您必须了解的二硫苏糖醇 (DTT) 应用

二硫苏糖醇（DTT）又称克莱兰德试剂，是一种小分子氧化还原试剂。其氧化形式是二硫键键合的六元环。它用于分解蛋白质二硫键并稳定酶和其他蛋白质。DTT 是一种小分子，是二硫赤藓糖醇 (DTE) 的差向异构化合物。这些还原剂产品由 湖南汇百益 提供。

作用机制

DTT 参与二硫键交换反应。DTT 在 1-10 mM 范围内用于蛋白质 SS 还原，并且能够穿过生物膜。

还原性

二硫苏糖醇是一种强还原剂，pH 7 时氧化还原电位为 -0.33 V。二硫键还原后会发生两个连续的硫醇-二硫键交换反应（参见下图 2）。由于 DTT 中的第二个硫醇具有增加的闭环倾向，因此还原通常会持续经过混合二硫化物物质。这会导致氧化 DTT 的形成并留下还原的二硫键。DTT 的还原能力仅限于 pH 值大于 7，因为只有带负电的硫醇盐形式才具有反应性。硫醇基团的 pKa 值为 9.2 和 10.1。

使用 DTT（二硫苏糖醇）还原蛋白质或肽的方案

减少蛋白质或肽溶液中半胱氨酸的通用方案

用水配制 1M 二硫苏糖醇 DTT 原液，最好新鲜配制（尽量不要吸入 DTT）。

将 DTT 添加到蛋白质或肽溶液（缓冲液中）中，直至最终浓度为 1mM 至 10mM DTT。孵育 10 分钟。至 30 分钟 如果在较高温度（例如 37 摄氏度或 56 摄氏度）下孵育，还原效果可能会稍好一些。但是，室温或冰也应该起作用。

烷基化前还原溶液中的蛋白质或肽

如上所述减少蛋白质。

以比 DTT 使用的浓度至少高 3 倍的 NEM 摩尔浓度孵育二硫键还原的蛋白质或肽样品。孵育 30 分钟。至 1 小时。

如果需要，透析掉 DTT 或 NEM。

溶解度

DTT 极易溶于水，形成澄清溶液。DTT也可溶于乙醇、氯仿、乙酸乙酯等。

DTT 使用的推荐浓度

在大多数应用中，二硫苏糖醇可以作为 2-巯基乙醇的替代品。      

储存与稳定性

DTT溶液应每天新鲜配制。如果储存不当（包括室温和溶液形式），其还原能力可能会降低。尽管与其他还原剂相比，DTT 被空气直接氧化的可能性较低，但应尽量减少与空气的接触。

记录的 DTT 溶液在不同 pH 值和温度下的半衰期（全部在 M 磷酸钾缓冲液中）：

• pH 6.5 @ 20°C = 40 小时
  
• pH 7.5 @ 20°C = 10 小时
  
• pH 8.5 @ 20°C = 1.4 小时
  
• pH 8.5 @ 0°C = 11 小时
  
• pH 8.5 @ 40°C = 0.2 小时
  
• pH 8.5 @20°C (+0.1 mM Cu 2+ ) = 0.6 小时
  
• pH 8.5 @20°C (+0.1 mM EDTA) = 4 小时
  

注意：随着 pH 值的降低，DTT 的还原剂效力逐渐减弱。TCEP HCl是一种替代还原剂，更稳定，即使在低 pH 条件下也能发挥作用。了解更多（DDT 与 TCEP）

 DTT的应用

蛋白质组学/蛋白质科学

DTT 常用于二硫键交换反应的研究，以在电泳分析前还原蛋白质的二硫键并重建蛋白质。去除 DTT 的过程是通过透析或凝胶过滤等脱盐程序进行的。

DTT 阻止半胱氨酸残基之间分子内和分子间二硫键的形成。可以使用额外的变性技术（例如升高温度或添加强变性剂）进一步靶向溶剂无法接触的二硫键

抗氧化剂

作为一种抗氧化剂，DTT 被用作活细胞中抵御电离辐射的保护剂

硫醇化DNA

硫醇化 DNA 在存在氧气的溶液中形成二聚体，导致偶联反应降低。例如，DNA 可以固定在生物传感器中的金上。二硫苏糖醇会与 DNA 溶液发生反应，然后通过过滤或色谱法去除。

