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详细信息


湖南汇百益蛋白酶K产品性质与注意事项

产品描述:

Proteinase K(蛋白酶K)是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶,其相对分子量约为29.3 kDa,可切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。Proteinase K应用广泛,可用于制备脉冲电泳的染色体DNA,蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶等实验,而变性剂如SDS(1%)可提高其活性,常用工作浓度为50-100 µg/mL,根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH、温度等因素确定具体的工作浓度。

 

产品性质:

1)本品来源于基因重组酵母菌株;

2)纯度(Native PAGE电泳检测):≥95%;

3)比活性值(Specific activity):≥30 U/mg蛋白;

4)不含RNase和DNase;

5)在尿素和SDS中活性稳定存在;

6)在较广的pH范围内(pH 4.0 – 12.0)均有活性,最佳pH范围为pH 7.5 - 9.0;

7)反应条件:反应缓冲液中37℃ - 70℃温育1 h。推荐反应温度选择70℃;

8)活力单位定义:在37℃,pH 7.5的条件下,每分钟释放1 µM酪氨酸所需要的Proteinase K量定义为1个活性单位;

9)失活方法:反应体系中加入PMSF或DFP抑制剂即可失活,65℃温育10-15 min可部分失活。

 

运输和保存方法:

冰袋运输。4℃干燥保存,有效期3年。更长期保存,可置于-20℃冷冻保存。

使用方法

1. 20-40 mg/mL Proteinase K储存液的配制

1)将干粉溶解于稀释缓冲液中,配制成40-80 mg/mL原液;

【注】:稀释缓冲液配方:20 mM Tris-HCl (pH 7.4), 1 mM CaCl2。

2)使用低蛋白吸附的0.22 µm滤器过滤除菌;

3)加入等体积无菌甘油,配制成含50%甘油的Proteinase K储存液。

【注】:Proteinase K储存液4℃保存1年。若需反复使用,需分装保存。

2. 按照核酸提取说明书添加指定量Proteinase K储存液即可。

 

注意事项:

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2)启用后如需反复使用,需置于-20℃~-80℃冰箱冷冻或者配制成溶液后过滤除菌分装保存。

3)本产品仅作科研用途!

 

素材来源于网络

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