Bincine缓冲液的配制方法

缓冲液是一种能在加入少量酸或碱和水时抵抗pH改变的溶液.PH缓冲系统对维持生物的正常pH值,正常生理环境起重要作用.多数细胞仅能在很窄的pH范围内进行活动,而且需要有缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化.在生物体中有三种主要的pH缓冲体系,它们时蛋白质、重碳酸盐缓冲体系.每种缓冲体系所占的分量在各类细胞和器官中是不同的.

在生化研究工作中,常常要用到缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度.研究工作的溶液体系pH值的变化往往直接影响到我们工作的成效.如果提取酶实验体系的pH值变化或变化过大,会使酶活性下降甚至完全失活.所以我们要学会配制缓冲液.

Bicine作为常用生物缓冲液的一种，它是一种两性氨基酸缓冲剂，中文名N,N-二羟乙基甘氨酸，在pH7.6-9.0范围内（25°C时pKa为8.3）有活性。低温生化工作的推荐缓冲液。比卡因用于制备稳定的血清鸟苷酶底物溶液。已发表了在薄层离子交换色谱法中使用二氢吡啶进行蛋白质分离的方法。二氢吡啶已被用于肽和蛋白质结晶。

Bicine溶液(约1-2L) 的配制方法：

(1)配0.1M溶液(A): Bicine 16.317g/去离子水 1,000ml

(2)配0.1M NaOH溶液(B):NaOH 4g/去离子水 1,000ml

(3)pH 5.1 1,000ml(A)+0ml(B) (A):(B)=5:0

pH 7.8 1,000ml(A)+200ml(B) (A):(B)=5:1

pH 8.2 1,000ml(A)+400ml(B) (A):(B)=5:2

pH 8.6 1,000ml(A)+600ml(B) (A):(B)=5:3

pH 10.4 1,000ml(A)+800ml(B) (A):(B)=5:4

*温度20度。

*如果需要调整到特定的pH值,请使用pH计。

*不想加入Na,请使用KOH。

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