细胞凋亡

下图显示了不同试剂影响硝普钠和S-亚硝基-N-乙酰青霉胺分解或抑制其作用的位置。二硫苏糖醇加速S-亚硝基-N-乙酰青霉胺和硝普钠的分解。血红蛋白 (Hb) 可阻断 S-亚硝基-N-乙酰青霉胺的作用。超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（cat）和去铁胺（DFO）抑制硝普钠的作用。

生物燃料

研究发现 DTT 可用于提高生物燃料生产乙醇的效率。此处的附加阅读：还原剂二硫苏糖醇对梭菌菌株 P11 生产乙醇和乙酸的影响。生物燃料，特别是生物乙醇，已经作为燃料添加剂用于运输行业。生物乙醇是用玉米和其他富含淀粉的原料进行商业生产的。在巴西，生物燃料是用甘蔗生产的。目前正在进行关于从其他糖料作物生产生物乙醇的研究。

氧化剂

二硫苏糖醇用作氧化剂以防止混合二硫化物种类的聚集。在某些情况下，二硫苏糖醇可能形成加合物，导致其不环化，因为没有剩余的游离硫醇。

二硫苏糖醇（DTT）又称克莱兰德试剂，是一种小分子氧化还原试剂。其氧化形式是二硫键键合的六元环。它用于分解蛋白质二硫键并稳定酶和其他蛋白质。DTT 是一种小分子，是二硫赤藓糖醇 (DTE) 的差向异构化合物。这些还原剂产品由 湖南汇百益 提供。

作用机制

DTT 参与二硫键交换反应。DTT 在 1-10 mM 范围内用于蛋白质 SS 还原，并且能够穿过生物膜。

还原性

二硫苏糖醇是一种强还原剂，pH 7 时氧化还原电位为 -0.33 V。二硫键还原后会发生两个连续的硫醇-二硫键交换反应（参见下图 2）。由于 DTT 中的第二个硫醇具有增加的闭环倾向，因此还原通常会持续经过混合二硫化物物质。这会导致氧化 DTT 的形成并留下还原的二硫键。DTT 的还原能力仅限于 pH 值大于 7，因为只有带负电的硫醇盐形式才具有反应性。硫醇基团的 pKa 值为 9.2 和 10.1。

使用 DTT（二硫苏糖醇）还原蛋白质或肽的方案

减少蛋白质或肽溶液中半胱氨酸的通用方案

用水配制 1M 二硫苏糖醇 DTT 原液，最好新鲜配制（尽量不要吸入 DTT）。

将 DTT 添加到蛋白质或肽溶液（缓冲液中）中，直至最终浓度为 1mM 至 10mM DTT。孵育 10 分钟。至 30 分钟 如果在较高温度（例如 37 摄氏度或 56 摄氏度）下孵育，还原效果可能会稍好一些。但是，室温或冰也应该起作用。

烷基化前还原溶液中的蛋白质或肽

如上所述减少蛋白质。

以比 DTT 使用的浓度至少高 3 倍的 NEM 摩尔浓度孵育二硫键还原的蛋白质或肽样品。孵育 30 分钟。至 1 小时。

如果需要，透析掉 DTT 或 NEM。

溶解度

DTT 极易溶于水，形成澄清溶液。DTT也可溶于乙醇、氯仿、乙酸乙酯等。

DTT 使用的推荐浓度

在大多数应用中，二硫苏糖醇可以作为 2-巯基乙醇的替代品。      

储存与稳定性

DTT溶液应每天新鲜配制。如果储存不当（包括室温和溶液形式），其还原能力可能会降低。尽管与其他还原剂相比，DTT 被空气直接氧化的可能性较低，但应尽量减少与空气的接触。

记录的 DTT 溶液在不同 pH 值和温度下的半衰期（全部在 M 磷酸钾缓冲液中）：

• pH 6.5 @ 20°C = 40 小时
  
• pH 7.5 @ 20°C = 10 小时
  
• pH 8.5 @ 20°C = 1.4 小时
  
• pH 8.5 @ 0°C = 11 小时
  
• pH 8.5 @ 40°C = 0.2 小时
  
• pH 8.5 @20°C (+0.1 mM Cu 2+ ) = 0.6 小时
  
• pH 8.5 @20°C (+0.1 mM EDTA) = 4 小时
  

注意：随着 pH 值的降低，DTT 的还原剂效力逐渐减弱。TCEP HCl是一种替代还原剂，更稳定，即使在低 pH 条件下也能发挥作用。了解更多（DDT 与 TCEP）

