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详细信息
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一、50×TAE Buffer (pH8.5)
试 剂 名 称 | 用 量 | 终浓度 |
去离子水 | 至1000ml | / |
Tris | 242g | 2M |
Na2EDTA•2H2O | 37.2g | 100mM |
乙酸 | 57.1ml | / |
配制方法:先将Tris和Na2EDTA•2H2O在800ml超纯水中搅拌溶解,后加入乙酸并充分搅拌,用超纯水定容至1L即可。
二、10×TBE Buffer (pH8.3)
试 剂 名 称 | 用 量 | 终浓度 |
去离子水 | 至1000ml | / |
Tris | 108g | 890 mM Tris-硼酸 |
Na2EDTA•2H2O | 7.44g | 20mM |
硼酸 | 55g | / |
配制方法:先将上述试剂在800ml超纯水中搅拌溶解,再用超纯水定容至1L即可。
三、10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer
试 剂 名 称 | 用 量 | 终浓度 |
DEPC处理水 | 至1000ml | / |
MOPS | 41.8g | 200mM |
1 M NaOAc(DEPC处理) | 20ml | 20mM |
0.5 M EDTA(pH8.0)(DEPC处理) | 20ml | 10mM |
配制方法:
1.先将MOPS在700ml DEPC处理水中搅拌溶解,用2N NaOH调节PH至7.0;
2.再向溶液中加入NaOAc和EDTA,纯化水定容至1L;
3.用0.45μm滤膜过滤,室温避光保存。
注:溶液见光或高温灭菌后会变黄。变黄时也可使用,但变黑时不要使用。
四、溴乙锭 (10 mg/ml)
试 剂 名 称 | 用 量 |
去离子水 | 至100ml |
溴乙锭 | 1g |
配制方法:
1.先将溴乙锭在100ml去离子水中搅拌至完全溶解(约数小时),后转移至棕色瓶中室温避光保存。
2.使用时的工作浓度是0.5g/ml
3.溴乙锭是一种致癌物质,须注意安全。
五、6 × Loading Buffer(DNA电泳用)
试 剂 名 称 | 用 量 | 终浓度 |
去离子水 | 至500ml | / |
EDTA | 4.4g | 30mM |
Bromophenol Blue | 250 mg | 0.05%(w/v) |
Xylene Cyanol FF | 250 mg | 0.05%(w/v) |
甘油(Glycerol) | 180 ml | 36%(v/v) |
配制方法:
1.先将除甘油外的其他试剂在200ml去离子水中加热搅拌至充分溶解
2.再加入甘油180ml,用2N NaOH调节PH至7.0;
3.定容至500ml,室温保存。
六、10 × Loadlng Buffer (RNA电泳用)
试 剂 名 称 | 用 量 | 终浓度 |
DEPC处理水 | 至10ml | / |
0.5 M EDTA(pH8.0) | 200 ul | 10mM |
Bromophenol Blue | 25 mg | 0.25%(w/v) |
Xylene Cyanol FF | 25 mg | 0.25%(w/v) |
配制方法:
1.先将上述试剂加入有约4ml DEPC处理水的离心管中,充分搅拌溶解;
2.再加入甘油5ml,充分混匀;
3.定容至10ml,室温保存。