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有些药物可以抑制细菌的生长,但不见得在蛋白层次明显表现出来。你可以尝试从mRNA水平进行考虑或者转录因子角度进行考虑。mRNA水平的,你可以做mRNA表达谱芯片来看看你的mRNA表达的情况,相信在IPTG的作用下与没有IPTG组对比的mRNA表达是有比较大的差异的。但蛋白的表达就不见得了。一般是将菌摇到OD600=0.4-0.6,然后加入终浓度1mM的IPTG(这个一般不变,诱导不出来再考虑适当多加点,例如2-5mM),但是诱导时间和诱导温度根据诱导蛋白大小、性质的不同而不同,需要摸索的,你可以做个预实验,隔两个小时取样,最后SDS-PAGE,寻找合适诱导时间,如果不想这么麻烦,直接过夜诱导.诱导温度的话一般20-30℃的都有,我同学有次用16℃诱导出来的.
湖南汇百益新材料有限公司位于怀化市洪江循环高新产业园区,经过多年发展,现已形成以“糖化学”“生物缓冲剂”“体外诊断试剂原材料”“高纯生物基础试剂”为主导的,集研发,生产,销售和服务于一体的国家高新技术企业。主打产品异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG),自主研发,自主生产,已货专利,价格实惠,纯度高,如有相关需求,欢迎点击网站上联系方式咨询!
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