 DTT的应用

蛋白质组学/蛋白质科学

DTT 常用于二硫键交换反应的研究，以在电泳分析前还原蛋白质的二硫键并重建蛋白质。去除 DTT 的过程是通过透析或凝胶过滤等脱盐程序进行的。

DTT 阻止半胱氨酸残基之间分子内和分子间二硫键的形成。可以使用额外的变性技术（例如升高温度或添加强变性剂）进一步靶向溶剂无法接触的二硫键

抗氧化剂

作为一种抗氧化剂，DTT 被用作活细胞中抵御电离辐射的保护剂

硫醇化DNA

硫醇化 DNA 在存在氧气的溶液中形成二聚体，导致偶联反应降低。例如，DNA 可以固定在生物传感器中的金上。二硫苏糖醇会与 DNA 溶液发生反应，然后通过过滤或色谱法去除。

细胞凋亡

下图显示了不同试剂影响硝普钠和S-亚硝基-N-乙酰青霉胺分解或抑制其作用的位置。二硫苏糖醇加速S-亚硝基-N-乙酰青霉胺和硝普钠的分解。血红蛋白 (Hb) 可阻断 S-亚硝基-N-乙酰青霉胺的作用。超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（cat）和去铁胺（DFO）抑制硝普钠的作用。

生物燃料

研究发现 DTT 可用于提高生物燃料生产乙醇的效率。此处的附加阅读：还原剂二硫苏糖醇对梭菌菌株 P11 生产乙醇和乙酸的影响。生物燃料，特别是生物乙醇，已经作为燃料添加剂用于运输行业。生物乙醇是用玉米和其他富含淀粉的原料进行商业生产的。在巴西，生物燃料是用甘蔗生产的。目前正在进行关于从其他糖料作物生产生物乙醇的研究。

氧化剂

二硫苏糖醇用作氧化剂以防止混合二硫化物种类的聚集。在某些情况下，二硫苏糖醇可能形成加合物，导致其不环化，因为没有剩余的游离硫醇。

二硫苏糖醇（DTT）又称克莱兰德试剂，是一种小分子氧化还原试剂。其氧化形式是二硫键键合的六元环。它用于分解蛋白质二硫键并稳定酶和其他蛋白质。DTT 是一种小分子，是二硫赤藓糖醇 (DTE) 的差向异构化合物。这些还原剂产品由 湖南汇百益 提供。

作用机制

DTT 参与二硫键交换反应。DTT 在 1-10 mM 范围内用于蛋白质 SS 还原，并且能够穿过生物膜。

还原性

二硫苏糖醇是一种强还原剂，pH 7 时氧化还原电位为 -0.33 V。二硫键还原后会发生两个连续的硫醇-二硫键交换反应（参见下图 2）。由于 DTT 中的第二个硫醇具有增加的闭环倾向，因此还原通常会持续经过混合二硫化物物质。这会导致氧化 DTT 的形成并留下还原的二硫键。DTT 的还原能力仅限于 pH 值大于 7，因为只有带负电的硫醇盐形式才具有反应性。硫醇基团的 pKa 值为 9.2 和 10.1。

使用 DTT（二硫苏糖醇）还原蛋白质或肽的方案

减少蛋白质或肽溶液中半胱氨酸的通用方案

用水配制 1M 二硫苏糖醇 DTT 原液，最好新鲜配制（尽量不要吸入 DTT）。

将 DTT 添加到蛋白质或肽溶液（缓冲液中）中，直至最终浓度为 1mM 至 10mM DTT。孵育 10 分钟。至 30 分钟 如果在较高温度（例如 37 摄氏度或 56 摄氏度）下孵育，还原效果可能会稍好一些。但是，室温或冰也应该起作用。

烷基化前还原溶液中的蛋白质或肽

如上所述减少蛋白质。

以比 DTT 使用的浓度至少高 3 倍的 NEM 摩尔浓度孵育二硫键还原的蛋白质或肽样品。孵育 30 分钟。至 1 小时。

如果需要，透析掉 DTT 或 NEM。

溶解度

DTT 极易溶于水，形成澄清溶液。DTT也可溶于乙醇、氯仿、乙酸乙酯等。

DTT 使用的推荐浓度

在大多数应用中，二硫苏糖醇可以作为 2-巯基乙醇的替代品。      

储存与稳定性

DTT溶液应每天新鲜配制。如果储存不当（包括室温和溶液形式），其还原能力可能会降低。尽管与其他还原剂相比，DTT 被空气直接氧化的可能性较低，但应尽量减少与空气的接触。

