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〈3-吗啉丙磺酸〉简称为MOPS,是生物化学和分子生物学中常用的一种两性离子缓冲试剂,MOPS本身属于Good’s缓冲剂,不仅可以用作细胞培养基的缓冲体系,而且是常见的电泳缓冲液和蛋白纯化色谱缓冲液。
MOPS可用于哪些实验?
(1)作为电泳中的运行缓冲液和用于色谱中的蛋白质纯化;
(2)配制成多种琼脂培养基,用于细菌,酵母和哺乳动物细胞的培养。但是,高于20mM的浓度不推荐用于哺乳动物细胞;
(3)可用作大肠杆菌细胞的裂解缓冲液;
(4)作为凝胶过滤色谱中的洗脱液;
(5)应用于Northern杂交,作为RNA的分离和转膜时的缓冲液;
(6)适用于二喹啉甲酸(BCA)测定;
(7)用于叶绿体薄层备样的电子传递和磷酸化研究。
(8)可用于生化诊断试剂盒,比如DNA/RNA提取试剂盒、PCR试剂盒、测定肌酐的试剂盒等。
MOPS运输和保存
MOPS粉末可于室温保存数年。不过一经静置,散装粉末可能聚集在一起,形成硬块,但是不会影响其化学性质。MOPS溶液可于2-8℃保存至少6个月,用0.2 μm滤膜过滤除菌,不推荐高压灭菌。如需配制无核酸酶的MOPS溶液,可先对水进行高压灭菌后,再加入粉末溶解。
MOPS缓冲剂的特点
(1)在水溶液中有良好的溶解性,水溶液无色透明;
(2)在化学上稳定,对生物没有毒性且对生物膜无明显的渗透作用;
(3)酸碱解离常数(pKa值)稳定,一般在6-8,释放质子的能力稳定,且受离子浓度、溶液组成和温度的影响较小;
(4)不是生化反应系列的代谢物、激活剂或者抑制剂,也不是酶的底物,即与多种酶和化学试剂不发生反应,用于组织培养、病毒诊断等试验时,细胞表现出较高的生命力;
(5)在紫外波实际上无特征吸收,在波长小于230-240nm时才有微弱的吸收,因而不干扰通常的光度法测量;
(6)对阳离子无络合能力或者微弱的络合能力。
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