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双(2-羟乙基)氨基(三羟甲基)甲烷(BIS-TRIS)是一种在生物化学实验中常用的缓冲剂,常用于检测肌酸肌酶、肌酸磷酸激酶。随着温度的变化其解离常数只发生细微的变化。Bis-Tris的有效pH缓冲范围为5.8-7.2,pKa=6.5(25℃),结构类似于Trizma(“Tris”),并由此得名。适用于血红蛋白的分离。
BIS-TRIS缓冲剂具有以下特点:
1.组成明确,分子式清晰,纯度高,易于提纯和精制;
2. 缓冲容量大,具有较高的缓冲能力;
3. 稳定性好,不易变质,易于保存;
4. 对生物大分子具有较好的溶解性,不易引起沉淀;
5. 与多种金属离子配位能力强,形成稳定的配合物。
BIS-TRIS缓冲剂的应用范围广泛,主要应用于以下方面:
1、维持溶液的pH值稳定:BIS-TRIS是一种有效的缓冲剂,可以维持溶液的pH值稳定,特别是在一些对pH值敏感的生物化学实验中,如蛋白质的分离和纯化、酶活性测定等。
2. 与金属离子配位:BIS-TRIS可以与多种金属离子配位,形成稳定的配合物,如Zn2+-BIS-TRIS、Mn2+-BIS-TRIS等。这些配合物在生物大分子的结构和功能研究中具有重要作用,如蛋白质的结构解析、DNA的测序等。
3. 生物分子的分离和纯化:BIS-TRIS常用于生物分子的分离和纯化过程,如蛋白质的层析分离、DNA的纯化等。它能够有效地提高分离和纯化的效果,保证生物分子的质量和纯度。
4. 生物样品的储存:BIS-TRIS还可以用于生物样品的储存。将生物样品与BIS-TRIS一起加入适量的缓冲液中,可以有效地维持生物样品的活性和稳定性,以便后续的分析和研究。
总之,BIS-TRIS缓冲剂作为一种重要的生物化学试剂,在生物实验中具有广泛的应用价值。它的组成明确、纯度高、稳定性好、溶解性好以及与金属离子配位能力强等特点使其成为生物实验中不可或缺的一种试剂。同时,随着生物化学实验技术的不断发展,BIS-TRIS缓冲剂的应用前景也将越来越广阔。
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