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详细信息


核酸电泳常用缓冲液配制方法(二)

一、50×TAE Buffer (pH8.5)试 剂 名 称用 量终浓度去离子水至1000ml/Tris242g2MNa2EDTA•2H2O37.2g100mM

七、20×SSC

试 剂 名 称

           用 量

终浓度

去离子水

          至1000ml

/

氯化钠

          175.3g

3.0M

Na3citrate•2H2O(柠檬酸钠)

         88.2g

0.3M

配制方法:

1.先将上述试剂加入约800ml去离子水中,充分搅拌溶解;

2.用14 N HCl调节pH值至7.0后,定容至1 L。

3.高温高压灭菌,室温保存。


八、20×SSPE Buffer

试 剂 名 称

用 量

终浓度

去离子水

至1000ml

/

氯化钠

175.3g

3.0M

NaH2PO4•H2O

27.6 g

0.2M

Na2EDTA•2H2O

7.4 g

0.02M

配制方法:

1.先将上述试剂加入约800ml去离子水中,充分搅拌溶解;

2.用NaON调节pH值至7.4后,定容至1 L。

3.高温高压灭菌,室温保存。


九、50 X Denhardt'S溶液

试 剂 名 称

用 量

终浓度

去离子水

至500ml

/

Ficoll 400

5g

1%(w/v)

PoLyvlnylpyrrolldone

5g

1%(w/v)

BSA

5g

1%(w/v)

配制方法:

1.先将上述试剂加入约400ml去离子水中,充分搅拌溶解;定容至500mL。

2.用0.45µm滤膜过滤后,分装成每份25 ml,-20℃保存。


十、0.5 M磷酸盐Buffer

试 剂 名 称

用 量

终浓度

去离子水

至1000ml

/

Na2HPO4•7H2O

134 g

0.5M

配制方法:

1.先将上述试剂加入约800ml去离子水中,充分搅拌溶解;

2.加入85%的H3PO4(浓磷酸)调节溶液pH值至7.2,定容至1 L。

3.高温高压灭菌,室温保存。


十一、DNA变性缓冲液

试 剂 名 称

用 量

终浓度

去离子水

至1000ml

/

氯化钠

87.7g

1.5M

NaOH

20 g

0.5M

配制方法:

1.先将上述试剂加入约800ml去离子水中,充分搅拌溶解;

2.定容至1 L,室温保存。


十二、预杂交液/杂交液 (DNA杂交用)

试 剂 名 称

用 量

终浓度

20×SSC(或SSPE)

30ml

50×Denhardt’s

10ml

10% SDS

5ml

0.5%(w/v)

10 mg/ml Salmon DNA

1ml

100ug/ml

dH2O

54ml

/

配制方法:

1.先将上述试剂充分混匀后,0.45μm过滤。

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