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详细信息
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5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-半乳糖苷(X-GAL)是一种广泛使用的 β-半乳糖苷酶的发色底物。在酶活性位点产生深蓝色沉淀物。X-GAL在组织化学和分子生物学应用领域广泛使用,包括细胞和组织中 lacZ 活性的检测。与作为基因标志物的 β-葡糖苷酸酶不同,可使用戊二醛将 β-半乳糖苷酶固定在细胞和组织中,而不会损失活性,且可使用 X-Gal 通过高分辨率检出。
分子结构图:
物理化学性质:
外观性状:白色结晶或结晶性粉末,无异臭,带有甜味
溶解性:易溶于水(16.5%,25℃),不溶于或丙酮。
熔点:314.5 °C (dec.)(lit.)
比旋光度 :14.5 º (c=10,6N HCl,dry sub.)
密度:1,432 g/cm3
溶解度 :H2O: 100 mg/mL
水溶解性:166.5 g/L (25 ºC)
沸点:503.5°C at 760 mmHg
蒸汽压:2.88E-10mmHg at 25°C
闪点: 258.3°C
使用方法:
1、X-GAL储存液配制
称取0.2g X-GAL装入15ml离心管,加入10ml DMF,震荡使其充分溶解。按照1ml/管分装,并用铝箔纸包裹离心管使其避光,置于-20℃冻存,正常情况下6-12个月稳定。
2、IPTG储存液配制
称取0.238g IPTG 溶于10ml去离子水中,充分溶解混匀后,经0.22μm滤膜过滤除菌,即得到100mM(100×)的储存液。按照1ml/管分装,置于-20℃冻存,高达一年稳定。
3、蓝白斑筛选方法
X-Gal常与IPTG联合使用进行蓝白斑克隆筛选。
一、方法1:X-GAL、IPTG加入固体培养基(推荐)
(1)高压灭菌已加琼脂的培养基,并冷却到50℃左右;
(2)每ml培养基内加入10μl 20mg/ml X-GAL溶液、10μl 100mM IPTG(使其终浓度达到1mM);
(3)加入适量筛选抗生素如氨苄青霉素,卡那霉素,羧苄青霉素等;
(4)混匀后倒板,置于无菌超净台内使培养基凝固(通常需要30min)。
注意:蓝白斑筛选用的平板请置于4℃避光保存,1周稳定。
(5)将转化的感受态细胞涂布到上述平台,于37℃倒置培养过夜,观察蓝白斑情况。
二、方法2:X-Gal、IPTG直接涂布平板表面
(1)于无菌超净台内干燥倒好的平板;
(2)加120μl 20mg/ml X-GAL溶液、40μl 100mM IPTG到平板表面,并涂布均匀覆盖整个平板;
(3)于无菌超净台内干燥上述平板,至少需要30min;
(4)将转化的感受态细胞涂布到上述平台,于37℃倒置培养过夜,观察蓝白斑情况。
产品用途和应用领域:
(1)食品饮料方面用作防腐剂、风味调味料及氨基酸低度酒等,医药方面用于合成氨基酸输液
(2)用作食品添加剂,饲料、医药中间体
(3)作增味剂,能增加化学调味品的调味效果;还可作酸味矫正剂,改善有机酸的酸味。
(4)用于生化研究,医药上用作氨基酸类营养药。
(5)营养增补剂。属于非必需氨基酸,是血液中含量***多的一种氨基酸,有重要生理作用。调味增香剂。用于未发酵制品、合成清酒、复合型甜味料等,有明显增效作用,用量一般为0.01%~0.03%。与糖进行加热反应(氨基一羰基反应),可生成特殊的香味物质。
(6)本品为制造维生素B6、合成泛酸钙和其他有机化合物原料。添加于食品中能增强化学调味料的调味效果,改善甜味剂的味感和有机酸的酸味,提高含醇饮料的质量,防止油类氧化和改善浸渍食品风味等。还可用作生化试剂,用于生物化学和微生物研究方面。
(7)生化研究。组织培养。肝功能测定。属于非必需氨基酸,是血液中含量***多的一种氨基酸,有重要生理作用。
储存/保存方法:
-20° C,避光防潮密闭干燥,有效期2年。
注意事项:
(1)X-Gal的***溶剂为DMF。若使用DMSO作为溶剂,选择相对新鲜且高质量的DMSO极为重要,持续性的研究发现由于使用旧或低质量DMSO造成很多问题。建议大部分实验都用DMF作为溶剂。
(2)贮藏:储存在密闭的容器中。储存于阴凉,干燥,通风良好的地方远离不相容物质。
湖南汇百益提供5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-半乳糖苷(CAS:7240-90-6)的研发、生产和销售,50000平源头实力厂家,库存充足,可定制,可寄样品,如您需要采购相关产品或需要了解相关技术问题,欢迎拨打网站上电话与我们联系!