记录的 DTT 溶液在不同 pH 值和温度下的半衰期（全部在 M 磷酸钾缓冲液中）：

• pH 6.5 @ 20°C = 40 小时
  
• pH 7.5 @ 20°C = 10 小时
  
• pH 8.5 @ 20°C = 1.4 小时
  
• pH 8.5 @ 0°C = 11 小时
  
• pH 8.5 @ 40°C = 0.2 小时
  
• pH 8.5 @20°C (+0.1 mM Cu 2+ ) = 0.6 小时
  
• pH 8.5 @20°C (+0.1 mM EDTA) = 4 小时
  

注意：随着 pH 值的降低，DTT 的还原剂效力逐渐减弱。TCEP HCl是一种替代还原剂，更稳定，即使在低 pH 条件下也能发挥作用。了解更多（DDT 与 TCEP）

 DTT的应用

蛋白质组学/蛋白质科学

DTT 常用于二硫键交换反应的研究，以在电泳分析前还原蛋白质的二硫键并重建蛋白质。去除 DTT 的过程是通过透析或凝胶过滤等脱盐程序进行的。

DTT 阻止半胱氨酸残基之间分子内和分子间二硫键的形成。可以使用额外的变性技术（例如升高温度或添加强变性剂）进一步靶向溶剂无法接触的二硫键

抗氧化剂

作为一种抗氧化剂，DTT 被用作活细胞中抵御电离辐射的保护剂

硫醇化DNA

硫醇化 DNA 在存在氧气的溶液中形成二聚体，导致偶联反应降低。例如，DNA 可以固定在生物传感器中的金上。二硫苏糖醇会与 DNA 溶液发生反应，然后通过过滤或色谱法去除。

细胞凋亡

下图显示了不同试剂影响硝普钠和S-亚硝基-N-乙酰青霉胺分解或抑制其作用的位置。二硫苏糖醇加速S-亚硝基-N-乙酰青霉胺和硝普钠的分解。血红蛋白 (Hb) 可阻断 S-亚硝基-N-乙酰青霉胺的作用。超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（cat）和去铁胺（DFO）抑制硝普钠的作用。

生物燃料

研究发现 DTT 可用于提高生物燃料生产乙醇的效率。此处的附加阅读：还原剂二硫苏糖醇对梭菌菌株 P11 生产乙醇和乙酸的影响。生物燃料，特别是生物乙醇，已经作为燃料添加剂用于运输行业。生物乙醇是用玉米和其他富含淀粉的原料进行商业生产的。在巴西，生物燃料是用甘蔗生产的。目前正在进行关于从其他糖料作物生产生物乙醇的研究。

氧化剂

二硫苏糖醇用作氧化剂以防止混合二硫化物种类的聚集。在某些情况下，二硫苏糖醇可能形成加合物，导致其不环化，因为没有剩余的游离硫醇。

二硫苏糖醇（DTT）又称克莱兰德试剂，是一种小分子氧化还原试剂。其氧化形式是二硫键键合的六元环。它用于分解蛋白质二硫键并稳定酶和其他蛋白质。DTT 是一种小分子，是二硫赤藓糖醇 (DTE) 的差向异构化合物。这些还原剂产品由 湖南汇百益 提供。

作用机制

DTT 参与二硫键交换反应。DTT 在 1-10 mM 范围内用于蛋白质 SS 还原，并且能够穿过生物膜。

还原性

二硫苏糖醇是一种强还原剂，pH 7 时氧化还原电位为 -0.33 V。二硫键还原后会发生两个连续的硫醇-二硫键交换反应（参见下图 2）。由于 DTT 中的第二个硫醇具有增加的闭环倾向，因此还原通常会持续经过混合二硫化物物质。这会导致氧化 DTT 的形成并留下还原的二硫键。DTT 的还原能力仅限于 pH 值大于 7，因为只有带负电的硫醇盐形式才具有反应性。硫醇基团的 pKa 值为 9.2 和 10.1。

