缓冲液PBS、Tris-HCL、HEPES的配制方法介绍！

在一些分析实验中，缓冲溶剂成为了不可缺少的溶液，之所以很重要，就是因为性能的特殊，它可以对外界因素的干扰有一定的抵抗性。正如在生化反应中，很多时候需要一个稳定的酸碱环境，不能因外界物质的添加而有所改变，而缓冲液就可以达到稳定PH值的目的，使得检测物在适应的环境下生存反应，保证实验进程。所以在各类实验里，操作人员需要慎重进行选择和配制，下面先重点给大家介绍一下常用缓冲液的配制方法。

一、缓冲液制备

如果需要配制一定酸碱性的溶剂，首先依据情况必须选定是弱酸性溶液还是强碱性溶液，它的pKa值也需要尽可能地接近所需配制溶液的pH值，然后计算酸碱的浓度比，根据此浓度比再进行配制即可。

二、缓冲液配制

1、PBS缓冲液

PBS的缓冲PH范围较为广泛，它可以用于配置不同酸碱性的溶液，也是很常见的缓冲体系。此溶液的配置方法会分情况，如果是酸性溶液可直接用NaH₂PO₄或KH₂PO₄进行混合即可，PH范围在1-5之间；若是碱性溶液则需使用Na₂HPO₄或K₂HPO₄配制，PH范围在9-12之间。

2、Tris-HCl缓冲液

如果是使用1M的Tris-HCl，PH值范围在7.4-8.0之间配制溶液1000ml，其配制方法如下：

1. 称取120g左右的 Tris倒进1000毫升的烧杯中；
2. 然后加入800毫升左右的纯净水进行充分搅拌，直至完全溶解；
3. 根据浓度计算表，加入适量的HCl，然后调节至所需要的PH值，将溶液定容至1000ml。
4. 注意经过高温高压灭菌以后，室温保存。

3、 HEPES缓冲液

因其缓冲范围在中性范围内，可以在盛装器具敞开的情况下保持稳定的PH值，所以常被用于细胞培育和生化诊断试剂中。如果是要配置1M，pH值为7.0的溶液，其配制方法为：

1. 大概称取120g的HEPES粉末，倒进容器中；
2. 使用纯净水将其充分溶解在400mL的瓶中；
3. 加入NaOH溶液混合，然后将pH值调整至7.0；
4. 将溶液定容至500mL，常温下保存即可，注意即配即用；
   
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