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Tricine,中文名为三(羟甲基)甲基甘氨酸,是一种两性离子缓冲试剂,名字由Tris和glycine衍生而来,结构类似于Tris,但是高浓度具有比Tris更弱的抑制性,也是Good’s缓冲试剂之一,***初开发用于提供叶绿体反应的缓冲体系。
Tricine常用作电泳缓冲液
Tricine的有效pH缓冲范围为7.4-8.8,pKa=8.1(25 ℃),常用做电泳缓冲液,以及用来重悬细胞沉淀。Tricine具有低负电荷和高离子强度的特性,非常适用于电泳分离1~100 kDa的低分子量蛋白。基于萤火虫荧光素酶的ATP分析实验中,比较10种常见的缓冲液,Tricine(25 mM)表现出***的检测效果。另外,在自由基诱导的膜损伤实验中,Tricine还是一种有效的羟自由基清除剂。
Tricine在生化诊断试剂盒中的应用
三(羟甲基)甲基甘氨酸Tricine,在生化研究中,常用于生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒中,N-三(羟甲基)甲基甘氨酸可抑制核酸酶的活性以及维持细胞渗透压,其对DNA在经过长时间保存后仍能保持其完整性和高品质、并可用于长片段扩增有着主要贡献,另外,N-三(羟甲基)甲基甘氨酸也有广谱抑菌作用。
N-三(羟甲基)甲基甘氨酸作为助螯合剂,与主螯合剂肼基联氨基烟酰胺进行螯合。
另外,Tricine还可作为一种两性电解质用来制备PAAG,PAAG广泛用于生物技术实验室,用于处理生物样品,以分离该样品中存在的生物分子以供于鉴定,并且在一些情况中,用于定量分离的物质。
Tricine在药物制剂领域的应用
CN108653204B专利中介绍了一种Tricine在药物制剂领域的应用,该专利中的多烯磷脂酰胆碱注射液组合物可用于治疗多种急慢性肝脏疾病,其成分及制备步骤如下:
多烯磷脂酰胆碱注射液组合物每10L注射液含有以下成分:
多烯磷脂酰胆碱:300-900g;
甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺:20-25g;
胆固醇:20-40g;
Tricine:35-50g;
精氨酸:10-15g;
注射用水:1-6L;
大豆油:2-4L;
抗氧剂:0.5-5g;
发明人在研究中发现,特定配比的Tricine、精氨酸的加入对于解决本发明技术问题很重要,缺少其中一种稀释时都容易有浑浊现象发生;而且精氨酸与Tricine的重量比在1:1-1:6范围内比较合适,超出此范围稀释时也会出现浑浊。
将处方量的多烯磷脂酰胆碱、甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺、胆固醇、大豆油、抗氧剂混合后用超声溶解,溶液温度控制在40℃以下,再加入处方量的Tricine、精氨酸及总配液量40%的注射用水,搅拌至澄明液体,针用活性炭粗滤,补加水至足量,搅拌均匀,微孔滤膜滤过,检查合格后,灌装于安瓿中,充氮熔封,灭菌,即得。
本发明提供的多烯磷脂酰胆碱注射液药物组合物及其制备方法,所述组合物包含多烯磷脂酰胆碱、甲氧基聚乙二醇磷脂酰乙醇胺、N三(羟甲基)甲基甘氨酸、精氨酸、胆固醇、注射用水、大豆油、抗氧剂等,制得的多烯磷脂酰胆碱注射液药物组合物澄明度好,稳定性高,其在临床使用进行稀释时不会变浑浊,提高了临床应用的安全性,改善了患者用药的顺应性,制备全过程无须氮气保护,生产工艺简便易行,易于实现工业化。
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