1.先将上述试剂加入约400ml去离子水中，充分搅拌溶解；定容至500mL。
2.用0.45µm滤膜过滤后，分装成每份25 ml,-20℃保存。
十、0.5 M磷酸盐Buffer
试 剂 名 称 | 用 量 | 终浓度 |
去离子水 | 至1000ml | / |
Na2HPO4•7H2O | 134 g | 0.5M |
配制方法：
1.先将上述试剂加入约800ml去离子水中，充分搅拌溶解；
2.加入85%的H3PO4(浓磷酸)调节溶液pH值至7.2，定容至1 L。
3.高温高压灭菌，室温保存。
十一、DNA变性缓冲液
试 剂 名 称 | 用 量 | 终浓度 |
去离子水 | 至1000ml | / |
氯化钠 | 87.7g | 1.5M |
NaOH | 20 g | 0.5M |
配制方法：
1.先将上述试剂加入约800ml去离子水中，充分搅拌溶解；
2.定容至1 L，室温保存。
十二、预杂交液/杂交液 (DNA杂交用)
试 剂 名 称 | 用 量 | 终浓度 |
20×SSC(或SSPE) | 30ml | 6× |
50×Denhardt’s | 10ml | 5× |
10% SDS | 5ml | 0.5%(w/v) |
10 mg/ml Salmon DNA | 1ml | 100ug/ml |
dH2O | 54ml | / |
配制方法：
1.先将上述试剂充分混匀后，0.45μm过滤。
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