使用 DTT（二硫苏糖醇）还原蛋白质或肽的方案

减少蛋白质或肽溶液中半胱氨酸的通用方案

用水配制 1M 二硫苏糖醇 DTT 原液，最好新鲜配制（尽量不要吸入 DTT）。

将 DTT 添加到蛋白质或肽溶液（缓冲液中）中，直至最终浓度为 1mM 至 10mM DTT。孵育 10 分钟。至 30 分钟 如果在较高温度（例如 37 摄氏度或 56 摄氏度）下孵育，还原效果可能会稍好一些。但是，室温或冰也应该起作用。

烷基化前还原溶液中的蛋白质或肽

如上所述减少蛋白质。

以比 DTT 使用的浓度至少高 3 倍的 NEM 摩尔浓度孵育二硫键还原的蛋白质或肽样品。孵育 30 分钟。至 1 小时。

如果需要，透析掉 DTT 或 NEM。

溶解度

DTT 极易溶于水，形成澄清溶液。DTT也可溶于乙醇、氯仿、乙酸乙酯等。

DTT 使用的推荐浓度

在大多数应用中，二硫苏糖醇可以作为 2-巯基乙醇的替代品。      

储存与稳定性

DTT溶液应每天新鲜配制。如果储存不当（包括室温和溶液形式），其还原能力可能会降低。尽管与其他还原剂相比，DTT 被空气直接氧化的可能性较低，但应尽量减少与空气的接触。

记录的 DTT 溶液在不同 pH 值和温度下的半衰期（全部在 M 磷酸钾缓冲液中）：

• pH 6.5 @ 20°C = 40 小时
  
• pH 7.5 @ 20°C = 10 小时
  
• pH 8.5 @ 20°C = 1.4 小时
  
• pH 8.5 @ 0°C = 11 小时
  
• pH 8.5 @ 40°C = 0.2 小时
  
• pH 8.5 @20°C (+0.1 mM Cu 2+ ) = 0.6 小时
  
• pH 8.5 @20°C (+0.1 mM EDTA) = 4 小时
  

注意：随着 pH 值的降低，DTT 的还原剂效力逐渐减弱。TCEP HCl是一种替代还原剂，更稳定，即使在低 pH 条件下也能发挥作用。了解更多（DDT 与 TCEP）

 DTT的应用

蛋白质组学/蛋白质科学

DTT 常用于二硫键交换反应的研究，以在电泳分析前还原蛋白质的二硫键并重建蛋白质。去除 DTT 的过程是通过透析或凝胶过滤等脱盐程序进行的。

DTT 阻止半胱氨酸残基之间分子内和分子间二硫键的形成。可以使用额外的变性技术（例如升高温度或添加强变性剂）进一步靶向溶剂无法接触的二硫键

抗氧化剂

作为一种抗氧化剂，DTT 被用作活细胞中抵御电离辐射的保护剂

硫醇化DNA

硫醇化 DNA 在存在氧气的溶液中形成二聚体，导致偶联反应降低。例如，DNA 可以固定在生物传感器中的金上。二硫苏糖醇会与 DNA 溶液发生反应，然后通过过滤或色谱法去除。

细胞凋亡

下图显示了不同试剂影响硝普钠和S-亚硝基-N-乙酰青霉胺分解或抑制其作用的位置。二硫苏糖醇加速S-亚硝基-N-乙酰青霉胺和硝普钠的分解。血红蛋白 (Hb) 可阻断 S-亚硝基-N-乙酰青霉胺的作用。超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（cat）和去铁胺（DFO）抑制硝普钠的作用。

生物燃料

研究发现 DTT 可用于提高生物燃料生产乙醇的效率。此处的附加阅读：还原剂二硫苏糖醇对梭菌菌株 P11 生产乙醇和乙酸的影响。生物燃料，特别是生物乙醇，已经作为燃料添加剂用于运输行业。生物乙醇是用玉米和其他富含淀粉的原料进行商业生产的。在巴西，生物燃料是用甘蔗生产的。目前正在进行关于从其他糖料作物生产生物乙醇的研究。

氧化剂

二硫苏糖醇用作氧化剂以防止混合二硫化物种类的聚集。在某些情况下，二硫苏糖醇可能形成加合物，导致其不环化，因为没有剩余的游离硫醇。