CHAPS|CAS：75621-03-3|在蛋白提取领域的应用

3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸内盐（英文简称：CHAPS，CAS：75621-03-3）是分子式为C32H58N2O7S，分子量为614.877的一种有机物。CHAPS 是一种两性离子去污剂，广泛用于蛋白质纯化过程， CHAPS还能在生化研究中用于变性裂解细胞，提取RNA和DNA；另外，CHAPS还可用于缓冲液的配制。CN106478786A专利中公开了一种脱硫杆菌胞内有效蛋白的提取方法，CHAPS在该专利中作为两性表面活性剂。该方案具体步骤如下：

3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸内盐分子式

(1)脱硫杆菌活化培养、液体发酵培养，取发酵液，离心，去除上清液，收集下层沉淀；

       (2)取步骤(1)中下层沉淀，加入1～2mL/g裂解液（裂解液为尿素、两性表面活性剂和还原保护剂的水溶液，其中两性表面活性剂为CHAPS），在0～4℃条件下磁力搅拌，放入-18～-22℃冷冻8～10小时；

       (3)将步骤(2)中的冷冻物质，在0～4℃条件下超声破碎，后再次放入-18～-22℃冷冻8～10小时；

       (4)将步骤(3)中得到的冷冻物质，在0～4℃条件下超声破碎，离心；

       (5)取步骤(4)中离心得到的上清蛋白溶液，加入有机混合溶液，充分混匀震荡后离心；

       (6) 将步骤(5)中的离心后混合物，去除上清液，加入有机溶剂，充分混匀震荡，将混液离心；

       (7)重复操作步骤(6)2～4次，将得到的离心后的混合物，去除上清液，冻干机冷冻干燥，密闭，0～4℃冷藏保存。

       本专利通过发酵液离心分离、细胞破碎、蛋白提取与纯化实现脱硫杆菌胞内有效蛋白的分离纯化，是一种易于操作、成本低、安全可靠的提取方法。

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